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  • 病毒透射電鏡病毒標本制備實驗——免疫吸附法

    實驗方法原理有時由于病毒量少,用普通懸滴法在電鏡下難以發現稀少散在的病毒粒子,則可用免疫吸附電鏡法。主要是利用相應的病毒抗血清來吸附病毒,用本法檢測病毒,快速、靈敏、特異性強,是可靠的電鏡病毒診斷技術之一,也可用于病毒快速診斷。實驗材料病毒試劑、試劑盒磷鎢酸儀器、耗材透射電鏡實驗步驟將抗病毒血清分別稀釋為 1: 200~1: 6 400, 然后將不同稀釋度的抗病毒血清分別滴于蠟盤或蠟紙上,將有膜銅網覆蓋漂浮于液面上(室溫 18~20℃) 孵育 5 min, 然后再將銅網移至病毒懸液中漂浮室溫反應 15min, 取出銅網吸干,用蒸餾水漂洗 1-2次,再用 1%-2%磷鎢酸染 3-5 min, 用濾紙吸去負染液,干燥后電鏡檢查,其病毒的檢測率要比一般懸滴法為高。......閱讀全文

    病毒透射電鏡病毒標本制備實驗——免疫吸附法

    實驗方法原理有時由于病毒量少,用普通懸滴法在電鏡下難以發現稀少散在的病毒粒子,則可用免疫吸附電鏡法。主要是利用相應的病毒抗血清來吸附病毒,用本法檢測病毒,快速、靈敏、特異性強,是可靠的電鏡病毒診斷技術之一,也可用于病毒快速診斷。實驗材料病毒試劑、試劑盒磷鎢酸儀器、耗材透射電鏡實驗步驟將抗病毒血清分別

    病毒透射電鏡病毒標本制備實驗4

    直接取材鏡檢法實驗材料病毒試劑、試劑盒磷鎢酸儀器、耗材透射電鏡實驗步驟為了進行天花、水痘、皰疹等病毒的臨床快速診斷,可用毛細吸管直接刺入病人皮膚皰疹內吸取少量泡液,立即滴于有膜的銅網上,稍干后即用 1%-2% 的磷鎢酸溶液進行負染,待干后立即用電鏡觀察。于電鏡下常可于短時間內發現典型的病毒顆粒。注意

    病毒透射電鏡病毒標本制備實驗1

    懸滴標本法實驗方法原理病毒等微小顆粒標本可取其培養物經稀釋或分離提純后直接滴于附有支持膜的載網上用電鏡觀察。實驗材料病毒試劑、試劑盒稀釋液儀器、耗材透射電鏡實驗步驟懸液應盡量除去雜質如培養基殘渣,細胞碎片、糖類及各種鹽類的結晶等,這些雜質的存在會干擾染色及電鏡觀察。用該法的缺點是由于電子穿透能力很弱

    病毒透射電鏡病毒標本制備實驗3

    免疫吸附法實驗方法原理有時由于病毒量少,用普通懸滴法在電鏡下難以發現稀少散在的病毒粒子,則可用免疫吸附電鏡法。主要是利用相應的病毒抗血清來吸附病毒,用本法檢測病毒,快速、靈敏、特異性強,是可靠的電鏡病毒診斷技術之一,也可用于病毒快速診斷。實驗材料病毒試劑、試劑盒磷鎢酸儀器、耗材透射電鏡實驗步驟將抗病

    病毒透射電鏡病毒標本制備實驗2

    實驗方法原理病毒研究中用磷鎢酸染色后發現在黑色背景中病毒粒子如同一個亮晶晶的「空洞」。爾后用磷鎢酸對飛噬菌體染色也見到同樣的現象,即將這種現象稱為「負染色」。負染色是一種反襯染色,即高密度物質如重金屬磷鎢酸、醋酸鈾等在透射電鏡下形成黑色的背景反襯低密度的標本如病毒為白色透亮,從而清楚地顯示出被襯物的

