冷凍電鏡樣本制備新技術在新冠病毒結構解析的應用1
前言近日，由新型冠狀病毒引起的肺炎疾病在武漢和全國各地都形成了一定規模的爆發，已經引起了中國甚至全球的高度重視，那么這個冠狀病毒究竟是什么？冠狀病毒在系統分類上屬冠狀病毒科(Coronaviridae)，是具外套膜(envelope) 的正鏈單股RNA病毒，直徑約80～120nm。冠狀病毒可以引起中東呼吸綜合征、嚴重急性呼吸綜合征以及目前正在爆發的新型肺炎。近日，國家病原微生物資源庫發布了由中國疾控制中心病毒預防控制所成功分離的我國第一株病毒的電鏡照片。 下圖中（電子顯微鏡下的新型冠狀病毒武漢株01），黑色箭頭所示就是新型冠狀病毒，可以看出，病毒的大小約為100納米。 解析冠狀病毒結構，助力疫苗和藥物研發目前，我們已知新型冠狀病毒是RNA病毒，它的蛋白結構序列還沒有確定出來，在分離完毒株之后，則要用冷凍電鏡來全面解析病毒的三維結構，從而為開發疫苗和相關的藥物奠定基礎。2019年，中國科學家利用冷凍電鏡技術......閱讀全文
冷凍電鏡樣本制備新技術在新冠病毒結構解析的應用1
前言近日，由新型冠狀病毒引起的肺炎疾病在武漢和全國各地都形成了一定規模的爆發，已經引起了中國甚至全球的高度重視，那么這個冠狀病毒究竟是什么？冠狀病毒在系統分類上屬冠狀病毒科(Coronaviridae)，是具外套膜(envelope) 的正鏈單股RNA病毒，直徑約80～120nm。冠狀病毒可以引
冷凍電鏡樣本制備新技術在新冠病毒結構解析的應用2
現有冷凍電鏡樣本制備技術的缺陷然而，傳統冷凍電鏡樣本制備方法存在缺陷：1. 以手工或半自動設備，操作復雜，依賴較高的技巧??2. 采用blot方式，大量樣品被浪費在濾紙?3. 實驗的穩定性和可重復性較差?4. 樣品存放的可追溯性差，容易導致樣品丟失??? ? ? 總體而言，冷凍電鏡的樣品制備技術
mosquito在解析新冠病毒復合物結構的應用
? ? ?? 2020年2月18日，清華大學生命學院王新泉課題組和醫學院張林琦課題組緊密合作，利用X射線衍射技術，解析了新型冠狀病毒（2019-nCoV）表面刺突糖蛋白受體結合區（receptor-binding domain, RBD）與人受體ACE2蛋白復合物的晶體結構，準確定位出新冠病
讓病毒無所遁形徠卡電鏡解決方案在新冠肺炎病毒鑒...1
讓病毒無所遁形-徠卡電鏡解決方案在新冠肺炎病毒鑒定的應用徠卡顯微系統應用專家 肖麗國?2020年，似乎來得更艱難一點。從去年12月份開始，新冠肺炎疫情（COVID-19）就像龍卷風一樣席卷全球，當前已在217個國家地區蔓延，全球確診超2402萬例，死亡破82萬例。新冠肺炎疫情構成大流行的威脅“已經變
冷凍電鏡三維重構解析揭示絲狀病毒IKe結構
清華大學醫學院向燁研究組與以色列特拉維夫大學Amir Goldbourt組合作于2019年2月28日在《美國科學院院報》（Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America， PNAS）雜
清華聯合團隊曝光“新冠病毒”3D高清結構照
對人類來說，新冠病毒是個“既熟悉又陌生”的存在。它和嚴重急性呼吸綜合征（SARS）冠狀病毒、中東呼吸綜合征（MERS）冠狀病毒同屬冠狀病毒大家庭，是過去18年里第三種導致人類大規模感染的冠狀病毒。然而，冠狀病毒到底長什么樣，一直是個未解之謎。 1月21日，由清華大學生命科學學院李賽實驗室和奧地
