Nature子刊：一種罕見兒童肥胖癥研究取得重大突破
Prader-Willi綜合征（PWS），又稱Prader-Labhar-Willi綜合征、普氏癥、愉快木偶綜合征、隱睪-侏儒-肥胖-智力低下綜合征、肌張力減退-智力減退-性腺功能減退與肥胖綜合征。該病癥1965年由Prader等首次報道，至今已報道的病例有數百例。患有這種疾病的人在新生兒期喂養困難、生長緩慢，一般自2歲左右開始無節制飲食，因此導致體重持續增加及嚴重肥胖，需預防因肥胖而導致的糖尿病、高血脂、高血壓、脊柱側彎等癥狀。 親本印記（Parental imprinting）是表觀遺傳調控的一種形式，指配子發生過程中親本基因的選擇性差異表達。PWS可能是親本印記缺陷疾病一個最好的代表，是由第15號染色體上PWS臨界區域內缺失父親表達的基因所引起，包括核內小核糖核蛋白質。但是，基因缺失的確切代謝功能尚不清楚。患兒擁有正常語言能力，但實際智商低于普通人。與其它基因病癥不同的是，PWS并不遺傳，它是在卵子（精子）或胚胎形成......閱讀全文
研究發現植物印跡基因有較強物種特異性
記者日前從中科院昆明植物所獲悉，該所劉愛忠研究組博士生徐偉利用典型雙子葉胚乳型種子蓖麻，發展了嶄新的研究體系，并鑒別出大量新穎的印跡基因。相關成果在線發表于《核酸研究》雜志。 據介紹，基因組印記是一種非常重要的表觀遺傳學現象。在配子或合子發育過程中, 來自親本的等位基因或染色體發生差異性的表觀
昆明植物所在植物基因組印跡研究中取得進展
蓖麻基因組印跡以及其甲基化分析 基因組印記 (genetic imprinting)是一種非常重要的表觀遺傳學現象之一。在配子或合子發育過程中，來自親本的等位基因或染色體發生了差異的表觀修飾，導致了親本等位基因的差異表達（即印跡基因）。在植物中基因組印跡主要發生在被子植物的三倍體胚乳組織
outhern印跡及基因組DNA雜交技術實驗——Southern－印跡
實驗方法原理硝酸纖維膜或尼龍濾膜對單鏈DNA的吸附能力很強，當電泳后凝膠經過DNA變性處理，覆以上述濾膜，再于其上方壓上多層干燥的吸水紙，借助它對深鹽溶液的上吸作用，凝膠上的單鏈DNA將轉移到濾膜上。轉移是原位的，即DNA片段的位置保持不變。轉移結束后，經過80℃烘烤的DNA，將原位地固定于膜上。實
核移植胚胎干細胞的印跡基因甲基化研究
核移植來源的胚胎干細胞(NTES? cells)在以干細胞為基礎的細胞治療中扮演著非常重要的角色，得到全能性良好且表觀遺傳修飾正常的核移植胚胎干細胞是解決治療性克隆安全問題的重要前提。DNA甲基化修飾在基因表達和印跡基因的表達中起非常重要的作用，兩步法克隆可能存在的不完全重編程問題很可能存在于印
基因組印跡的分子機理
從目前研究結果來看，基因印跡的發生主要有以下兩種機理： 一方面，研究發現，基因組印跡的分子機理與印跡基因DNA中胞嘧啶甲基化尤其是CpG島的甲基化密切相關，胞嘧啶甲基化是DNA的一種共價修飾。另外還有特殊的染色質結構和反義轉錄產物等可能都是基因印跡產生和維持的重要因素。 基因印跡中，卵子和精
Southern－印跡實驗——印跡法
Southern印跡法是將DNA片段從電泳凝膠中轉移至膜支持物上，使DNA片段固定，因此該膜半永久性地重現出凝膠電泳的帶型。實驗方法原理本方案是專門為將瓊脂糖凝膠印跡至不帶電荷或帶正電荷的尼龍膜上而設計的，稍作修改后同樣可用于硝酸纖維素膜方法。實驗材料DNA試劑、試劑盒HClNaClTrisNaOH
分子印跡微萃取技術的研究進展
微萃取技術是一種將分析物高效萃取富集于微體積的聚合物或有機溶劑中,集采樣、萃取、濃縮、進樣于一體的無(少)溶劑、易于與其他技術在線聯用的樣品前處理方法。分子印跡聚合物是一種具有強大分子識別功能的材料,具有高效的選擇特異性,可從復雜樣品中選擇性分離富集目標分析物,在微萃取技術中得到了廣泛的應用。本文綜
Southern印跡及基因組DNA雜交技術實驗
