靶向FGFR3胞外區域的人scFv抗體的篩選和活性研究（一）
成纖維細胞生長因子(FGF)是最大的一類中胚層和上皮細胞生長分化多肽因子家族。FGFs在許多生物學過程中發揮重要作用，比如胚胎發育，傷口愈合，血細胞生成及血管發生等。此外，已有研究表明FGFs可以增加多種腫瘤細胞的浸潤性，如前列腺、膀胱、腎臟、乳房、胰腺等部位腫瘤。目前，共發現20多種FGFs，對不同類型細胞具有不同的作用。但是，只發現了5種FGF受體(FGFR)。在蛋白水平上，這些受體具有55%-72%的同源性。FGFR結構包括一個胞外配體結合區域，一個跨膜區域以及一個胞內激酶區域。配體結合區域包含三個不同的類似免疫球蛋白結構域(稱為免疫球蛋白I，II和III)。FGFR1-3 mRNA的不同的剪接作用形成兩種亞型α和β。其中FGFR3具有兩種不同的突變體IIIb和IIIc。這兩種變體具有不同的親和活性：IIIc分布更加廣泛，能和多種FGFs結合(FGF1，FGF2，FGF4，和FGF9)；IIIb優先和FGF1結合，......閱讀全文
靶向FGFR3胞外區域的人scFv抗體的篩選和活性研究（一）
成纖維細胞生長因子(FGF)是最大的一類中胚層和上皮細胞生長分化多肽因子家族。FGFs在許多生物學過程中發揮重要作用，比如胚胎發育，傷口愈合，血細胞生成及血管發生等。此外，已有研究表明FGFs可以增加多種腫瘤細胞的浸潤性，如前列腺、膀胱、腎臟、乳房、胰腺等部位腫瘤。目前，共發現20多種FGFs，對不
靶向FGFR3胞外區域的人scFv抗體的篩選和活性研究（二）
噬菌體ELISA使用0.3ug的FGFR3，FGFR1或者人IgG蛋白包被微孔板，洗滌，封閉，加入不同濃度前面篩選純化后的噬菌體懸浮液。孵育后，加入HRP-抗M13抗體，加入底物顯色，450nm讀取結果。 單克隆噬菌體ELISA經過兩輪或三輪的篩選后收獲的噬菌體經過培養生長出克隆，然后使用QPix高
靶向FGFR3胞外區域的人scFv抗體的篩選和活性研究（三）
scFv抗體對RT112細胞表達的FGFR3的活性：使用FACS檢測了scFvs和膀胱癌RT112細胞表達的天然FGFR3蛋白的結合活性。如圖3A所以，首先檢測了6個scFvs噬菌體克隆，6個克隆都可以和膀胱癌RT112細胞發生顯著的反應。然后，檢測純化后的4個scFvs蛋白(3B，3C，2D，7D
篩選解離速率優化的單鏈抗體（scFv）
選擇3~5輪后，隨機挑取克隆加入96孔微量滴定板中 并誘導表達可溶性scFv.然后，在包被有相關抗原的96孔微量滴定板中，用ELISA分析含有可溶性scFv的細菌上清。此過程可以識別出那些結合了抗原的scFv.但即便采用上述嚴謹性選擇后，ELISA陽性克隆中僅有部分克隆的親和力比野生型高。ELI
篩選解離速率優化的scFv
選擇3~5輪后，隨機挑取克隆加入96孔微量滴定板中 并誘導表達可溶性scFv.然后，在包被有相關抗原的96孔微量滴定板中，用ELISA分析含有可溶性scFv的細菌上清。此過程可以識別出那些結合了抗原的scFv.但即便采用上述嚴謹性選擇后，ELISA陽性克隆中僅有部分克隆的親和力比野生型高。ELI
篩選解離速率優化的scFv
選擇3~5輪后，隨機挑取克隆加入96孔微量滴定板中 并誘導表達可溶性scFv.然后，在包被有相關抗原的96孔微量滴定板中，用ELISA分析含有可溶性scFv的細菌上清。此過程可以識別出那些結合了抗原的scFv.但即便采用上述嚴謹性選擇后，ELISA陽性克隆中僅有部分克隆的親和力比野生型高。ELISA
免疫原的設計策略（二）
Tips根據研究目的的不同，有時需要抗體既可識別修飾后的蛋白，又可識別無修飾的蛋白，即pan抗體。針對這類抗體，篩選時需要能識別兩種多肽。??PART03 應用于試劑盒配對用抗體?試劑盒配對用抗體通過識別蛋白不同表位來檢測樣品中目的蛋白的含量。因此設計此類免疫原應先調研該蛋白的整體結構、整個蛋白的大
流式檢測CAR，無需再考慮抗原特異性！
Cell Signaling Technology (CST)開發了一組識別廣泛 CAR的檢測試劑：抗 CAR Linker 的抗體。它可以整合到多參數流式檢測實驗中，用于監測臨床前模型中 CAR 的表達、轉運和持久性。 CAR-T 細胞療法（Chimeric Antigen Receptor
研究開發出原位代謝靶向的功能菌篩選、培養和強化技術