病毒透射電鏡病毒標本制備實驗1
懸滴標本法實驗方法原理病毒等微小顆粒標本可取其培養物經稀釋或分離提純后直接滴于附有支持膜的載網上用電鏡觀察。實驗材料病毒試劑、試劑盒稀釋液儀器、耗材透射電鏡實驗步驟懸液應盡量除去雜質如培養基殘渣，細胞碎片、糖類及各種鹽類的結晶等，這些雜質的存在會干擾染色及電鏡觀察。用該法的缺點是由于電子穿透能力很弱
我國學者使用高分辨冷凍電鏡首次解析人類皰疹病毒結構
從中國科學技術大學獲悉，該校生命科學學院畢國強教授課題組與同行合作，利用高分辨冷凍電鏡單顆粒分析技術首次解析了人類皰疹病毒6B型的近原子分辨率結構。相關研究成果日前在線發表在國際著名期刊《自然·通訊》上。 人類皰疹病毒6型（HHV-6）屬于皰疹病毒家族β皰疹病毒亞家族，根據其表面抗原不同，又被
美國研究所基于冷凍電鏡揭示新冠病毒的恐怖親和力
美國國家過敏和傳染病研究所疫苗研究中心最近提交的一篇論文對新冠病毒結構進行了研究，并驗證了一個結論：新冠病毒 S 蛋白與細胞 ACE2 的親和力是 SARS 的 10 到 20 倍。 這可能意味著新冠病毒肺炎（COVID-19）的傳染性相比 SARS 要高出很多。 這篇最新論文目前被發布在
冷凍電鏡新突破！袁曙光團隊解析膜蛋白靶標三維結構
近日，中國科學院深圳先進技術研究院醫藥所計算機輔助藥物設計中心袁曙光課題組與德國馬普生物物理所合作，利用真實細胞膜冷凍電鏡技術，解析了血清素受體5-HT3離子通道的高分率三維精細結構，并通過生物計算系統闡述了其信號轉導的分子原理。相關成果發表于《自然—通訊》。袁曙光和Mikhail Kudrya
利用冷凍電鏡成功解析神經突觸超微結構
記者從中國科大獲悉，該校合肥微尺度物質科學國家研究中心與生命科學學院畢國強、劉北明與周正洪教授合作課題組的研究成果——利用冷凍電子斷層三維重構技術（cryoET）與冷凍光電關聯顯微成像技術解析神經突觸超微結構。圖片來源網絡 2月7日，美國神經科學學會會刊《神經科學雜志》以封面形式報道了這一成果
新冠病毒混合樣本核酸檢測的爭議與出路
?截至5月22日，SARS-COV-2導致的COVID-19在全球范圍內已經確診超過501萬人，SARS-COV-2核酸檢測目前依舊是進行COVID-19診斷的金標準，同樣也是無癥狀感染人群的必要篩查手段。?4月30日，國家提出了強化新冠病毒核酸檢測的要求，要求各地應當加強醫療機構實驗室建設，對所有
冷凍電鏡解析朊病毒蛋白病理聚集多態性
中國科學院上海有機化學研究所生物與化學交叉中心劉聰課題組與武漢大學梁毅課題組合作在Science Advances上在線發表題為Genetic prion disease–related mutation E196K displays a novel amyloid fibril structu
西湖大學：找到了新冠病毒細胞入侵細胞的“門把手”
近日，西湖大學周強實驗室利用冷凍電鏡技術成功解析此次新冠病毒的受體——ACE2的全長結構。這是世界上首次解析出ACE2的全長結構。相關研究內容于北京時間2月19日凌晨3點左右在預印版平臺bioRxiv上線。這也是西湖大學承擔的浙江省新型冠狀病毒肺炎防治應急科研攻關任務的重要成果。周強 新型冠狀
