農桿菌介導的小麥新鮮離體幼胚的轉化實驗——幼胚的接種
實驗材料幼胚盾片試劑、試劑盒Silwet農桿菌菌液儀器、耗材培養皿實驗步驟1. 幼胚盾片接種于侵染培養基后，從搖床上取出一管菌液（見注 9），向管中加入 60 μl 1%（V/V）的 Silwet，至終濃度為 0.015%。2. 完成 3.2 節的步驟 3 后，立即將離心管中所有的農桿菌菌液（4 ml) 倒入已接種幼胚盾片的培養皿中 [見注 10，圖 5.1 (a )]。3. 將培養皿轉移至黑暗條件下放置 15 min 至 3 h ( 見注 11)。在此期間可以進行其他培養皿的農桿菌菌液侵染操作。4. 吸去多余的農桿菌懸液 [ 圖 5.1 (b) ] ，應注意不要吸到胚（見注 12)。將胚轉移至含固體接種培養基的新培養皿中，接種時盾片向上，胚軸面需接觸到培養基。5. 將共培養培養板置于 22~23℃ 暗培養 2~3 天。展......閱讀全文
農桿菌介導的小麥新鮮離體幼胚的轉化實驗——幼胚的接種
實驗材料幼胚盾片試劑、試劑盒Silwet農桿菌菌液儀器、耗材培養皿實驗步驟1. 幼胚盾片接種于侵染培養基后，從搖床上取出一管菌液（見注 9），向管中加入? 60 μl 1%（V/V）的 Silwet，至終濃度為 0.015%。2. 完成 3.2 節的步驟 3 后，立即將離心管中所有的農桿菌菌液（4?
幼胚培養的技術特點
中文名稱幼胚培養英文名稱culture of larva embryo定 義將子葉期以前的具胚結構的幼小胚從母體上分離出來，放在無菌的人工環境條件下使其進一步生長發育形成幼苗的技術。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞培養與細胞工程（二級學科）
病毒的雞胚培養_羊膜腔接種
病毒的雞胚培養可用于：（1）某些病毒分離、增殖；（2）病毒的毒力測定、中和試驗；（3）生產疫苗等。實驗方法原理?羊膜腔接種主要應用于從臨床材料（如患者咳嗽液等）分離流感病毒等。這種接種途徑可直接感染羊膜腔的內胚層，也可被雞胚咽下或吸入，引起全胚胎感染。另外，病毒也可被排泄到尿囊腔中，使尿囊腔中含有大
病毒的雞胚培養_卵黃囊接種
實驗方法原理卵黃囊接種法主要用于蟲媒病毒、衣原體及立克次體等的分離和繁殖。這些大的病原體主要在卵黃囊的內皮細胞生長，且生長速度很快，立克次體在染色后也可看到。實驗材料雞胚試劑、試劑盒消毒劑 (2. 5% 碘酒和 75% 酒精）儀器、耗材檢卵燈照明燈卵杯卵盤雞胚開孔器等實驗步驟1. 接種步驟與方法(1
病毒的雞胚培養_尿囊腔接種
實驗方法原理尿囊腔接種法廣泛應用于流感病毒、流行性腮腺炎病毒和新城疫病毒的適應和傳代培養，這些病毒被注射到尿囊腔后，可在內皮細胞中復制，復制的病毒被釋放到尿囊液中，因此，在尿囊液中含有大量的病毒。實驗材料雞胚試劑、試劑盒消毒劑 (2. 5% 碘酒和 75% 酒精）儀器、耗材檢卵燈照明燈卵杯卵盤雞胚開
農桿菌介導的小麥新鮮離體幼胚的轉化實驗
實驗材料?農桿菌細胞試劑、試劑盒?根癌農桿菌甘油原液抗生素儀器、耗材?MG L 液體培養基實驗步驟 1. 從根癌農桿菌甘油原液中吸取 400 μl 加入含 10 ml MG/L 液體培養基并添加相應抗生素的 50 ml 無菌管中，28℃、250 r/min 搖床振蕩培養過夜（17~20 h) 至 O
農桿菌介導的小麥新鮮離體幼胚的轉化實驗
實驗材料農桿菌細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒根癌農桿菌甘油原液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?抗生
病毒的雞胚培養_絨毛尿囊膜接種
