Hanks液(原液)的配制
Hanks液(原液)原液甲: NaCl 160gKCl 8gMgSO4·7H2O &n......閱讀全文
Hanks液、TBS與PBS
Hanks液的配制方法甲液:Na2HPO4?2H2O 0.06克 KH2PO4 0.06克 MgSO4?7H2O 0.20克葡萄糖 1.00克 NaCl 8.00克三蒸水 750毫升乙液:CaCl2 0.14克三蒸水 100毫升①將乙液徐徐加入甲液中。②將0.35克NaHCO3溶解在37℃ 100毫
Hanks液(原液)的配制
原液甲: NaCl 160g KCl 8g MgSO4·7H2O 2g MgCl2·6H2O 2g 上述試劑加入800ml雙蒸水。溶解。 CaCl2 2.8g溶于100ml雙蒸水 上述二液混合,加雙蒸水至1000ml,再加2ml氯仿防腐,4
Hanks液(原液)的配制
Hanks液(原液)原液甲: NaCl?????????????????????? 160gKCl??????????????????????????? 8gMgSO4·7H2O??????????????????????? 2gMgCl2·6H2O??????????????????????? 2
PBS緩沖液和Hanks緩沖液的區別
萬能緩沖液PBS我實驗時經常用到PBS緩沖液,但是很多文獻里面也用到了Hanks緩沖液,不知道這兩種緩沖液在細胞培養?方面有什么區別嗎?也就是說它分別適合于哪些情況?PBS :磷酸緩沖鹽溶液——具有pH緩沖作用的等滲鹽溶液。PBS溶液又稱磷酸鹽緩沖溶液,一般選擇K2HPO4和KH2PO4配制,因為鈉
細胞換液為什么用DHANKS液洗
細胞換液為什么用D-HANKS液洗知不知道細胞很小的,你細胞衰老后會被水解掉留下部分營養物質于細胞外液中供新分化的利用,位置恰不恰當當然恰當,這是基因決定的,再說了細胞可在特定范圍內流動,新細胞在此范圍里就可以了.。總之,就是基因的作用,讓你細胞該在哪就在哪可能有多種原因: 目標蛋白對細胞有毒性,導
無Ca2+、Mg2+Hanks液的配制
無Ca2+、Mg2+Hanks液 NaCl 4.5g KCl 0.2g NaHCO3 0.175g Na2HPO4·12H2O 0.076g KH2PO4 0.03g 葡萄糖 0.5g 0.4%酚紅 2.5ml 將上述成分
無Ca2+-、Mg2+Hanks液的配制方法
無Ca2+ 、Mg2+Hanks液 ???????????? NaCl????????????????????????????? 4.5g????????????? KCl?????????????????????????????? 0.2g???????????? NaHCO3??????????
Hanks平衡鹽溶液(5×HBSS,含酚紅)使用說明
平衡鹽溶液(BalancedSaltSolution,BSS)與細胞生長狀態下的pH值、滲透壓等環境狀態一致,具有維持滲透壓、控制酸堿平 衡、供給細胞生存代謝所必需的能量和無機鹽成分等作用,可滿足體外實驗中細胞生存并維持一定的代謝的基本需要。主要由無機離子組成,有時含有碳酸氫鈉、葡 萄糖
E玫瑰花環形成試驗(E-Rosette-Test)
【原理】?正常人外周血中T細胞在體外能直接和綿羊紅細胞(SRBC)結合形成玫瑰花樣細胞團,這是因為人的T細胞膜具有能和SRBC膜上的糖蛋白相結合的受體,稱為E受體。已證實E受體是人T細胞所特有的表面標志,也是T細胞的常用方法之一。?【材料】?肝素抗凝人外周血1ml?淋巴細胞分層液(見附錄)2ml?0
