hepg2細胞siRNA轉染條件
之前我們用過Lipo，說明書上要求細胞的密度在70%左右，同時在轉染后的4-6小時注意要換培養液，后來我們實驗室換了RFect sRNA Transfection Reagent，細胞密度在45%左右 ,設置siRNA終濃度10nM,30nM,50nM,100nM四個梯度，每個梯度最好做2個復孔，一般做轉染前一天鋪板，用來稀釋siRNA和稀釋轉染試劑的培養基必須是無血清培養基，因為血清的存在會干擾siRNA與轉染試劑的混合，并且影響轉染效率。轉染后48h收細胞做qPCR基因水平檢測或者轉染后72h收細胞提蛋白做western Blotting蛋白水平檢測。......閱讀全文
hepg2細胞siRNA轉染條件
之前我們用過Lipo，說明書上要求細胞的密度在70%左右，同時在轉染后的4-6小時注意要換培養液，后來我們實驗室換了RFect sRNA Transfection Reagent，細胞密度在45%左右 ,設置siRNA終濃度10nM,30nM,50nM,100nM四個梯度，每個梯度最好做2個復孔，一
HepG2細胞培養的條件
HepG2人肝腫瘤細胞株廣泛應用于遺傳毒理學及病毒培養等方面的研究,研究肝臟疾病發病機理及其臨床應用有著重要意義。由于其與肝細胞具有相同的生物學活性，還被用于胰島素抵抗的研究。本文對肝癌細胞培養的最佳條件做一簡單綜述。1.HepG2細胞的復蘇條件1.1 復蘇溫度的選擇唐孟萱等采用下述方法進行細胞復蘇
HePG2細胞培養注意事項
很好培養啊……你是想問這種細胞特殊的培養需要還是只是指培養細胞應注意的事項呀？就，正常操作就是，不要啥東西都用火燒一下。。。手不要碰任何瓶口，不要碰微量移液槍的插槍頭的位置，手、胳膊不要從開口的東西上面經過，如果是用細胞培養瓶培養，放入培養箱速度快一點，別打開這培養箱的門，瓶蓋不用擰得很松。如果是新
hepg2細胞換液時用吹打嗎
換液時沒有必要吹打。少量細胞貼壁的情況下，細胞生長緩慢，狀態不佳，建議重新復蘇一支細胞，或者消化現有細胞，在較小的容器如6cm dish中培養，等細胞數量較多之后再重新傳到大容器中培養。
HepG2細胞培養最佳條件的選擇
HepG2人肝腫瘤細胞株廣泛應用于遺傳毒理學及病毒培養等方面的研究,研究肝臟疾病發病機理及其臨床應用有著重要意義。由于其與肝細胞具有相同的生物學活性，還被用于胰島素抵抗的研究。本文對肝癌細胞培養的最佳條件做一簡單綜述。1.HepG2細胞的復蘇條件1.1 復蘇溫度的選擇唐孟萱等采用下述方法進行細胞復蘇
拿到人肝癌細胞HEPG2后要先這么處理
拿到人肝癌細胞HEPG2后要先這么處理。 1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培
HepG2/ADR細胞人細胞阿霉素耐藥株培養操作
1）復蘇細胞：將含有 1mLHepG2/ADR細胞人細胞阿霉素耐藥株。懸液的凍存管在 ?37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL ?培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入
HepG2/ADR細胞人細胞阿霉素耐藥株注意事項
1.?上述操作方案的數據可作為參考，實際操作已實驗室配備的耗材為準，2.?凍存時含 10%DMSO,事先加 9ml?培養液是為了稀釋 DMSO，理論上 1%DMSO對細胞性3.?隔著 PE?手套能有效防止水浴過程中導致污染4.?重懸的體積只是作為參考，具體的根據需要可進行調整5.?由于復蘇過程中已經
HepG2/ADR細胞人細胞阿霉素耐藥株復蘇操作流程
1.?準備工作，開水浴鍋，預熱試劑，超凈工作臺紫外照射 30min,找到對應細胞在液氮罐中的位置2.?紫外照射后風機吹 10min?后，酒精擦拭臺面，放入試劑和離心管，取 15ml?離心管，加入 9ml?培養液3.?在液氮罐中取出細胞，先擰松放液氮，再擰緊，將凍存管放入 PE?手套中，然后水浴融化后
HepG2/ADR細胞人細胞阿霉素耐藥株培養注意事項