放射性標記的探針與固定化核酸進行雜交試劑、試劑盒預雜交液SSCSDS儀器、耗材硝酸纖維素濾膜實驗步驟1. 準備適合即將進行的工作的雜交溶液。每平方厘米硝酸纖維素濾膜或尼龍膜大約需要 0.2 ml 預雜交液。預雜交液：用于檢測低豐度序列：或者6x SSC ( 或 6x SSPE)5 x Denhard
Southern印跡及基因組DNA雜交技術實驗
實驗材料 基因組 DNA試劑、試劑盒 限制性緩沖液儀器、耗材 瓊脂糖凝膠實驗步驟 1. 7~20 μg 基因組 DNA 稀釋到 500 μl 合適的限制性緩沖液中。4℃ 過夜。2. 每管加 10~20 單位限制性酶。孵育 4~6 小時。10 μl 消化液在小瓊脂糖凝膠上電泳檢測消化的程度。如果需要，
Southern印跡及基因組DNA雜交技術實驗
Southern 印跡 放射性標記的探針與固定化核酸進行雜交 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 硝酸纖維膜或尼龍濾膜對單鏈DNA的吸附能力很強，當電泳后凝膠經過DNA變
Northern印跡的制備和Northern印跡
Northern印跡的制備 預備： 1.按下述步驟，每泳道加10～20μg總RNA或 0.5～1μgpoly(A)+RNA進行甲醛/ 瓊脂糖凝膠電泳，將凝膠放在紫外線透照儀上，旁邊置一標尺進行拍照。 a. 總RNA（10～20μg）用下列溶液在65℃溫育5min：
GFP(綠色熒光蛋白基因)的免疫印跡1
[實驗原理]免疫印跡（Western blotting 或 Immunoblotting）一般由凝膠電泳、樣品的印跡和免疫學檢測三個部分組成。第一步是做SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳，使待測樣品中的蛋白質按分子量大小在凝膠中分成帶。第二步把凝膠中已分成條帶的蛋白質轉移到一種固相支持物上，用得最多的材料
蛋白印跡法有什么作用？可用來基因檢測么
蛋白質印跡法（免疫印跡試驗）即Western Blot。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中表達情況的信息。 與Southern Blo
GFP(綠色熒光蛋白基因)的免疫印跡2
第二部分：免疫印跡染色[儀器、材料與試劑](一)儀器與器具1．電泳儀(要求為大電流低電壓)2．電泳轉移槽及轉移夾3．水平搖床4．小塑料盒5．鑷子6．搪瓷盤(二)材料1．醋酸纖維膜2．濾紙3．一次性塑料手套(三)試劑1．轉移電泳緩沖液25mmo1／L Tris，192mmo1／L 甘氨酸，20％甲醇，
蛋白質印跡法的研究和應用
蛋白質印跡法是由瑞士米歇爾弗雷德里希生物研究所（Friedrich Miescher Institute）的Harry Towbin在1979年提出的。在尼爾·伯奈特（Neal Burnette）于1981年所著的《分析生物化學》（Analytical Biochemistry）中首次被稱為West
蛋白質印跡法的研究與應用
蛋白質印跡法是由瑞士米歇爾弗雷德里希生物研究所（Friedrich Miescher Institute）的Harry Towbin在1979年提出的。在尼爾·伯奈特（Neal Burnette）于1981年所著的《分析生物化學》（Analytical Biochemistry）中首次被稱為West
如何選擇蛋白印跡實驗中的印跡膜
硝酸纖維素膜（NC膜）是蛋白和核酸雜交zui常用的印跡膜，是蛋白印跡實驗的標準固相支持物。在低離子轉移緩沖液的環境下，大多數帶負電荷的蛋白質會與硝酸纖維素膜發生疏水作用而高親和力的結合在一起，雖然這其中的機制還不是十分清楚，但由于硝酸纖維素膜的這個特性，而且易于封閉非特異性結合，從而得到了廣泛的
如何選擇蛋白印跡實驗中的印跡膜？
硝酸纖維素膜（NC膜）是蛋白和核酸雜交最常用的印跡膜，是蛋白印跡實驗的標準固相支持物。在低離子轉移緩沖液的環境下，大多數帶負電荷的蛋白質會與硝酸纖維素膜發生疏水作用而高親和力的結合在一起，雖然這其中的機制還不是十分清楚，但由于硝酸纖維素膜的這個特性，而且易于封閉非特異性結合，從而得到了廣泛的應用。目