關于脂肪干細胞的流式檢測介紹
通過酶消化法將細胞收集到離心管中,細胞懸液調整密度為1×105 mL-1,800r/min(120g),離心5 min,棄掉上清,用4℃的冷D-Hanks 沖洗重懸細胞,再次將細胞懸液以800 r/min,離心5 min,之后棄去上清。然后用D-Hanks 將細胞重懸至1 mL,加入抗體5~10
抗體產生細胞的檢測—溶血空斑實驗
實驗材料健康小鼠試劑、試劑盒綿羊紅細胞懸液Hanks液凡士林油儀器、耗材注射器平皿漏斗紗布研缽實驗步驟1. ?免疫動物取25%綿羊紅細胞懸液1毫升,無菌操作注入小鼠腹腔中。2. ?脾細胞液的制備(1)小鼠免疫4天后,頸椎脫位處死,取脾臟,去除脂肪組織,放平皿內,用冷Hanks液洗1~2次。(2)取出
抗體產生細胞的檢測:溶血空斑實驗
實驗材料 健康小鼠試劑、試劑盒 綿羊紅細胞懸液Hanks液凡士林油儀器、耗材 注射器平皿漏斗紗布研缽實驗步驟 1. ?免疫動物取25%綿羊紅細胞懸液1毫升,無菌操作注入小鼠腹腔中。2. ?脾細胞液的制備(1)小鼠免疫4天后,頸椎脫位處死,取脾臟,去除脂肪組織,放平皿內,用冷Hanks液洗1~2次。(
抗體產生細胞的檢測——溶血空斑實驗
實驗概要本實驗用溶血空斑實驗進行了抗體產生細胞的檢測。取綿羊細胞免疫的小鼠脾臟,制成脾細胞懸液,與一定量的指示細胞(綿羊細胞)和補體結合,注入自制的小室內,經37℃孵育后,單個散在的抗體形成釋放抗體,抗體與周圍的綿羊紅細胞(抗原)結合,并在補體參與下,使綿羊細胞溶解,結果在抗體形成細胞周圍形成肉眼可
抗體產生細胞的檢測——溶血空斑實驗
實驗概要本實驗用溶血空斑實驗進行了抗體產生細胞的檢測。取綿羊細胞免疫的小鼠脾臟,制成脾細胞懸液,與一定量的指示細胞(綿羊細胞)和補體結合,注入自制的小室內,經37℃孵育后,單個散在的抗體形成釋放抗體,抗體與周圍的綿羊紅細胞(抗原)結合,并在補體參與下,使綿羊細胞溶解,結果在抗體形成細胞周圍形成肉眼可
Hank′s-平衡鹽溶液(HBS)和Earle′s平衡鹽溶液(EBS)有什么本質...
Hank′s 平衡鹽溶液(HBS)和Earle′s平衡鹽溶液(EBS)有什么本質的功能差別?HBS和 EBS 的主要差別在于碳酸氫鈉的水平,在Eagle′s (2.2g/L)中比在Hanks′ (0.35g/L) 中高。碳酸氫鈉需用高水平的CO2平衡,以維持溶液的PH值。Eagle′s液在空氣水
怎樣配置胰蛋白酶消化液
1.D.Hanks液高壓滅菌之后,晾至室溫,4℃保存備用。2.稱取一定量胰蛋白酶粉末于研磨器中(夏天時研磨器應放在冰浴中),加入少量D-Hanks液研磨1 000次左右,調制成糊狀。再放入4℃預冷的適量D-Hanks液中,4℃下磁力攪拌使完全溶解。3.用NaHC03干粉將胰酶溶液的pH值調至8.0左
大鼠胰島細胞培養實驗
實驗方法原理水合氯醛腹腔麻醉,采用膠原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度離心的方法分離、純化大鼠胰島,并分離、培養胰島單細胞。實驗材料 一周齡Wistar 大鼠? 試劑、試劑盒 D-Hanks’液 胰蛋白酶 Ⅴ型膠原酶 葡萄糖 碘乙酸? 儀器、耗材 手術剪 手術鉗 眼科剪刀 眼科鑷子
Hanks-平衡鹽溶液(HBS)要在空氣中使用,不需要CO2培養箱...
