His抗體推薦—Abbkine全系列His標簽抗體
His標簽是由6個組氨酸(His-His-His-His-His-His)組成的短肽,專門設計用于重組蛋白質的吸附純化。由于分子量較小,并且較容易分離和純化,His-tag 融合標簽與其他標簽相比有很多明顯優勢, 是目前用于純化的融合標簽中使用最為廣泛的一種。His抗體可以用于檢測和His標簽融合表達蛋白的表達、細胞內定位,以及純化、定性或定量檢測His融合表達蛋白等。然而,目前商品化His-tag的單克隆抗體(mAb)種類不多, 且價格也十分昂貴。如何選擇合適的His標簽抗體?我們在選擇His抗體時,主要根據自己的需要,特別是實驗應用上的需要。其中需要考慮的因素包括了,His抗體的應用檢測類型、His抗體的克隆性及制備來源等。比如該His抗體是否能用于Western Bloting的檢測?是否可以用于免疫熒光IF實驗?我是否需要特異性更好的單克隆His標簽抗體?我是否需要考慮下是選擇小鼠來源的還是兔來源的His抗體?之......閱讀全文
His抗體推薦—Abbkine全系列His標簽抗體
His標簽是由6個組氨酸(His-His-His-His-His-His)組成的短肽,專門設計用于重組蛋白質的吸附純化。由于分子量較小,并且較容易分離和純化,His-tag 融合標簽與其他標簽相比有很多明顯優勢, 是目前用于純化的融合標簽中使用最為廣泛的一種。His抗體可以用于檢測和His標
如何選擇合適的His標簽抗體?
His標簽是由6個組氨酸(His-His-His-His-His-His)組成的短肽,專門設計用于重組蛋白質的吸附純化。由于分子量較小,并且較容易分離和純化,His-tag 融合標簽與其他標簽相比有很多明顯優勢, 是目前用于純化的融合標簽中使用最為廣泛的一種。His抗體可以用于檢測和His標
His抗體的簡介
His標簽是由6個組氨酸(His-His-His-His-His-His)組成的短肽,專門設計用于重組蛋白質的吸附純化。由于分子量較小,并且較容易分離和純化,His-tag 融合標簽與其他標簽相比有很多明顯優勢, 是目前用于純化的融合標簽中使用最為廣泛的一種。His抗體可以用于檢測和His標簽融
GAPDH抗體推薦—Abbkine高性價比GAPDH內參抗體的選擇
在Western Bloting實驗中,可能存在總蛋白濃度測定不準確,或者蛋白質樣品在電泳前上樣時產生的樣品間的操作誤差;這些誤差可以通過測定每個樣品中實際轉到膜上的內參,比如內參GAPDH的含量來進行校正。GAPDH(甘油醛-3-磷酸脫氫酶)是參與糖酵解的一種關鍵酶,由4個30-40kDa的亞基組
βActin抗體推薦—Abbkine高效價的BetaActin內參抗體
Actin即肌動蛋白,是細胞的一種重要骨架蛋白。Actin大致可分為六種,其中四種是不同肌肉組織特異性的,其余兩種廣泛分布于各種組織中,包括 β-actin和γ-non-muscle actin。β-actin作為內參是得到了公認的,這是針對大多數組織和細胞來說的,它廣泛分布于細胞漿內,表達
輕松純化His標簽胞外分泌蛋白
從真核細胞上清液中純化蛋白是一項繁瑣的工作。通常情況下胞外分泌蛋白的濃度很低,且蛋白很容易被細胞上清液中的蛋白酶降解。當然,Cube Biotech實驗室也面臨同樣的問題。然而一天,Cube Biotech的科學家想到是否我們可以把磁珠直接加入溶液,從平衡體系中分離出帶His標簽的蛋白?通過
親和偶聯--組氨酸標簽(Histag)
親和層析法(IMAC)是目前最廣泛使用的純化技術,該技術是基于蛋白表面殘基(組氨酸、半胱氨酸和一些少量的色氨酸等)與過渡金屬陽離子的相互作用而形成螯合,該過渡金屬 / 蛋白絡合物再與螯功能基團鏈接到瓊脂糖微球上,通常通過降低 pH值或添加咪唑的方式來洗脫目標蛋白。?低耐壓ABT 提供兩種螯合微球,使
HA抗體推薦—選擇合適HA標簽抗體的因素
HA標簽系統利用一個HA (流感病毒血凝素,influenza hemagglutinin epitope: YPYDVPDYA)短肽肽融合到目標蛋白。HA標簽可位于蛋白質的C端或N端,該系統已廣泛應用于多種細胞類型,相應的HA標簽抗體也被廣泛應用。HA 標簽抗體能特異識別C末端或N末端帶有HA標簽
Abbkine新上市標簽內參直標抗體染料細節及優勢
標簽抗體和內參抗體在生命科學研究中被廣泛使用,是WB, IF, IHC等實驗必不可少的關鍵試劑,但盡管如此,研究者們還是需要為他們的實驗配上一個合適二抗(HRP或者熒光基團),這不僅增加了實驗試劑的采購成本,而且增加了額外的操作步驟和時間消耗,更增加了非特異性信號的潛在可能性。Abbkine憑借
Flag標簽抗體在免疫沉淀IP免疫熒光IF中的應用
