氧化損傷在遺傳性朊病毒病發生中的作用機制
近日，中國科學院武漢病毒研究所在朊病毒導致神經變性疾病的機制研究中取得新進展，相關研究成果以Methionine oxidation accelerates the aggregation and enhances the neurotoxicity of the D178N variant of the human prion protein 為題在Biochimica et Biophysica Acta -Molecular Basis of Disease 刊印發表（BBA. 2014 Dec；1842(12 Pt A):2345-56. doi: 10.1016/j.bbadis），第一作者為博士生馮博雅，通訊作者為周拯副研究員和肖庚富研究員。 朊病 毒病（prion diseases）是由朊病毒蛋白構象的異常變化引起的神經系統變性疾病，人的庫魯病（Kuru）、吉斯綜合癥（GSS）、致......閱讀全文
病毒轉化細胞
實驗概要病毒轉化細胞實驗步驟1．血液制備：檸檬酸（Citric Acide）或肝素抗凝取血1～2ml，分裝入管中，每管0.5ml全血，置于4℃冰箱中30分鐘。2．EBV病毒轉化：從液氮中取出凍存的0.5ml全血，在37℃水中迅速解凍。3．將解凍細胞與10ml不含血清的RPMI 1640混合，2500
巨細胞病毒的病毒特征
病毒性狀 CMV具有典型的皰疹病毒形態，其DNA結構也與HSV相似，但比HSV大5%。本病毒對宿主或培養細胞有高度的種特異性，人巨細胞病毒（HCMV）只能感染人，及在人纖維細胞中增殖。病毒在細胞培養中增殖緩慢，復制周期長，初次分離培養需30～40天才出現細胞病變，其特點是細胞腫大變園，核變大，
如何選擇病毒細胞培養的病毒？
病毒會感染幾乎每一種生物機體，無論是人、老鼠、跳蚤還是細菌，都逃脫不了病毒的攻擊。但是這些寄生生物無法獨立生活：它們需要進入宿主細胞內部，這也就是為什么病毒學家也需要培養細胞，不過要想掌握這種細胞培養技術，就必須對病毒和宿主細胞都有所了解。 因為這個過程并不是簡單的把病毒和細胞都放到培養皿中就
Nature：武漢病毒所確認病毒進入細胞路徑
自18年前的SARS爆發以來，在其天然宿主蝙蝠中發現了許多嚴重的急性呼吸綜合癥相關冠狀病毒（SARSr-CoV）。先前的研究表明，其中一些蝙蝠SARSr-CoV具有感染人類的潛力。 2020年2月3日，中國科學院武漢病毒所石正麗團隊在Nature 在線發表題為“A pneumonia outb
免疫細胞抗病毒
抗病毒免疫就是機體針對病毒的免疫，包括非特異性免疫和特異性免疫兩種免疫模式。 非特異性免疫是控制病毒復制和擴散的關鍵，作為除皮膚外的第二道免疫防線，可阻斷限制病毒的增殖和擴散。 特異性免疫包括細胞免疫和體液免疫，是人體免疫的第三道防線。T細胞主導的細胞免疫分泌各類細胞因子，介導識別、消滅被病
巨細胞病毒防治
CMV在人群中感染非常廣泛，中國成人感染率達95%以上，通常呈隱性感染，多數感染者無臨床癥狀，但在一定條件下侵襲多個器官和系統可產生嚴重疾病。病毒可侵入肺、肝、腎、唾液腺、乳腺其他腺體，以及多核白細胞和淋巴細胞，可長期或間隙地自唾液、乳汗血液、尿液、精液、子宮分泌物多處排出病毒。通常口腔，生殖道，胎
病毒感染細胞實驗
病毒感染細胞實驗可以用于：（1）將目的基因整合到大多數真核細胞。（2）將目的基因包裝成病毒來感染細胞，從而得到表達滿足實驗需求。實驗方法原理病毒包裝的原理質粒DNA為能轉錄出慢病毒遺傳物質（RNA），但不能翻譯出慢病毒的外殼及蛋白成分的載體質粒，其同時連有目的基因和報告基因，psPAX2為能表達慢病
巨細胞病毒介紹
? 巨細胞病毒（Cytomegalovirus CMV)亦稱細胞包涵體病毒，由于感染的細胞腫大，并具有巨大的核內包涵體，故名。 一、生物學性狀 CMV具有典型的皰疹病毒形態，其DNA結構也與HSV相似，但比HSV大5%。本病毒對宿主或培養細胞有高度的種特異性，人巨細胞病毒（HCMV)只能感染人，
慢病毒轉染細胞步驟
