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  • 發布時間:2019-04-08 22:26 原文鏈接: 吸附法純化病毒實驗——紅細胞吸附法

    實驗方法原理用于某些可與紅細胞吸附的病毒的濃縮,如正粘病毒和副粘病毒,由于紅細胞吸附法是特異的,故可達到濃縮并純化的目的。
    實驗材料

    待純化的病毒

    試劑、試劑盒

    磷酸鹽緩沖液雞紅細胞懸液

    儀器、耗材

    燒杯水浴鍋

    實驗步驟

    用作吸附病毒的紅細胞一般選擇適宜動物的紅細胞,常用的是雞紅細胞。基本步驟為:


    ① 1%~3% 雞紅細胞與病毒懸液混合, 2℃吸附 1 h 以上或過夜;


    ②1 000r/min(用福爾馬林處理的紅細胞可用 2 000r/min) 離心 10 min, 沉淀吸附病毒的紅細胞。棄上清,用冷生理鹽水洗滌 2 次;


    ③再用 1/50 原體積(雞紅細胞與病毒懸液混合液體積)的0. 01 mol/L 磷酸緩沖鹽水 (pH7. 5~7. 8), 將血細胞垂懸于 37℃水浴中保溫 2~3 h;


    ④(1 000~2 000)r/min離心 10 min, 上清即為濃縮并部分純化的病毒懸液。可將最后釋放過程重復進行1次,以回收剩余病毒。


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