qPCR常見問題解答
通常來講，real-time qPCR 的反應程序不需要像常規的 PCR 那樣，要變性、退火、延伸 3 步。由于其產物長度在 80～150 bp 之間，所以只需要變性和退火就可以了。 SYBR@Green 等染料法，最好在 PCR 擴增程序結束后，加一個溶解程序，來形成溶解曲線，判斷 PCR 產物的特異性擴增。而溶解程序，儀器都有默認設置，或稍有不同，但都是一個在產物進行溶解時候，進行熒光信號的收集。 精品PCR，國產PCR，就選朗基，熱線：13066324063 今天給大家匯總一下 qPCR 常見問題。 1、無 Ct 值出現 檢測熒光信號的步驟有誤：一般 SG 法采用 72℃ 延伸時采集，Taqman 法則一般在退火結束時或延伸結束采集信號。 引物或探針降解：可通過 PAGE 電泳檢測其完整性。 模板量不足：對未知濃度的樣品應從系列稀釋樣本的最高濃度做起。 模板降解：避免樣品......閱讀全文
qPCR－常見問題解答
通常來講，real-time qPCR 的反應程序不需要像常規的 PCR 那樣，要變性、退火、延伸 3 步。由于其產物長度在 80～150 bp 之間，所以只需要變性和退火就可以了。 SYBR@Green 等染料法，最好在 PCR 擴增程序結束后，加一個溶解程序，來形成溶解曲線，判斷 PC
QPCR常見問題及其分析
一般來講，進行real-time qPCR?MasterMix都是2×的濃縮液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR靈敏度高，所以每個樣品至少要做3個平行孔，以防在后面的數據分析中，由于Ct相差較多或者SD太大，無法進行統計分析。通常來講，反應體系的引物終濃度為100-400
QPCR常見問題及其分析
一般來講，進行real-time qPCR MasterMix都是2×的濃縮液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR靈敏度高，所以每個樣品至少要做3個平行孔，以防在后面的數據分析中，由于Ct相差較多或者SD太大，無法進行統計分析。通常來講，反應體系的引物終濃度為10
QPCR常見問題及其分析
一般來講，進行real-time qPCR MasterMix都是2×的濃縮液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR靈敏度高，所以每個樣品至少要做3個平行孔，以防在后面的數據分析中，由于Ct相差較多或者SD太大，無法進行統計分析。通常來講，反應體系的引物終濃度為100-400
QPCR常見問題及其分析
一般來講，進行real-time qPCR MasterMix都是2×的濃縮液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR靈敏度高，所以每個樣品至少要做3個平行孔，以防在后面的數據分析中，由于Ct相差較多或者SD太大，無法進行統計分析。通常來講，反應體系的引物終濃
qPCR常見異常曲線實戰分析－（二）
圖九：試劑蒸發引起擴增曲線抬升4確定實驗過程中的操作細節如果以上都正常，還要確定下實驗過程中的操作細節。比如在做標準曲線的時候是否是梯度稀釋的標準品，如果不是梯度稀釋標準品，可能會引起標準曲線擴增效率或者R2值異常；從冰箱冷凍中取出的試劑是否有混勻，如果試劑融化后沒有混勻，這時候取出的試劑不是均一的
qPCR常見異常曲線實戰分析－（一）
1確認軟件設置是否正確對照試劑盒說明書，檢查時間、溫度、循環數、熒光采集等是否設置正確。有一個比較容易忽略的設置問題是，需要看下所選用的試劑中是否含有ROX來作為參比熒光染料。2確定耗材及配件是否使用正確? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ??耗材對于熒光定量PCR來說比較重要，很多
氣質常見問題解答
包括常見的氣質問題和MSD質譜通訊中斷問題 氣質常見問題解答
抗體常見問題解答
常見問題： 如何選擇合適的一抗？ 如何選擇合適的二抗？ 如何選擇合適的同型對照？ 如何選擇陽性對照？ 如何確定一抗的稀釋比例？ 如何選擇合適的抗原修復方式？ 為何WB檢測條帶大小與預期有差別？ 抗體能夠用于其他種屬/實驗方法？
抗體常見問題解答
Q&A 常見問題： 如何選擇合適的一抗？ 如何選擇合適的二抗？ 如何選擇合適的同型對照？ 如何選擇陽性對照？ 如何確定一抗的稀釋比例？ 如何選擇合適的抗原修復方式？ 為何WB檢測條帶大小與預期有差別？ 抗體能夠用于其他種屬/實驗
細胞常見問題解答
1.原代細胞與細胞系有什么區別？ 細胞培養物來源于原代外植體或分散的細胞懸液。通常在這樣的培養物中細胞增殖形成匯合地單層細胞或密集地細胞懸液。根據傳統定義，第一次收獲和接種的細胞被稱為原代細胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells.