    病毒透射電鏡病毒標本制備實驗——懸滴標本法

    實驗方法原理病毒等微小顆粒標本可取其培養物經稀釋或分離提純后直接滴于附有支持膜的載網上用電鏡觀察。實驗材料病毒試劑、試劑盒稀釋液儀器、耗材透射電鏡實驗步驟懸液應盡量除去雜質如培養基殘渣,細胞碎片、糖類及各種鹽類的結晶等,這些雜質的存在會干擾染色及電鏡觀察。用該法的缺點是由于電子穿透能力很弱,只能觀察

    病毒透射電鏡病毒標本制備

    實驗方法原理 病毒等微小顆粒標本可取其培養物經稀釋或分離提純后直接滴于附有支持膜的載網上用電鏡觀察。實驗材料 病毒試劑、試劑盒 稀釋液儀器、耗材 透射電鏡實驗步驟 懸液應盡量除去雜質如培養基殘渣,細胞碎片、糖類及各種鹽類的結晶等,這些雜質的存在會干擾染色及電鏡觀察。用該法的缺點是由于電子穿透能力很弱

    病毒透射電鏡病毒標本制備實驗——直接取材鏡檢法

    實驗材料病毒試劑、試劑盒磷鎢酸儀器、耗材透射電鏡實驗步驟為了進行天花、水痘、皰疹等病毒的臨床快速診斷,可用毛細吸管直接刺入病人皮膚皰疹內吸取少量泡液,立即滴于有膜的銅網上,稍干后即用 1%-2% 的磷鎢酸溶液進行負染,待干后立即用電鏡觀察。于電鏡下常可于短時間內發現典型的病毒顆粒。注意事項其他此方法

    病毒透射電鏡病毒標本制備實驗——負染色技術

    實驗方法原理病毒研究中用磷鎢酸染色后發現在黑色背景中病毒粒子如同一個亮晶晶的「空洞」。爾后用磷鎢酸對飛噬菌體染色也見到同樣的現象,即將這種現象稱為「負染色」。負染色是一種反襯染色,即高密度物質如重金屬磷鎢酸、醋酸鈾等在透射電鏡下形成黑色的背景反襯低密度的標本如病毒為白色透亮,從而清楚地顯示出被襯物的

    病毒免疫熒光實驗_病毒染色標本的制備

    實驗材料待檢測病毒試劑、試劑盒丙酮0. 01mol L PBS95%乙醇二甲苯儀器、耗材玻片實驗步驟1. 培養細胞小玻片標本的制備 根據所檢測病毒種類,選擇敏感細胞進行培養,如乙型肝炎病毒用乳地鼠腎細胞 (BHK21 細胞)培養,森林腦炎病毒用綠猴腎細胞 (Vero 細胞)培養,登革熱病毒用白紋伊蚊

    病毒的分離實驗_標本法

    實驗步驟標本的采集:病毒分離常用的標本有血液,腦脊液,糞便,直腸拭子,咽喉含漱液,咽拭子,尸檢組織等。所取標本的種類視疾病性質而異。如呼吸道疾病常取咽喉洗液,咽拭子;消化道疾病取糞便,直腸拭子;神經系統疾病取腦脊液,糞便等。采取標本時應避免污染,有些標本如糞便,咽喉洗液,雖本身含有大量雜菌,但為保持

    實驗動物組織標本的制備實驗_解剖法

    通常選用家兔、豚鼠、大白鼠或小白鼠等動物,禁食24 小時。擊頭致昏,以避免麻醉或失血對胃腸道機能的影響。立即打開腹腔,取出所需的胃、腸、膽囊等。去除附著的系膜或脂肪等組織。迅速放入充氧(或95%O2+5%CO2?)保溫(37 ℃)的營養液中,并以注射器用營養液將管腔內的食物殘渣清洗干凈。實驗材料家兔

    MVA-病毒儲液制備實驗

    實驗材料成片 CEF 或 BHK-21 細胞改造的痘苗病毒試劑、試劑盒MEM-10 和 MEM-2.5 完全培養基儀器、耗材150 cm2 組織培養瓶CO2培養箱Sorvall 離心機250 ml 無菌離心瓶實驗步驟1. 用 1.5 ml 胰酶/EDTA 加 8.5 ml 的維持培養基消化 7 瓶