實驗方法原理絨毛尿囊膜接種常用于牛痘病毒、天花病毒、單純皰疹病毒的分離，因為這些病毒在絨毛尿囊膜上可形成肉眼可見的斑點狀或痘皰狀病灶。另外，病毒可在絨毛尿囊膜上進行滴定，因為感染性病毒顆粒的數目可以通過產生的斑和痘的數目來計算。該方法還可用于抗病毒血清的滴定試驗，即在有抗體存在的情況下，痘皰形成受到
農桿菌介導的小麥新鮮離體幼胚的轉化實驗7
轉化效率的計算儀器、耗材Southern 雜交分析實驗步驟1. 轉化效率通常用百分比表示。計算方法為：確定的獨立轉基因單株總數 x100 /侵染的總幼胚數。2. 如果一個胚得到一株以上的轉基因植株，這視為一個獨立轉化事件，來自同一轉化事件的其他所有單株視為姐妹株。這些姐妹株有可能來源于不同的細胞，屬
農桿菌介導的小麥新鮮離體幼胚的轉化實驗4
胚性愈傷的誘導和再生實驗材料胚儀器、耗材誘導培養基再生培養基實驗步驟1. 共培養 2~3 天后，將胚轉移至誘導培養基以誘導胚性愈傷（表 5.1，誘導培養基 a 適用于面包小麥，誘導培養基 b 適用于硬粒小麥）。記錄下轉移的胚的個數以便計算轉化效率，轉移時確保胚的盾片仍朝上。22~23℃ 避光培養。2
農桿菌介導的小麥新鮮離體幼胚的轉化實驗2
根癌農桿菌接種外植體的準備（見注 6)實驗材料面包小麥硬粒小麥試劑、試劑盒乙醇儀器、耗材層流罩超凈臺實驗步驟1. 面包小麥和硬粒小麥開花后 12~16 天剪下幼穗，將種子幼體用 70% ( V/V）的乙醇浸泡 1 min，再換用 10% 乙醇（V/V）輕輕晃動 10 min 進行表面消毒，最后用足量
農桿菌介導的小麥新鮮離體幼胚的轉化實驗6
轉基因植株的鑒定及種子的收獲實驗材料再生苗儀器、耗材Magenta 盒實驗步驟1. 經第二輪選擇后，挑出根莖生長良好的再生苗（見注 16 ) 移栽于土壤中。首先，將各株再生苗移入 8 cm2?的盆缽里生長 1~2 周，使它們能夠逐漸適應溫室條件。當小苗足夠大時，再取葉片提取 DNA 用于 PCR 和
農桿菌介導的小麥新鮮離體幼胚的轉化實驗——選擇
實驗材料愈傷組織儀器、耗材選擇培養基Magenta 培養盒實驗步驟1. 將培養物轉移至第一輪選擇培養基中（表 5.1，選擇培養基 1 ) ( 見注 15)。一些愈傷組織在轉移時會自然散開，盡管這無關緊要，但放置時應將散開的愈傷塊彼此靠近，以標記它們是來自同一幼胚。2. 培養 3 或 4 周后，篩選出
農桿菌介導的小麥新鮮離體幼胚的轉化實驗1
根癌農桿菌菌液的準備實驗材料農桿菌細胞試劑、試劑盒根癌農桿菌甘油原液抗生素儀器、耗材MG L 液體培養基實驗步驟1. 從根癌農桿菌甘油原液中吸取 400 μl 加入含 10 ml MG/L 液體培養基并添加相應抗生素的 50 ml 無菌管中，28℃、250 r/min 搖床振蕩培養過夜（17~20
農桿菌介導的大麥轉化方法實驗
實驗材料?植物凝膠pBract 質粒pSoup 質粒試劑、試劑盒?利福平卡那霉素儀器、耗材?MG L 培養基實驗步驟 1. 組織培養基的準備提前準備好所需濃度 2 倍的植物凝膠，高壓滅菌（見注 3 ) 。所有的組織培養基都要過濾滅菌，因此除了無菌的儲備液，其他培養基成分按所需濃度 2 倍的量混勻
農桿菌介導的大麥轉化方法實驗
實驗材料植物凝膠pBract 質粒pSoup 質粒試劑、試劑盒利福平卡那霉素儀器、耗材MG L 培養基實驗步驟1. 組織培養基的準備提前準備好所需濃度 2 倍的植物凝膠，高壓滅菌（見注 3 ) 。所有的組織培養基都要過濾滅菌，因此除了無菌的儲備液，其他培養基成分按所需濃度 2 倍的量混勻，調到合適的
農桿菌介導的大麥轉化方法實驗
實驗材料：植物凝膠 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?? pBract 質粒 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ??