1. 收到HepG2/ADR細胞人細胞阿霉素耐藥株。后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現 象發生請及 時和我們聯系。2. 仔細閱讀HepG2/ADR細胞人細胞阿霉素耐藥株。說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、比例、所需細胞因子等，確保細胞培養條件一致。若由
常見的人肝癌細胞HEPG2細胞株都有哪幾種？
通過選擇法或克隆形成法從原代培養細胞中獲得具有特殊性質或標志物的細胞稱為細胞株。穩定細胞株篩選一般是將外源DNA克隆到具有某種抗性或選擇基因的載體上，載體被轉染到宿主細胞并整合到染色體中，用載體中所含的選擇標志進行篩選，篩選得到可穩定表達目的蛋白的細胞株。那么常見的人肝癌細胞HEPG2細胞株都有哪
PI3K/Akt/mTOR信號通路
目的：通過特異性阻斷PI3K和mTOR，觀察HepG2和Hep3B細胞株PI3K/Akt/mTOR信號通路活性及生物學行為的改變，探討相關的分子機制。?方法：在培養的HepG2、Hep3B人肝癌細胞株和人正常肝細胞株QSG-7701上，以免疫印跡方法（Western blot）檢測各細胞株中PI
PI3K/Akt/mTOR信號通路
特異性阻斷法 mTOR抑制劑作用法 樣本比較法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 通過特異性阻斷PI3K和mTOR，觀察HepG2和Hep3B細胞株PI3K/
PI3K/Akt/mTOR信號通路
實驗方法原理 通過特異性阻斷PI3K和mTOR，觀察HepG2和Hep3B細胞株PI3K/Akt/mTOR信號通路活性及生物學行為的改變，探討相關的分子機制。實驗材料 HepG2人肝癌細胞Hep3B人肝癌細胞株人正常肝細胞株QSG-7701試劑、試劑盒 LY294002Rapamycin阿霉素儀器、
PI3K/Akt/mTOR信號通路
特異性阻斷法 mTOR抑制劑作用法 樣本比較法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 通過特異性阻斷PI3K和mTOR，觀察HepG2和Hep3B細胞株PI3K/
PI3K/Akt/mTOR信號通路_mTOR抑制劑作用法
實驗方法原理觀察阿霉素（Doxorubicin，DOX）單用或與RAPA聯合用藥對HepG2和Hep3B細胞生物學行為及PI3K/Akt/mTOR信號通路活性的影響，探討mTOR抑制劑增強HCC化療藥物療效的相關作用機制。實驗材料HepG2細胞Hep3B細胞試劑、試劑盒阿霉素RAPA儀器、耗材培養箱
PI3K/Akt/mTOR信號通路_特異性阻斷法
PI3K/Akt/mTOR信號通路可以：（1）誘導缺氧誘導因子1的表達和活性；（2）作為細胞內非常重要的信號轉導途徑；（3）在細胞的生長、存活、增殖、凋亡、血管生成、自吞噬等過程中發揮著極其重要的生物學功能。實驗方法原理通過特異性阻斷PI3K和mTOR，觀察HepG2和Hep3B細胞株PI3K/Ak
LncRNA發生m5C異常修飾或成肝癌診斷新靶點的應用
前言：近年來，異常RNA修飾與腫瘤發生的關系引起了廣泛關注。作為一種廣泛存在的修飾，DNA和RNA中的5-甲基胞嘧啶(m5C)已被發現數十年。DNA m5C修飾在腫瘤發生中的作用已被廣泛研究。然而，關于RNA m5C修飾在腫瘤發生中的作用知之甚少。NSUN2是哺乳動物中主要的m5C修飾甲基轉
一般6孔板的一個孔鋪滿HepG2細胞后的細胞量大概有多少
看濃度有多少，一般30-300個進行計數。HepG2細胞分泌多種血漿蛋白：清蛋白、α2-巨球蛋白、血纖維蛋白溶酶原、鐵傳遞蛋白等。注釋：該細胞表達3-羥基-3-甲基戊二酸輔酶A還原酶和肝甘油三酸脂脂肪酶。該細胞在有百草枯(英文名：gramoxone)的環境下過氧化氫酶mRNA表達增加，ApoA-I
河南大學王超杰團隊的文章被撤回－原因是……
2010年9月17日，河南大學王超杰團隊（王建紅為第一作者）在Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters（IF=2.82）在線發表題為“Synthesis and bioevaluation of aryl-guanidino polyamine conju