一、慢病毒 ?轉染貼壁細胞實驗方法 1、慢病毒轉染前18-24小時，將貼壁細胞 ?以1×10^5/孔鋪到24孔板中。使細胞在慢病毒轉染時的數量為2×10^5/孔左右。 2、第二天，用含有6 μg/ml polybrene的2ml新鮮培養基 ?替換原培養基，加入適量病毒懸液。37℃孵育。
慢病毒轉染細胞步驟
一、慢病毒轉染 貼壁細胞實驗方法1、慢病毒轉染 前18-24小時，將貼壁細胞以1×10^5/孔鋪到24孔板中。使細胞在慢病毒轉染時的數量為2×10^5/孔左右。2、第二天，用含有6 μg/ml polybrene的2ml新鮮培養基替換原培養基，加入適量病毒懸液。37℃孵育。3、(對polybrene
病毒感染細胞實驗
病毒感染細胞實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 病毒包裝的原理質粒DNA為能轉錄出慢病毒遺傳物質（RNA），但不能翻譯出慢病毒的外殼及蛋白成分的載體質粒，其同時連有目的基因和
T細胞變身異型細胞大戰EB病毒
? 為早日將其他B細胞體內病毒逼出體外，參謀T細胞想出一個辦法：每個細胞的內力就像一條溪流，或許溪流之力難以將病毒逼出體外，可是聚溪成海，將這些點滴內力聚在一起則威力驚人，將之在每個細胞的體內循環，病毒必受不了壓力，而逼出體外，外面先鋒可乘機將其斬首。可是既然病毒受不了這個壓力，那B淋巴細胞可以忍受
腎小管細胞氧化性損傷模型
材料：DMEM培養基(Gibco BRL Co生產)， 無糖DMEM培養基(Gibco BRL Co生產)，NRKSIE 鼠。腎小管細胞株(購于華西醫科大學內科實驗室)，乳 酸鈉(國產分析純試劑)。?方法 腎小管細胞培養 NRKSIE鼠腎小管細胞 用0．25% 胰蛋白酶消化，將小管細胞分離成單個細胞
怎么預防巨細胞病毒
觀點——新生兒感染率高 巨細胞病毒一旦侵入人體，將長期存在于體內。血清學檢驗證實，成人中50%以上的人有巨細胞病毒感染，育齡婦女的感染率達60%，且大多數免疫正常的人常無癥狀表現，處于亞臨床狀態，在此狀態下孕婦仍可以傳染給胎兒（孕婦感染后傳染給胎兒的可能性為30%-40%），對胎兒的生長發育造
巨細胞病毒的防治
CMV在人群中感染非常廣泛，中國成人感染率達95%以上，通常呈隱性感染，多數感染者無臨床癥狀，但在一定條件下侵襲多個器官和系統可產生嚴重疾病。病毒可侵入肺、肝、腎、唾液腺、乳腺其他腺體，以及多核白細胞和淋巴細胞，可長期或間隙地自唾液、乳汗血液、尿液、精液、子宮分泌物多處排出病毒。通常口腔，生殖道，胎
巨細胞病毒類型介紹
1．根據其感染的次序可分為：⑴原發感染(primaryinfection）：指宿主初次感染CMV，而在感染前缺乏對CMV的任何特異性抗體（6個月以前的嬰兒可有從母體被動獲得的IgG抗體）；⑵再發感染（recurrentinfection），是由于潛伏在宿主體內的病毒被重新激活（reactivatio
細胞化學詞匯病毒癌基因
中文名稱：病毒癌基因外文名稱：viral oncogene類????型：癌基因位????置：存在于病毒（基因組屬????于：RNA病毒定? ? 義：病毒癌基因（viral oncogene）：是存在于致癌DNA病毒和一部分逆轉錄病毒基因組中能使靶細胞發生惡性轉化的基因。它不編碼病毒結構成分，對病毒無
病毒感染細胞實驗（一）
實驗方法原理 一、病毒的種類病毒有很多種，常見的有慢病毒和腺病毒1.1慢病毒1.1.1原理慢病毒（Lentivirus）是逆轉錄病毒的一種。構建的siRNA / miRNA慢病毒載體，與化學合成的siRNA 和基于瞬時表達載體構建的普通 siRNA 載體相比，一方面可以擴增替代瞬時表達載體使
慢病毒轉染肝細胞方法
Lentivirus Transduction of Hematopoietic CellsMing-Jie Li and John J. RossiDivision of Molecular Biology, Beckman Research Institute of the City of Ho
巨細胞病毒的概述