Flag標簽系統是已被公認的用于表達、純化以及檢測融合蛋白的表達系統,廣泛應用于Western blotting、免疫細胞組化、免疫共沉淀、流式細胞術、蛋白純化以及蛋白相互作用、蛋白分離等多個研究領域。Flag標簽是一個與重組蛋白相融合的由 8個親水氨基酸(DYKDDDDK)組成的多
Myc抗體推薦—高品質Myc標簽單克隆抗體
隨著蛋白質組學的迅猛發展,重組蛋白質的使用在近年來大大增加。重組雜合體含有一個親和標簽如GST、Myc、His等,可用于輔助目標蛋白的純化,這已經被廣泛使用。利用融合蛋白有助于重組蛋白純化和檢測的這個有點被廣泛認可。Myc標簽相當于人的c-Myc 410-419位肽段(序列為:EQKLISEED
蛋白純化的首選標簽Histag的優勢及應用
His標簽蛋白純化工具-蛋白純化必備在大腸桿菌和別的原核系統中表達的多組氨酸標簽重組蛋白一般運用固定的金屬離子親和色譜來純化或稱為 IMAC. 在這個進程中,支撐物 (一般是珠狀瓊脂糖凝膠或磁珠顆粒) 用適宜的耦合試劑來進行衍生,比方氨三乙酸 nitrilotriacetic acid (NTA
常用內參抗體和標簽抗體
Anti-β-Tubulin,Anti-β-Actin,Anti-GAPDH,Anti-GFP Tag,Anti-RFP Tag 等Epitope Biotech Inc. 公司定制生產高品質的對特定表位有特異性的小鼠單克隆抗體,與其他公司生產的同類產品相比,具有最高的靈敏度和最高的特異性,并且性價
基因帶六個his標簽,蛋白純化時為何掛不上鎳柱
。。。等待高人回答txstbbm(站內聯系TA)可能情況:1,ORF不完整或者不是預期的ORF,His沒表達出來2,His被空間結構所掩蓋,建議變性后再過柱cloudy3197(站內聯系TA)同一ls,可能跟蛋白空間結構有關,變性后再上柱。2. 柱子是新的還是以前用過的,舊的應該很好的處理一下,3.
如何選擇合適的GST抗體?
GST標簽系統具有蛋白表達產率高、表達產物純化方便,以及利于GST抗體制備等特點和優勢。GST融合蛋白在水溶液中可溶,可從細菌裂解液中提取,在不變性的條件下通過親和層析得到,也可以直接被位點特異性蛋白酶裂解去除。正是由于以上的優點,商品化的GST融合蛋白表達體系以及GST標簽抗體系統至今仍被廣泛
如何選擇合適的GST抗體?
GST標簽系統具有蛋白表達產率高、表達產物純化方便,以及利于GST抗體制備等特點和優勢。GST融合蛋白在水溶液中可溶,可從細菌裂解液中提取,在不變性的條件下通過親和層析得到,也可以直接被位點特異性蛋白酶裂解去除。正是由于以上的優點,商品化的GST融合蛋白表達體系以及GST標簽抗體系統至今仍被廣泛
His標簽蛋白純化試劑盒操作步驟(以大腸桿菌為例)
使用說明:對于用鎳柱純化大腸桿菌中His標簽蛋白比較熟悉的使用者可以直接參考“4. 簡化的操作流程”。否則請參考如下詳細內容:如下以最常見的大腸桿菌中表達純化His標簽重組蛋白為例,說明本產品的使用方法。在其它體系中表達時,請參考該表達體系的相關使用說明,并借鑒大腸桿菌中純化His標簽重組蛋白的使用
大鼠組胺(HIS)酶聯免疫分析
大鼠組胺(HIS)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿及相關液體樣本中組胺(HIS)的含量。實驗原理:???本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠組胺(HIS)水平。用純化的大鼠組胺(HIS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中
Histag蛋白純化技術解讀(二)
實驗流程對比展示通過實驗流程的對比發現,可以看出BeaverBeads?與金屬傳統離子鰲和瓊脂糖預裝柱純化組氨酸標簽蛋白操作流程的優化與效率的提升。圖:磁性分離器圖:BeaverBeads? IDA-Nickel產品包裝形式Cat.?70501-K10產品包含實驗過程及磁珠再生所需要的各種試劑,更方
Histag蛋白純化技術解讀(一)
隨著基因組學和基因工程技術的發展,快速獲得目標蛋白的基因已相對容易。將目標基因構建到原核或真核細胞系統中進行蛋白質的重組表達是獲得目的蛋白的有效方法。今天,小海貍就為大家來詳細說一說。His-tag蛋白純化技術在進行基因重組時,通常將目的蛋白和一個親和純化標簽進行融合表達,然后借助親和層析方法實現蛋
his蛋白分離純化時用咪唑的原因
是因為his含有咪唑基團,咪唑環可以與二價金屬陽性子結合。呃,完整的解釋是這樣的: his含有咪唑基團,可以與二價金屬陽性子結合,當帶His標簽的蛋白質結合在特殊的陽離子柱上的時候,可以被咪唑競爭下來。。。
如何選擇合適的KT3標簽抗體?