同科生物qPCR常見問題及分析
通常來講，real-time qPCR的反應程序不需要像常規的PCR那樣，要變性、退火、延伸3步。由于其產物長度在80～150 bp之間，所以只需要變性和退火就可以了。SYBR@Green等染料法，zui好在PCR擴增程序結束后，加一個溶解程序，來形成溶解曲線，判斷PCR產物的特異性擴增。而溶解程序
同科生物qPCR常見問題及分析
通常來講，real-time qPCR的反應程序不需要像常規的PCR那樣，要變性、退火、延伸3步。由于其產物長度在80～150 bp之間，所以只需要變性和退火就可以了。 SYBR@Green等染料法，zui好在PCR擴增程序結束后，加一個溶解程序，來形成溶解曲線，判斷PCR產物
涂層測厚儀常見問題解答
? 涂層測厚儀常見問題解答問：涂層測厚儀開機異常、報警是怎么回事？答：涂層測厚儀在使用過程中，有時會出現開機報警的現象，一般有以下幾種原因：1、 沒有插探頭就開機，開機后出現儀器故障報警，這是正常報警，必須關機插好探頭再開機。 2、 插好探頭開機后出現要求故障報警，首先關機重新插探頭檢查是否探頭
消解儀常見問題解答
1、什么是紅外加熱？答：通過紅外管的輻射對介質進行加熱，其優點是升溫速率快，使用壽命長，是目前市場上主流的加熱方式。2、石墨消解儀和微波消解儀的區別？答：微波消解是高壓高溫條件密閉下進行的樣品消化，優點是升溫速度快、消化時間短。石墨消解儀是在高溫條件下進行樣品的消化，優點是處理樣品量大、控溫范圍更為
UF－應用常見問題解答
問：UF如果報告RBC陽性是否要用顯微鏡確認？如果RBC全部溶解，UF-100會怎樣報告RBC？?答：UF作為尿有形成分檢查的篩選工具，主要特征是快速定量、準確提供許多臨床有用的信息。如果僅僅RBC陽性，略超出陰性設定值Negative limits，而無其他項目異常，RBC-info屬正常紅細胞，
COD測定常見問題解答
? 化學需氧量COD（ChemicalOxygenDemand）是以化學方法測量水樣中需要被氧化的還原性物質的量。廢水、廢水處理廠出水和受污染的水中，能被強氧化劑氧化的物質（一般為有機物）的氧當量。在河流污染和工業廢水性質的研究以及廢水處理廠的運行管理中，它是一個重要的而且能較快測定的有機物污染參
IKA移液器常見問題解答
為了方便廣大用戶了解德國IKA艾卡移液器，萊貝作為IKA艾卡的代理商為大家整理了一些有關IKA艾卡移液器的常見問題及解答。1、所以的IKA艾卡移液器都是經過獨立校準的嗎？每一只IKA艾卡移液器在出廠前都經過嚴格校準，且隨機提供品質合格保證書（QC）以及符合ISO 8655要求的校準報告。2、我可以自
WiMAX技術常見問題解答
什么是 WiMAX技術？ WiMAX 是一種基于標準的技術，可以替代現有的有線和DSL 連接方式，來提供最后一英里的無線寬帶接入。WiMAX 將提供固定、移動、便攜形式的無線寬帶連接，并最終能夠在不需要直接視距基站的情況下提供移動無線寬帶連接。在典型的3 到10英里半徑單元部署中，獲得
消解儀常見問題解答
1、什么是紅外加熱？答：通過紅外管的輻射對介質進行加熱，其優點是升溫速率快，使用壽命長，是目前市場上主流的加熱方式。2、石墨消解儀和微波消解儀的區別？答：微波消解是高壓高溫條件密閉下進行的樣品消化，優點是升溫速度快、消化時間短。石墨消解儀是在高溫條件下進行樣品的消化，優點是處理樣品量大、控溫范圍更為
sysmex設備常見問題解答