環境修復與生態系統工程高度依賴于原位功能菌的挖掘和應用，但長期以來，業界普遍采用的“先養后篩”范式面臨著挑戰。由于缺乏有效的菌群原位功能快檢方法，因此通常難以快速識別和挖掘具有潛在功能的原位菌株。此外，即使能分離出功能菌，其在純培養條件下的代謝效能（如除磷效率）往往與其原位環境有巨大差異，經常導
研究開發出原位代謝靶向的功能菌篩選、培養和強化技術
環境修復與生態系統工程高度依賴于原位功能菌的挖掘和應用，但長期以來，業界普遍采用的“先養后篩”范式面臨著挑戰。由于缺乏有效的菌群原位功能快檢方法，因此通常難以快速識別和挖掘具有潛在功能的原位菌株。此外，即使能分離出功能菌，其在純培養條件下的代謝效能（如除磷效率）往往與其原位環境有巨大差異，經常導致環
33肽標簽提高大腸桿菌表達單鏈抗體溶解度和穩定性
單鏈抗體（single chain variable fragment，scFv）由抗體的重鏈和輕鏈可變區通過一段柔性多肽連接而成。scFv分子量僅約30 kDa，具有較高的組織穿透能力，在體內比抗體更快被清除。scFv可避免由Fc區介導的免疫反應。這些特征使scFv更適合應用在體內影像診斷、腫
抗體的結構域
Ig分子的兩條重鏈和兩條輕鏈都可折疊成數個球形結構域(domain)，每個結構域行使其相應的功能。輕鏈有VL和CL兩個結構域；IgG、IgA和IgD的重鏈有VH、CH1、CH2和CH3四個結構域；IgM和IgE的重鏈有五個結構域，即多一個CH4結構域。每個結構域由約110個氨基酸組成，氨基酸序列
抗體藥研究的漸變之路（二）
圖4. 單克隆抗體結構與類型[7]Rituximab是嵌合mAb，其在臨床上用于治療非霍奇金淋巴瘤。不幸的是，小鼠可變區在許多情況下仍然被認為是外來的，這使得嵌合mAb的應用得到了一定的限制。[6-7] Alemtuzumab是人源化單克隆抗體，一種白血病抗癌新藥。人源化單克隆抗體在可變區域內，
一種關于治療手足口病的雙特異性抗體的研究
手足口病（HFMD）是由腸道病毒引起的疾病，引發手足口病的腸道病毒有20多種，其中腸道病毒71型（EV71）和柯薩奇病毒A16（CA16）是手足口病的主要致病因子，可導致嚴重的中樞神經系統并發癥。最近針對EV71病毒感染的疫苗和抗體的開發取得了突破性的進展，然而，針對EV71和CA16同時感染的
抗體的結構域介紹
Ig分子的兩條重鏈和兩條輕鏈都可折疊成數個球形結構域(domain)，每個結構域行使其相應的功能。輕鏈有VL和CL兩個結構域；IgG、IgA和IgD的重鏈有VH、CH1、CH2和CH3四個結構域；IgM和IgE的重鏈有五個結構域，即多一個CH4結構域。每個結構域由約110個氨基酸組成，氨基酸序列具有
簡述抗體的結構域
Ig分子的兩條重鏈和兩條輕鏈都可折疊成數個球形結構域(domain)，每個結構域行使其相應的功能。輕鏈有VL和CL兩個結構域；IgG、IgA和IgD的重鏈有VH、CH1、CH2和CH3四個結構域；IgM和IgE的重鏈有五個結構域，即多一個CH4結構域。每個結構域由約110個氨基酸組成，氨基酸序列
【干貨】抗體藥的漸變之路
20世紀90年代末，治療藥物主要由小分子化藥主導。而在近幾十年里，人類生命健康領域基于抗體藥物療法的使用呈現了指數級增長，并成為了治療藥物的一大組成部分。抗體已被證明在治療包括癌癥、自身免疫、傳染病甚至神經退行性疾病在內的多種疾病方面具有廣泛的用途[1]。FDA僅在2018年就批準了59款新藥，
噬菌體展示技術與抗體藥物研發
2018年諾貝爾化學獎塵埃落定，授予Frances Arnold、George Smith、Gregory Winter三人。其中化學獎一半的獎金授予美國科學家Frances Arnold，獎勵她的工作實現了酶的定向進化；另一半的獎金授予英國科學家Gregory Winter以及美國科學家Geo
揭示靶向裂谷熱病毒的人源單克隆抗體的中和作用機制
裂谷熱是經蚊類媒介或接觸傳播的急性病毒性人畜共患病，該病最早于1931年被發現【1】。WTO報道，從2000年至2018年6月，裂谷熱病毒共引起4830例新發病情，并造成967例死亡，死亡率高達20%【2】。裂谷熱主要在非洲流行，但2000年時在沙特阿拉伯與也門等國家開始流行【3】。2016年，
單域抗體|納米抗體|VHH文庫構建