Hank's 平衡鹽溶液(HBS)要在空氣中使用,不需要CO2培養箱。原因是什么?Hank's 平衡鹽溶液(HBS)和Earle's平衡鹽溶液(EBS)有什么本質的功能差別??HBS和 EBS 的主要差別在于碳酸氫鈉的水平,在Eagles (2.2g/L)中比在Hanks (
組織的分離實驗_EDTA-消化分離法
實驗方法原理EDTA是一種非酶性消化物,常用不含Ca2+和Mg2+的BSS 配成0.02%的工作液。關于EDTA的作用機制一般認為是:一些組織,尤其是上皮組織,在生存中需要Ca2+和Mg2+才能維持組織的完整性。EDTA能從這些組織生存環境中吸收這些離子,形成螯合物,能促進細胞相互分離。EDTA 作
支原體的檢測實驗_熒光染色法
實驗方法原理熒光顯微鏡檢查法,熒光染料用 Hoechst 33258,它是一種能與DNA 特異結合的熒光染料。支原體內含有DNA,能著色,是現有檢測法中最方便和最有效的一種。實驗材料細胞試劑、試劑盒Hanks醋酸甲醇蒸餾水儀器、耗材蓋片顯微鏡實驗步驟1. ?標本蓋片培養細胞匯合前從瓶中取出(如細胞已
紅細胞免疫功能的檢測方法
實驗概要人及多種動物紅細胞與白細胞一樣,也具有重要的免疫功能。其基礎是紅細胞表面具有C3b受體(C3bR)。紅細胞可通過其表面的C3bR,發揮清除免疫復合物(IC)、促進吞噬、提呈抗原及激活補體等多種作用。因此,建立的檢測紅細胞免疫功能的各種方法,也多以紅細胞表面的C3bR為基礎設計的。現已建立的方
紅細胞免疫功能的檢測方法
實驗概要人及多種動物紅細胞與白細胞一樣,也具有重要的免疫功能。其基礎是紅細胞表面具有C3b受體(C3bR)。紅細胞可通過其表面的C3bR,發揮清除免疫復合物(IC)、促進吞噬、提呈抗原及激活補體等多種作用。因此,建立的檢測紅細胞免疫功能的各種方法,也多以紅細胞表面的C3bR為基礎設計的。現已建立的方
傳代培養法/組織塊培養法/初代消化培養常規組織培養法
一、初代消化培養法 1、 準備:取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。 2、 布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。 3、處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青鏈霉素的
常規組織培養法
一、初代消化培養法1、 準備:取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。2、 布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。3、?處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青鏈霉素的混合液中30~60分
神經膠質細胞培養實驗_胰蛋白酶消化法
實驗材料大鼠試劑、試劑盒CMF-Hanks液胰蛋白酶DMEM F12儀器、耗材水浴鍋培養箱實驗步驟一、原代培養1. ?選用生后1周的新生大白鼠,用碘酒,酒精棉球消毒,斷頭取其大腦皮層組織。?2. ?解剖顯微鏡下,剝離腦膜,切除大腦髓質部分。?3. ?將大腦皮質在無Ca2+、Mg2+Hanks液(CM
大鼠胰島細胞培養實驗
大鼠胰島細胞可用于:(1)實驗室胰島細胞功能深入研究的實驗材料;(2)糖尿病新藥的細胞篩選模型。實驗方法原理水合氯醛腹腔麻醉,采用膠原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度離心的方法分離、純化大鼠胰島,并分離、培養胰島單細胞。?實驗材料一周齡Wistar 大鼠試劑、試劑盒D-Hanks’液
大鼠胰島細胞培養實驗
大鼠胰島細胞培養實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 水合氯醛腹腔麻醉,采用膠原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度離心的方法分離、純化大鼠胰島,并分離、培養胰島單
大鼠胰島細胞培養實驗
大鼠胰島細胞培養實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 水合氯醛腹腔麻醉,采用膠原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度離心的方法分離、純化大鼠胰島,并分離、培養胰島單
E玫瑰花環形成實驗
[ 實驗原理 ] 人外周血T淋巴細胞表面具有綿羊紅細胞受體,在體外一定條件下將人淋巴細胞與綿羊紅細胞兩者混合,可以形成以T細胞為中心,周圍黏附著多個綿羊紅細胞的花環,為E花環試驗(erythrocyte rosette test)。應用最廣的有總E花環試驗(Et,t為total的縮寫)和活性
正常大兔腦微血管內皮細胞的培養
實驗材料:1.?正常兔大腦皮質組織;2.?不含Ca2+和Mg2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素,pH7.2;3.?M199培養液(含20%小牛血清、肝素25U/ml、HEPES?10mmol/L、100IU/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素);D-Hanks液;