巨細胞病毒（Cytomegalovirus）是一種皰疹病毒組DNA病毒。亦稱細胞包涵體病毒，由于感染的細胞腫大，并具有巨大的核內包涵體。[1] 巨細胞病毒分布廣泛，其他動物皆可遭受感染，引起以生殖泌尿系統，中樞神經系統和肝臟疾患為主的各系統感染，從輕微無癥狀感染直到嚴重缺陷或死亡。
巨細胞病毒的特征
病毒性狀 CMV具有典型的皰疹病毒形態，其DNA結構也與HSV相似，但比HSV大5%。本病毒對宿主或培養細胞有高度的種特異性，人巨細胞病毒（HCMV）只能感染人，及在人纖維細胞中增殖。病毒在細胞培養中增殖緩慢，復制周期長，初次分離培養需30～40天才出現細胞病變，其特點是細胞腫大變園，核變大，
巨細胞病毒的類型
1．根據其感染的次序可分為：⑴原發感染(primaryinfection）：指宿主初次感染CMV，而在感染前缺乏對CMV的任何特異性抗體（6個月以前的嬰兒可有從母體被動獲得的IgG抗體）；⑵再發感染（recurrentinfection），是由于潛伏在宿主體內的病毒被重新激活（reactivat
病毒感染細胞實驗（二）
三、質粒DNA在大腸桿菌里轉化連接上目的基因的質粒轉化大腸桿菌是為了讓目的基因在大腸桿菌里擴增，然后提取質粒，以下是質粒DNA在大腸桿菌里轉化的三步驟。3.1大腸桿菌感受態細胞的制備1）從大腸桿菌平板上挑取一個單菌落于3mlLB培養基的試管中，37℃振蕩培養過夜。2）取0.4ml菌液轉接到40mlL
病毒的血清學實驗——病毒紅細胞凝集試驗
實驗方法原理有些病毒（如流感病毒等）表面有血凝素（為糖蛋白）在一定條件下，能與雞，豚鼠的紅細胞表面的糖蛋白受體結合而發生凝集現象。利用病毒血凝試驗可以檢測某些病毒的存在，滴定病毒的血凝效價，便可大致估計病毒顆粒的數量（1 個血凝單位=106病毒顆粒）。若血清中出現特異性抗體與相應病毒結合后，使病毒失
過氧化氫酶病毒感染、氧化損傷與CAT的作用
病毒感染與氧化損傷密切相關：一方面，病毒感染引起ROS釋放，ROS引起細胞膜磷脂層的脂質過氧化，這一過程生成的產物可以跨越細胞膜并引起膜轉運和線粒體呼吸鏈的功能紊亂。另一方面，感染使吞噬細胞活化并釋放前氧化性細胞因子，如TNF和IL－1。因此，ROS通常被視為病毒性疾病病理進程中引起細胞損傷的元
細胞色素氧化酶試驗
試劑 1%鹽酸二甲基對苯二胺溶液。 1%α-萘酚－乙醇溶液。?試驗方法 取37℃(或低于37℃)培養20h的斜面培養物一支，將兩種試劑各2～3滴，從斜面上端滴下，并將斜面略加傾斜，使試劑混合液流經斜面上的培養物。如系平板培養物，則可用試劑混合液滴在菌落上。?結果 于2min內呈現藍色者為陽性
細胞色素氧化酶實驗
一、試劑1%鹽酸二甲基對苯二胺溶液.1%α-萘酚-乙醇溶液. 二、試驗方法取37℃（或低于37℃）培養20h的斜面培養物一支,將兩種試劑各2~3滴,從斜面上端滴下,并將斜面略加傾斜,使試劑混合液流經斜面上的培養物.如系平板培養物,則可用試劑混合液滴在菌落上.三、結果于2min內呈現藍色者為陽性.陽性
細胞色素氧化酶實驗
?一、試劑? ? 1%鹽酸二甲基對苯二胺溶液.? ? 1%α-萘酚-乙醇溶液.?二、試驗方法? ? 取37℃（或低于37℃）培養20h的斜面培養物一支,將兩種試劑各2~3滴,從斜面上端滴下,并將斜面略加傾斜,使試劑混合液流經斜面上的培養物.如系平板培養物,則可用試劑混合液滴在菌落上.?三、結果? ?
細胞色素C氧化酶染色
【臨床意義】 現代生物化學等學科中，所用細胞色素這一名稱系指細胞內含鐵元素蛋白質。但是血紅蛋白、肌紅蛋白、過氧化物酶和過氧化氫酶等除外，功能已經明確的細胞色素或是一種酶，或是氧化還原的載體。 應用二甲基萘二胺和α-萘酚做染料顯示細胞色素C氧化酶存在于骨髓細胞的胞漿內，相當于線粒體聚集的部位出現由
癌細胞能教唆正常細胞釋放“類”病毒RNA
乳腺癌為什么比其他腫瘤更具侵襲性？7月13日《Cell》報道了一項研究發現，癌細胞能迫使正常細胞像病毒一樣生長，從而使腫瘤長大、抵抗治療和擴散。科學家在患者（尤其是三陰性乳腺癌侵襲性病例）血液中發現了一種病毒類似物。賓夕法尼亞醫學院的研究人員說，破解癌細胞的這一工作原理，將有望開辟針對性治療方法