使用lncRNAi方法通過靶向多個OncomiRs來實現HCC的腫...（一）
使用lncRNAi方法通過靶向多個OncomiRs來實現HCC的腫瘤精準治療一箭N雕，lncRNAi實現腫瘤精準治療由于引起腫瘤的發生是一個復雜的網絡，因此，是否可以通過一次靶向多個OncomiR進行腫瘤治療呢？今天，小編通過一篇發表在《Molecular Cancer Therapeuti
lncRNAi方法通過靶向多個OncomiRs來實現HCC的腫瘤精準治療
一箭N雕，lncRNAi實現腫瘤精準治療 由于引起腫瘤的發生是一個復雜的網絡，因此，是否可以通過一次靶向多個OncomiR進行腫瘤治療呢？今天，小編通過一篇發表在《Molecular Cancer Therapeutics》上的研究，來看看科學家們怎么使用lncRNAi的方法，通過靶向多個
葛根營養及功能挖掘研究獲新進展
近日，國家中藥材產業技術體系崗位科學家、華南農業大學食品學院教授杜冰團隊從葛根蛋白中分離出新型抗氧化多肽YLWVGA，并揭示了其通過調控Keap1/Nrf2信號通路緩解HepG2細胞氧化損傷的分子機制。相關成果發表于《食品化學》（Food Chemistry）。氧化應激是由活性氧過剩和抗氧化防御減弱
匹伐他汀鈣片的藥理介紹
匹伐他汀鈣通過拮抗膽固醇生合成途徑中的限速酶—HMG-CoA還原酶，從而阻礙肝臟的膽固醇生合成。促進肝臟中低密度脂蛋白（LDL）受體的表達和LDL由血液進入肝臟，因此降低總膽固醇。此外，持續抑制肝臟內膽固醇的生物合成，減少向血液中分泌極低密度脂蛋白（VLDL），降低血漿中的甘油三酯。 1、抑制
細胞－SELEX(CellSELEX)技術篩選適配體的方法介紹
該方法的主要靶標物質是細胞、細菌或病毒等，操作過程中采用離心、沉淀的方法分離去除未結合適配體，再通過熱解離或酶切作用獲得特異性適配體序列。Liang 等針對感染狂犬病毒的活細胞，應用 Cell-SELEX 經過35 輪重復篩選獲得了 5 條 DNA 適配體。病毒效價測定與實時定量反轉錄 PCR
使用lncRNAi方法通過靶向多個OncomiRs來實現HCC的腫...（二）
3、lncRNAi影響HCC細胞的增殖和遷移能力lncRNAi在細胞中能起作用，那么會影響哪些細胞的生物學功能呢？結果顯示，AdSVPE1a-lncR有非常顯著的Hep3B和Huh-7細胞殺傷能力。在Hep3B細胞中加入MOI=0.5 pfu/cell ，細胞存活不到50%，加入MOI=2
桑葉多酚多糖協同調節脂質穩態分子研究獲進展
近日，廣東省農業科學院蠶業與農產品加工研究所蠶桑南藥與微生物資源加工利用研究團隊在桑葉多酚-多糖協同調節脂質穩態分子機制研究方面取得新進展。相關成果分別在線發表于《食品生物科學》和《LWT：食品科學與技術》。 該研究體外模擬消化和結腸發酵發現，桑葉多酚-多糖可促進短鏈脂肪酸生成，調節脂質代謝優
《Scientific－Reports》報告HCC轉移新機制
原發性肝細胞癌（HCC）肝內外轉移是導致臨床手術后病人預后較差的重要原因之一。由于目前臨床上尚缺乏有效的靶向治療肝癌的化療藥物，尋找治療HCC轉移的有效靶點一直是科學家關注的重點。來自東方肝膽外科醫院周偉平教授，第二軍醫大學微生物教研室任浩教授，上海同仁醫院馬俐君教授的研究團隊通過臨床樣本，細胞
全基因組表達譜芯片應用于TMED3調控原發性肝細胞癌...
全基因組表達譜芯片應用于TMED3調控原發性肝細胞癌（HCC）的轉移機制研究原發性肝細胞癌（HCC）肝內外轉移是導致臨床手術后病人預后較差的重要原因之一。由于目前臨床上尚缺乏有效的靶向治療肝癌的化療藥物，尋找治療HCC轉移的有效靶點一直是科學家關注的重點。來自東方肝膽外科醫院周偉平教授，第二軍醫大學
譜芯片應用于TMED3調控原發性肝細胞癌HCC的轉移機制研究
原發性肝細胞癌（HCC）肝內外轉移是導致臨床手術后病人預后較差的重要原因之一。由于目前臨床上尚缺乏有效的靶向治療肝癌的化療藥物，尋找治療HCC轉移的有效靶點一直是科學家關注的重點。來自東方肝膽外科醫院周偉平教授，第二軍醫大學微生物教研室任浩教授，上海同仁醫院馬俐君教授的研究團隊通過臨床樣本，細胞