標簽抗體的效價如何考察?KT3表位標簽經常被重組到目標蛋白的的N末端或C末端,以實用免疫組織化學或熒光化學技術來實現可視化觀察和定位。KT3標簽的氨基酸序列為KPPTPPPEPET。Abbkine特異性的KT3單克隆抗體能識別來源于來自猿猴病毒40大T抗原( SV40)序列的KT3融合蛋白。如何
如何選擇合適的CBP標簽抗體?
CBP標記的蛋白在低濃度鈣緩沖液中能夠異性的被鈣調蛋白樹脂捕捉吸附,并且在中性環境中能夠被2 mM EGTA洗脫,這與6組氨酸親合標簽純化體系相比反應條件要溫和許多。僅有4-kDa 大小的CBP tag 與26-kDa GST 標簽相比對蛋白分子的影響非常小。在所表達的蛋白分子上包含一個凝血
核內參PCNA抗體用于細胞核內參的PCNA單抗
增殖細胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen簡稱PCNA)由Miyachi等于1978年在 SLE(系統性紅斑狼瘡)患者的血清中首次發現并命名,因其只存在于正常增殖細胞及腫瘤細胞內而得名。PCNA是一種分子量為36KD的蛋白質,在細胞核內合成,并存在于
如何選擇合適的高靈敏度RFP(DsRed)標簽抗體?
紅色熒光蛋白(RFP)是從太平洋與海葵相關的 (Discosomasp)中分離出來的一種能在紫外線的照射下可發射紅色熒光的蛋白。在細胞中熒光轉換效率高.是目前發現的具有最長激發波長與發射波長的自然發光熒光蛋白,RFP基因編碼的蛋白質由225個氨基酸組成,相對分子質量(Mr)為25.9ku.RFP
常見蛋白標簽6xHis標簽
6xHis標簽,也稱為多組氨酸標簽(polyhistidine ),His6標簽或hexa組氨酸標簽,這是一種在轉染的細胞中目標蛋白的C端或N端上由至少6個組氨酸殘基鏈接上所組成的氨基酸序列,它的序列如下所示:相對小的分子量,低的免疫原性,親水性和在去污劑和其他添加劑存在的情況下的易變性,因此在天然
GFP抗體—綠色熒光蛋白的單克隆和多克隆標簽抗體
GFP(Green Fluorescent Protein,綠色螢光蛋白)是由下村脩等人在1962年在一種學名Aequorea victoria的水母中發現。其基因所產生的蛋白質,在藍色波長范圍的光線激發下,會發出綠色螢光。GFP標簽可位于蛋白質的C端或N端,該系統已廣泛 應用于各種細胞
如何選擇合適的Myc標簽抗體?
隨著蛋白質組學的迅猛發展,重組蛋白質的使用在近年來大大增加。重組雜合體含有一個親和標簽如GST、Myc、His等,可用于輔助目標蛋白的純化,這已經被廣泛使用。利用融合蛋白有助于重組蛋白純化和檢測的這個有點被廣泛認可。Myc標簽相當于人的c-Myc 410-419位肽段(序列為:EQKLISEED
如何選擇合適的MBP標簽抗體?
大腸桿菌麥芽糖結合蛋白( Maltose Binding Protein,MBP)來源于大腸桿菌malE基因編碼的蛋白,是細菌麥芽糖轉運系統的成員之一,主要負責麥芽糖的攝取及分解代謝。malE基因產物能與多種蛋白融合,是進行表達研究的有效媒介,由于MBP融合蛋白原核表達載體具有表達效率高,易于純
如何選擇合適的HA標簽抗體?
HA標簽系統利用一個HA (流感病毒血凝素,influenza hemagglutinin epitope: YPYDVPDYA)短肽肽融合到目標蛋白。HA標簽可位于蛋白質的C端或N端,該系統已廣泛應用于多種細胞類型,相應的HA標簽抗體也被廣泛應用。HA 標簽抗體能特異識別C末端或N末端帶有