印跡轉移電泳
生物化學與分子生物學的研究工作經常需要對電泳分離后的DNA進行分子雜交，但瓊脂糖不適合于進行雜交操作，1975年，Southren創造了將DNA區帶原位轉移到硝酸基纖維素膜（NC膜）上，再進行雜交的方法，被稱為Southren印跡法。隨后，Alwine等將類似方法用于RNA印跡，被戲稱為Northe
Southern－印跡實驗
實驗方法原理?本方案是專門為將瓊脂糖凝膠印跡至不帶電荷或帶正電荷的尼龍膜上而設計的，稍作修改后同樣可用于硝酸纖維素膜方法。實驗材料?DNA試劑、試劑盒?HClNaClTrisNaOHSSC溴化乙錠儀器、耗材?電泳儀紫外透射儀實驗步驟 一、向上毛細管轉移法的轉移疊層系統：：圖一、向上毛細管轉移法的轉移
Southern印跡技術
實驗原理:Southern印跡是將DNA片斷從電泳凝膠上直接轉移至膜支持物（如硝酸纖維素膜、尼龍膜）上，使DNA片斷固定的技術。先將DNA經限制性內切酶消化成一系列片段，進行瓊脂糖凝膠電泳，各片段因分子量不同而彼此分開，然后經堿處理凝膠，使DNA的片段被變性、中和并通過毛細作用在高鹽緩沖液中在原位將
Western印跡法
這種技術是把電泳分離的組分從凝膠轉移到一種固相支持體，并以針對特定氨基酸序列的特異性試劑作為探針檢測之。Western使用的探針是抗體，它與附著于固相支持體的靶蛋白所呈現的抗原表位發生特異性反應。這種技術的作用是對非放射性標記蛋白組成的復雜混合物中的某些特異蛋白進行鑒別和鑒定。儀器：高壓鍋、玻璃勻漿
Southern－印跡實驗
印跡法 堿性緩沖液法 向下毛細管轉移法 電轉印法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 本方案是專門為將瓊脂糖凝膠印跡至不帶電荷或帶正電荷的尼龍膜上而設
分子印跡聚合物固相萃取研究進展
對最新報道的分子印跡聚合物作為固相萃取劑及其在色譜樣品前處理方面的應用進行綜述和展望,主要包括固相萃取、基質固相分散萃取、固相微萃取、攪拌棒吸附萃取和磁性材料萃取,同時總結了分子印跡聚合物制備技術面臨的挑戰和問題,提出了可能的解決方案
Northern印跡和總RNA雜交實驗——Northern印跡分析
試劑、試劑盒甲醛凝膠溶液RNA 電泳緩沖液儀器、耗材凝膠模梳齒凝膠用具實驗步驟1. 用肥皂和水徹底清洗凝膠模，梳齒和凝膠用具。2. 準備甲醛凝膠溶液。甲醛凝膠溶液（300 ml 1％ 瓊脂糖凝膠）：瓊脂糖，3.0 g10x RNA 電泳緩沖液，30 ml? ???Milli-Q 或用玻璃器皿蒸餾過的
上海生科院發現調控種子印跡基因表達的新機制
圖A：ape1l 和zdp雙突變對種子發育的影響圖B：APE1L蛋白調控擬南芥中DNA主動去甲基化途徑的工作模型 1月8日，中國科學院上海生命科學研究院上海植物逆境生物學研究中心朱健康課題組與科爾多瓦大學合作研究發現，擬南芥主動去甲基化途徑中的新組件APE1L蛋白不僅是DNA主動去甲基化途徑中的一
印跡膜的用途
中文名稱印跡膜英文名稱blotting membrane定 義在印跡時接受被轉移樣品的膜介質。如硝酸纖維素膜、尼龍膜等。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級學科）
免疫印跡優點
免疫印跡法是一項分析抗原、抗體的技術。它具有下列優點： 1、 濕的固定化基質膜柔韌, 易于操作； 2 、固定化的生物大分子可均一的與各種免疫探針接近, 不會象凝膠那樣受孔徑阻隔； 3、 免疫印跡分析只需少量試劑； 4、 孵育、洗滌的時間明顯減短； 5、可同時制作多個拷貝, 用于多種分析
RNA印跡雜交
RNA印跡雜交1）???????Northern印跡的制備預備：1．按下述步驟，每泳道加10～20μg總RNA或0.5～1μg poly(A)+RNA進行甲醛/瓊脂糖凝膠電泳，將凝膠放在紫外線透照儀上，旁邊置一標尺進行拍照。a.?總RNA（10～20μg）用下列溶液在65℃溫育5min：總RNA（1