讓病毒無所遁形徠卡電鏡解決方案在新冠肺炎病毒鑒...2
同時還發現S1和S2邊界處存在四個氨基酸殘基插入，從而引入了新的蛋白酶切位點。這就可能會增強病毒的可傳播性，更加科學地解釋了新冠病毒傳染力強的問題。2月19日，西湖大學周強教授團隊獲得了ACE2的全長三維結構，同時解析了S蛋白RBD和ACE2的復合物三維結構，看清楚了它們的相互作用方式，這一步正式揭
冷凍電鏡解析了哪種蛋白的三維結構
近日，中國科學技術大學微尺度物質科學國家研究中心和生命科學與醫學部教授陳宇星和周叢照課題組與孫林峰課題組合作，利用冷凍電鏡技術首次解析了人類溶酶體維生素B12外排蛋白ABCD4的近原子分辨率三維結構，為深入理解該類膜蛋白轉運的分子機制以及其突變引發疾病的致病機理提供了基礎。該研究成果以Cryo-
掃描電鏡透射電鏡樣本制備步驟
射電鏡制備注意事項(細胞)1、細胞數量: > 1*10的6次方;2、消化細胞時要注意不要過度，及時用含血清的培養液終止消化;3、終止消化后，預冷的PBS (pH 7.4 )洗細胞1-2次離心(1500rpm, 5min)棄上清(細胞收集在1.5ml的EP管中) ;4、加入1mL 2.5%戊二醛溶液(
中國學者解析人類皰疹病毒近原子分辨率冷凍電鏡結構
人類皰疹病毒6型（HHV-6）屬于皰疹病毒家族β皰疹病毒亞家族，根據其表面抗原不同，又被分為HHV-6A和HHV-6B兩類密切相關的病毒類型。很多幼兒都會被HHV-6病毒感染，并可能產生發燒、腹瀉、紅疹等臨床癥狀；HHV-6病毒能夠在人體中終身潛伏，并在免疫力低下的人群中引發嚴重疾病，它在腦組織
推動電鏡技術新發展－看2020北京電鏡年會
分析測試百科網訊 2020年12月19日，由北京理化分析測試技術學會電鏡專業委員會主辦的2020年度北京市電子顯微學年會隆重舉行。本次會議旨在推動北京及周邊省市廣大電子顯微學的學術及技術水平，促進電子顯微學工作者在材料科學、生命科學等領域的應用、發展和交流。本次會議共有近200人出席、參與。分析
“CT檢查”揭露真容－走近新冠病毒“攝影師”
在看清新冠病毒納米級細微生物結構的瞬間，中國清華大學生命科學學院研究員李賽無比興奮。他23日對記者說：“那種感覺如同爬上珠穆朗瑪峰俯瞰世界一樣。” 第一次，包括中國科研人員在內的國際團隊“拍攝”到了新冠病毒的3D影像。在納米尺度的圖像上，平均直徑不到100納米的新冠病毒像一顆奇異星球，表面分布
首屆冷凍電鏡與藥物發現創新峰會
2020年是特別的一年，新冠疫情籠罩全球，各國醫藥研發同仁眾志成城，共抗疫情，同時各方同道積極通過線上方式展開學術活動，推進相關領域學術發展。首屆冷凍電鏡與藥物發現創新峰會（1st GCDD Summit）將于8月15日13：00-17：00以網絡直播的形式召開。本屆大會將秉承學術性、國際性的原則，
研究解析新冠病毒RNA聚合酶三維精細結構
由饒子和院士/婁智勇教授/王權教授等組成的“上海科技大學-清華大學抗新冠病毒聯合攻關團隊”率先在國際上成功解析了新型冠狀病毒轉錄復制機器核心單元“RdRp-nsp7-nsp8”復合體的三維空間結構，整體分辨率達到2.9 埃（?）。 該研究揭示了該病毒遺傳物質轉錄復制機器核心“引擎”的結構特征，
