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  • 酶聯免疫吸附測定的方法類型和操作步驟

    ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。該法適于測定細胞培養上清、血清、血漿及組織液中的樣本,干擾小可以測到每毫升納克水平的細胞因子(或受體)的水平。在這種測定方法中有3種必要的試劑:①固相的抗原或抗體,②酶標記的抗原或抗體,③酶作用的底物。根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。 雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法,操作步驟如下:(1)將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體:洗滌除去未結合的抗體及雜質。(2)用脫脂奶粉或BSA進行封閉。洗滌除去多余的脫脂奶粉或BSA。(3)加受檢標本:使之與固相抗體接觸反應一段時間,讓標本中的抗原與固相載體上的抗體結合,形成固相抗原復合物。洗滌除去其他未結合的物質。(4)加酶標抗體:使固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。徹底洗滌未結合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢物質的量正相關。(5)加底物:夾心式復合物中的酶催化底物成為有色產物......閱讀全文

    酶聯免疫吸附測定的方法類型和操作步驟

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