    MVA-病毒儲液制備實驗

    基本方案 免疫染色法滴度測定 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 成片 CEF 或 BHK-

    MVA-病毒儲液制備實驗

    實驗方法原理 實驗材料 成片 CEF 或 BHK-21 細胞改造的痘苗病毒試劑、試劑盒 MEM-10 和 MEM-2.5 完全培養基儀器、耗材 150 cm2 組織培養瓶CO2培養箱Sorvall 離心機250 ml 無菌離心瓶實驗步驟 1. 用 1.5 ml 胰酶/EDTA 加 8.5 ml

    病毒-DNA-的提取實驗——拭子標本中病毒-DNA-的提取

    實驗材料拭子標本試劑、試劑盒TE 緩沖液裂解液蛋白酶K儀器、耗材離心機棉簽實驗步驟預操作:將采有口腔、鼻腔或生殖道等處分泌物標本的棉簽置于 2 ml 生理鹽水中,洗下標本。若標本在 4 h 內處理,可置于室溫保存,否則需 4℃保存。1. 將生理鹽水中的標本以 2 000 r/min 離心 5 min

    吸附法純化病毒實驗

    實驗方法原理 實驗材料 待純化的病毒試劑、試劑盒 凝膠材料儀器、耗材 燒杯實驗步驟 磷酸鈣凝膠:這是病毒凝膠吸附法中較為常用的凝膠,由 0. 5 mol/L CaCl2 和 0. 5mol/L Na2HPO4 溶液混合制備凝膠狀沉淀物,用 0. 001mol/L 磷酸鹽緩沖液懸浮,置千 4℃ 4~5

    病毒中和實驗_固定抗血清-稀釋病毒法

    實驗材料已知標準的抗病毒血清 (20抗體單位 0. 1 ml)試劑、試劑盒已知陰性血清 (56℃ 30 min 滅活)宿主:敏感細胞、敏感動物、雞胚儀器、耗材細胞培養板水浴鍋細胞培養箱實驗步驟(以細胞培養為例):①用細胞維持液連續 10倍稀釋病毒分離物10-1~10-8);②取 0. 6ml不同濃度

    病毒中和實驗_固定病毒-稀釋抗血清法

    中和試驗 (neutralization test)是在體外適當條件下孵育病毒與特異性抗體的混合物,使病毒與抗體相互反應,再將混合物接種到敏感的宿主體內,然后測定殘存的病毒感染力的一種方法。凡是能與病毒結合,并使其失去感染力的抗體稱為中和抗體。因為病毒要依賴于活的宿主系統復制增殖,因此,中和試驗必須

    桿狀病毒儲液制備實驗

    基本方案 從懸浮培養中制備 基本方案 從單層培養中制備 噬斑試驗測定滴度 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料

    桿狀病毒儲液制備實驗

    實驗方法原理 實驗材料 懸浮培養的 Sf 9 細胞待接種的桿狀病毒(野生型的或重組)試劑、試劑盒 含10%胎牛血清的昆蟲細胞培養液 TNM-FH儀器、耗材 150 mm 培養瓶 27℃ 培養箱 倒置顯微鏡 帶有 GH-3.7 水平轉子的4℃GPR離心機 帶螺口蓋的凍存管 液氮罐 500 ml 旋轉細

    反轉錄病毒載體的制備實驗

    實驗材料二個反轉錄病毒包裝細胞株反轉錄病毒載體包含選擇性標記試劑、試劑盒PBS細胞染色液組織培養皿儀器、耗材完全的 Dulbecco 改良 Eagle 培養基低蛋白質結合的纖維素乙酸鹽注射器式濾器克隆形成環實驗步驟展開