1月29日疫情通報：變異新冠病毒在巴西擴散
1月28日0—24時，31個省（自治區、直轄市）和新疆生產建設兵團報告新增確診病例52例，其中境外輸入病例16例（上海9例，廣東5例，天津1例，湖南1例），本土病例36例（黑龍江21例，吉林13例，北京1例，河北1例）；無新增死亡病例；新增疑似病例2例，其中境外輸入病例1例（在上海），本土病例1
Nature：基于冷凍電鏡的新技術MicroED確定微小晶體結構
α-突觸核蛋白（α-synuclein）是路易小體（Lewy body）的主要成分，與帕金森病和其他神經退行性病變密切相關。日前，科學家們使用尖端技術MicroED（micro-electron diffraction）解析了α-突觸核蛋白的毒性核心，獲得了分辨率超高的晶體結構。程亦凡博士在九月
冷凍電鏡在結構生物學中的戰績
冷凍電鏡在結構生物學中的戰績從NSC等頂刊的發文情況及源源不斷的生物大分子結構被解析出來，冷凍電鏡在結構生物學領域取得的巨大成功無需贅述。單單以中國大陸為例，基于冷凍電鏡技術在結構生物學領域取得的重大進展就十分可觀，具體如表1所示[5]（2016年）。而隨著冷凍電鏡技術的大熱，國內的許多高校、科研院
微滴芯片數字PCR技術在檢測新冠病毒的應用
國家衛健委發布了《新型冠狀病毒肺炎防控方案（第五版）》，其中在實驗室檢測技術指南中明確提出，核酸檢測結果陰性不能排除新型冠狀病毒感染。3月4日，國家衛健委發布的《新型冠狀病毒肺炎診療方案（試行第七版）》 中提到了以下兩點：對疑似病例要盡可能采取包括快速抗原檢測和多重PCR核酸檢測等方法對呼吸道病
重磅！冠狀病毒首個刺突糖蛋白解析成功
冠狀病毒的刺突糖蛋白（Spike glycoprotein, S glycoprotein）是Ⅰ型跨膜糖蛋白，也是病毒最大的結構蛋白，其包含了病毒的主要抗原決定簇，能夠刺激機體產生中和抗體和介導免疫反應，通常包括由球狀的受體結合亞基S1和棒狀的融合亞基S2兩部分。同時，S蛋白的S1亞基決定了受體
高分辨率冷凍電鏡成功解析人類皰疹病毒6B型結構
近日，中國科學技術大學合肥微尺度物質科學國家研究中心、生命科學學院教授畢國強課題組、美國加州大學洛杉磯分校教授周正洪課題組與華東師范大學研究員梅曄合作，利用高分辨冷凍電鏡單顆粒分析技術首次解析了人類皰疹病毒6B型的近原子分辨率結構。相關研究成果以Atomic structure of the h
冷凍電鏡發威！解析人類皰疹病毒6B型近原子分辨率結構
記者從中國科學技術大學獲悉，該校生命科學學院畢國強教授課題組與同行合作，利用高分辨冷凍電鏡單顆粒分析技術首次解析了人類皰疹病毒6B型的近原子分辨率結構。相關研究成果日前在線發表在國際著名期刊《自然·通訊》上。 人類皰疹病毒6型（HHV-6）屬于皰疹病毒家族β皰疹病毒亞家族，根據其表面抗原不同，
我國冷凍電鏡再發Nature－三維結構解析免疫機制
10月2日，《自然》雜志在線發表了我國科學家的一項關于免疫系統如何發揮作用的重要成果。通過海量的實驗與計算，來自中國科學院物理所、中國醫學科學院等單位的研究人員，成功解析與原核短Ago系統相關的高分辨率三維蛋白結構，同時徹底弄清楚了原核短Ago系統在病毒入侵前后所發生的結構變化。原核短Ago中輔酶I