單域抗體，也稱為VHH（Variable domain of heavy chain of HCAb）抗體或納米抗體，是一種小型抗體分子。與傳統抗體相比，VHH具有更小的分子尺寸、更高的穩定性和更易于工程化的特點，具有廣泛的生物醫學應用潛力。單域抗體文庫的構建是開發和優化這些抗體的關鍵步驟之一。?一
一種靶向ras突變腫瘤的抗體和相應治療的新策略
致癌RAS突變體(RASMUT)蛋白由于其在細胞內的位置導致常規抗體的無法接觸并靶向它，因此通過常規抗體方案是無法治靶向這種突變并治療癌癥的。圖片來源；Science Advances 近日來自韓國亞洲大學、成均館大學以及Orum Therapeutics Inc公司的研究人員合作，報道了一種
FGFR3基因的概念和作用
FGFR3基因所編碼的蛋白質是屬于成纖維細胞生長因子受體（FGFR）家族成員之一，目前已確定了四種由FGFRs, 即FGFR1、FGFR2、FGFR3和FGFR4。FGFR3可與酸性和堿性成纖維細胞生長因子（FGF）結合，在骨骼發育和維持中起著重要作用。體細胞FGFR3基因突變多見于表淺的乳頭狀膀胱
抗體篩選技術匯總
近年來，生物藥的市場需求逐年擴容，其中抗體藥物因其靶向性好，治療效果顯著，在生物藥中占據著舉足輕重的地位，目前已經進入了抗體藥物發展的黃金時代。隨著抗體藥的需求越來越大，抗體篩選技術的發展也是日新月異，目前應用較普遍的有雜交瘤技術、抗體文庫篩選技術、納米抗體技術和轉基因小鼠抗體篩選技術。其中抗體
溫州醫學院Cell子刊聚焦重要受體
來自溫州醫學院、紐約大學醫學院的研究人員，在新研究中對包含致病性K650E突變的FGFR3 (FGF receptor 3) 進行了結構分析，相關研究發現在線發表在8月22日的《Structure》雜志上。 來自溫州醫學院的李校堃( Xiaokun Li)教授和紐約大學醫學院的Moos
基因工程重組抗體技術的研究
在抗體研究的漫長過程中,相繼發展了三代不同水平的抗體制備技術?其中以抗原免疫高等脊椎動物制備的多克隆抗體,稱為第一代抗體;通過雜交瘤技術生產的只針對某一種特定抗原決定簇的單克隆抗體,稱為第二代抗體;應用重組DNA技術或是基因突變的方法改造某種抗體基因的編碼序列,使之產生出自然界中原本存在的抗體蛋白質
LC/MS和NMR可用于食品安全的非靶向篩選
三聚氰胺丑聞 在2008年，在嬰兒奶粉中發現三聚氰胺的大丑聞在中國爆發。三聚氰胺，是一種平常為白色晶體的化學物質，富含氮元素（67%）。因為氨基酸同樣也含有大量的氮元素，而且蛋白質由氨基酸組成，所以食物中蛋白質含量一般都是通過檢測食物中的氮含量。 因此，在食品中添加三聚氰胺可以使得
單克隆抗體C8可有效抑制新冠病毒
5月6日，國際學術期刊《細胞與分子免疫學》 (Cellular & Molecular Immunology) 在線發表了中國科學院分子細胞科學卓越創新中心（生物化學與細胞生物學研究所）陳劍峰研究團隊的最新研究成果“Identification and characterization of a
免疫毒素的－分類
根據“彈頭”不同劃分：①細菌性毒素。某些細菌能產生強大的毒素蛋白，是用于構建重組免疫毒素彈頭的一類最多的蛋白毒素。這些蛋白毒素被用于與抗體或生長因子等靶向分子連接，以殺傷表面帶有特定抗原或受體的細胞。因其具有靶向性和有效劑量小的特點(通常幾個毒素分子就足以殺死一個細胞)而被應用于自身免疫疾病，移植排
抗體的生物活性
抗體的生物學活性體現在：（1）特異性結合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞，通常需要補體或吞噬細胞等共同發揮效應以清除病原微生物或導致病理損傷。然而，抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合，直接發揮中和病毒的作用。（2）激活補體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補
新技術可高效誘導單克隆抗體
抗體藥物作為生物技術產業的關鍵驅動力，能安全有效地對癌癥、自身免疫病和感染性疾病等進行靶向治療，該藥物在2012年創下全球645.7億美元的銷售額，占生物制藥51.8%的份額。目前抗體藥物的市場需求量仍在攀升，預計到2015年，抗體藥物銷售額有望達980億美元左右。業內人士認為，隨著疾病譜變化，