    病毒的滴定實驗——稀釋法

    實驗步驟1. ?以維持液(0.5% 水解乳蛋白Hank's 液)將病毒作連續10 倍稀釋(每一稀釋度換一新吸管)。2. ?如選擇滴定的稀釋度為l0-6~10-8,則于試管架上排列8 支試管。l0-1~10-5共5 支管,每管如入1.8 毫升維持液;l0-6~10-8共3 管,每支加入4.5

    吸附法純化病毒實驗_?凝膠吸附法

    實驗材料待純化的病毒試劑、試劑盒凝膠材料儀器、耗材燒杯實驗步驟磷酸鈣凝膠:這是病毒凝膠吸附法中較為常用的凝膠,由 0. 5 mol/L CaCl2 和 0. 5mol/L Na2HPO4?溶液混合制備凝膠狀沉淀物,用 0. 001mol/L 磷酸鹽緩沖液懸浮,置千 4℃ 4~5小時使之充分沉淀后應用

    諾瓦克病毒實驗室檢測的標本類型

      ⑴糞便  諾如病毒檢測首選糞便標本。每份標本5g或5ml以上,直接放置于清潔、無菌、干燥的密閉容器內。容器內不可加入任何保護劑、培養基、去污劑或金屬離子,不可稀釋。  ⑵肛拭子  肛拭子標本不能長期保存,且檢出率低于糞便標本。肛拭子含糞便量很低時,如檢測結果呈弱陽性,結果容易被誤判,導致假陰性。

    細菌透射電鏡樣品制備實驗滴液法+負染法

    實驗方法原理由于生物樣品主要由碳、氫、氧、氮等元素組成,散射電子的能力很低,在電鏡下反差小。所以在進行電鏡的生物樣品制備時通常還須采用重金屬鹽染色或金屬噴鍍等方法來增加樣品的反差,提高觀察效果。負染色法就是用電子密度高,本身不顯示結構且與樣品幾乎不反應的物質(如磷鎢酸鈉或磷鎢酸鉀)來對樣品進行「染色

    細菌透射電鏡樣品制備實驗——滴液法+負染法

    透射電鏡樣品的制備方法很多。其中滴液法,或在滴液法基礎上發展出來的其他類似方法如直接貼印法、噴霧法等主要被用于觀察病毒粒子細菌的形態及生物大分子等。由于生物樣品散射電子的能力很低,所以通常還須采用重金屬鹽染色或金屬噴鍍等方法來增加樣品的反差,提高觀察效果。負染色法由于操作簡單,目前在進行透射電鏡生物

    病毒包裝技術——腺病毒載體的制備

    1 菌液的準備1.1. 取含目的質粒的甘油菌液(-80℃或-20℃冰箱中),待菌液融化后,在超凈臺用接種環劃線于氨芐抗性的平板上,37℃倒置培養12-16h。待平板長出菌落,挑選生長狀態良好的單克隆菌落。若無目的質粒的菌液,則需取庫存質粒進行轉化,然后挑單克隆搖菌。1.2. 將單克隆接種于5ml氨芐

    吸附法純化病毒實驗——紅細胞吸附法

    實驗方法原理用于某些可與紅細胞吸附的病毒的濃縮,如正粘病毒和副粘病毒,由于紅細胞吸附法是特異的,故可達到濃縮并純化的目的。實驗材料待純化的病毒試劑、試劑盒磷酸鹽緩沖液雞紅細胞懸液儀器、耗材燒杯水浴鍋實驗步驟用作吸附病毒的紅細胞一般選擇適宜動物的紅細胞,常用的是雞紅細胞。基本步驟為:① 1%~3% 雞

    實驗動物組織標本的制備實驗

    實驗材料 家兔豚鼠白鼠試劑、試劑盒 營養液儀器、耗材 注射器線浴槽實驗步驟 通常選用家兔、豚鼠、大白鼠或小白鼠等動物,禁食24 小時。擊頭致昏,以避免麻醉或失血對胃腸道機能的影響。立即打開腹腔,取出所需的胃、腸、膽囊等。去除附著的系膜或脂肪等組織。迅速放入充氧(或95%O2+5%CO2

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