問：標本的采集部位不同結果有哪些差異? 答：按采血部位的不同，取得血常規檢驗標本，最常用的途徑是靜脈采血和末梢毛細血管采血。各類文獻均表明，靜脈血血樣是最可靠的標本，手指血是末梢毛細血管血樣中與靜脈血差異最小且較為穩定的血樣。有研究表明，與靜脈血相比，手指血的準確性和可重復性仍然較差：白細胞計數明顯
UF－應用常見問題解答
問：UF如果報告RBC陽性是否要用顯微鏡確認？如果RBC全部溶解，UF-100會怎樣報告RBC？?答：UF作為尿有形成分檢查的篩選工具，主要特征是快速定量、準確提供許多臨床有用的信息。如果僅僅RBC陽性，略超出陰性設定值Negative limits，而無其他項目異常，RBC-info屬正常
PCR－Array－常見問題解答
PCR Array FAQ:任何一臺能夠做QPCR的儀器據能夠做PCRarray嗎？QPCR 儀器都可以進行QPCR array的實驗。根據儀器采用的96孔或者384孔板，分為以下5種板型（plate format）：plate formatInstrument providerQPCR instr
實驗常見問題解答匯集
BSP甲基化擴增得到的PCR產物可否直接測序，為什么需要構建TA克隆后測序？由于基因組DNA的每個CG位點甲基化程度各不相同，未發生甲基化的C會被重亞硫酸鹽修飾成為U，而C若發生甲基化則不變，這樣如果進行PCR產物測序就有可能在原有的C位點得到雙峰圖，無法確定甲基化的程度，必需通過回收PCR產物，進
常見問題解答：pH/ORP
流速會對pH測量有什么影響？樣品的pH值是不受流速影響的，但是pH的測量值會受影響。在大多數的應用中（非高純水），流速對pH的測量有很小的影響。在樣品以0-2 m/sec的流速通過電極表面時，會對參比電極的隔膜有一個很小的影響，pH測量值會有± 0.1的偏差。壓力也會有一定的影響，由于直接作用參比的
薄層色譜：常見問題解答
薄層色譜（TLC）作為一種快速、經濟的分析技術，在化學、生物學和醫藥等領域中被廣泛使用。盡管TLC操作簡單，但在實際操作過程中，用戶可能會遇到一些問題。本文將針對一些常見的問題進行解答，幫助用戶更好地理解和應用TLC技術。 常見問題 1. 如何選擇合適的固定相？ 解答： 固定相的選擇取決于
常見問題解答：pH/ORP
多久應該校準一次pH電極? pH的校準間隔取決于各自的工藝。工藝條件越穩定（溫度、壓力、組分、無污垢等），pH的測量就越穩定而且校準間隔就越長。大多數的pH電極在每周或每月之間校正一次，根據經驗更長或更短的校準間隔也是可能的。在保證準確度的前提下，最好剛開始校準頻繁一些，然后慢慢延長校準間隔。
COD測定常見問題解答
化學需氧量COD（ChemicalOxygenDemand）是以化學方法測量水樣中需要被氧化的還原性物質的量。廢水、廢水處理廠出水和受污染的水中，能被強氧化劑氧化的物質（一般為有機物）的氧當量。在河流污染和工業廢水性質的研究以及廢水處理廠的運行管理中，它是一個重要的而且能較快測定的有機物污染參數，常
常見問題解答——pH計
測量問題: 同一樣品，兩次測量的pH值不一樣？溫度變化或樣品本身發生了化學反應，都會引起pH值的變化。所以，應盡量保持溫度一致，并且避免化學反應。測量問題: 同一樣品，同時在兩臺pH計上測量，讀數不一致?？由于兩臺pH計的校正條件不一樣（如不同時間做的校正），造成測量值有差異。所以要用同一緩沖液在同
qPCR常見問題及其分析解決方法
常見問題 1. 無Ct值出現 檢測熒光信號的步驟有誤: 一般SG法采用72℃延伸時采集，Taqman法則一般在退火結束時或延伸結束采集信號。 引物或探針降解: 可通過PAGE電泳檢測其完整性。 模板量不足: 對未知濃度的樣品應從系列稀釋樣本的最高濃度做起。 模板降解: 避免樣品制備中雜