植物胚胎培養
植物胚胎培養包括胚培養、胚珠培養、子房培養、胚乳培養。 一、植物胚培養(embryo culture of plants) 1．胚培養的意義和類型 胚培養在實踐中的應用意義 · 克服雜交育種中雜種胚的早期夭折 · 克服珠心胚干擾，提高育種效率 · 理論研究領域的應
桑椹胚的胚泡形成過程
桑椹胚增殖、分裂，當卵裂球數達到100個左右時，細胞間開始出現小的腔隙，最后融合成一個大腔，桑椹胚細胞繼續發育為胚泡腔。此時，實心的桑椹胚演變為中空的泡狀，稱胚泡( blastor-cyst)。胚泡壁為1層扁平細胞，稱滋養層；腔內的一側有一細胞團，稱內細胞群( inner-cellmass)。覆蓋在
神經胚的介紹
神經胚（neurula）亦稱髓胚。主要是指脊索動物的發生中在原腸形成（或者原條期）之后，從出現中樞神經系統原基的神經板時期開始，到袖經板閉合變成神經管期間的胚胎而言。在這一時期外胚層分化為神經板及表皮區，在神經板之下的為頭腸、前索板、脊索原基、預定體節的位置，在多數情況下，表皮區的外胚層被側板的
胚膜的概念
胚膜指的是高等陸生動物胚胎發育過程中胚體以外的一些膜組織，可提供個體發育的適宜的小環境，并能吸收營養，交換氣體和存放、排泄廢物等。
免疫接種的接種對象
白喉、百日咳、麻疹、脊髓灰質炎等疫苗多用于兒童，因成人經隱性感染或患病已獲得免疫力。有些傳染病如傷寒、霍亂等，不同年齡都可感染，故所有人群皆需接種。另外，視職業或工作性質不同需接種某類疫苗，如破傷風類毒素的接種對象主要是戰士、民兵。
免疫接種的接種途徑
常用的有皮上劃痕、皮內、皮下、口服與氣霧等途徑。死疫苗多用皮下注射法，活疫苗則可用皮內注射、皮上劃痕或以自然感染途徑接種，尤以后者為佳。如脊髓灰質炎活疫苗以口服為佳，而流感疫苗則以氣霧吸入為佳。
胚斑的結構特點
在動物卵母細胞核中所認定的一種核仁（R．Wagner，1836）。這種核仁的形態、數目、位置，都可由于卵的發生時期和動物種類的不同而有很大的差異。在海膽和哺乳類等卵黃少的情況下，核仁的形體較大，數目為1（海膽）-2個；而在魚類、兩棲類、爬行類、鳥類和某種昆蟲等一些卵黃多、胞核大的卵，其核仁的數目則很
神經胚的功能作用
神經胚：神經溝兩側上部向背部中線升起、靠攏并愈合在一起，形成一個中空的管狀結構，與此同時，管的頂部細胞脫離外胚層，兩側的外胚層細胞重新融合在一起形成的完整的外胚層。
病毒的雞胚培養
目的意義：了解禽源病毒雞胚培養的意義及用途掌握病毒雞胚培養的基本方法基本原理：雞胚培養是培養某些病毒常用方法,此方法可用于某些病毒的分離、增殖、毒力滴定、中和試驗及生產疫苗等。病毒接種雞胚的途徑有多種，主要有卵黃囊接種、絨毛尿囊腔接種、絨毛尿囊膜接種、羊膜腔接種途徑等，應根據需要選擇適當的途徑。器材
胚孔的形成特點
原腸形成時，內胚層細胞遷移到胚體內部形成原腸腔，留有與外界相通的孔。通過胚孔背唇進入胚內的細胞將形成脊索及頭部中胚層，其余大部分中胚層細胞經胚孔側唇進入胚內。原口動物的口起源于胚孔，稱為口胚孔，如大多數無脊椎動物；而后口動物的胚孔則發育為成體的泄殖腔，稱為泄殖胚孔，與胚孔相對的一端另行開口，發育為成
胚狀體的定義
離體培養條件下，沒有經過受精過程，但是經過了胚胎發育過程所形成的胚狀類似物，此現象無論在體細胞培養還是生殖細胞培養中均可以看到，因而統稱為體細胞胚或胚狀體。在離體植物細胞、組織或器官培養過程中，由一個或一些體細胞，經過胚胎發生和發育過程，形成與合子胚相類似的結構。胚狀體一般專指在組織培養條件下產生的
桑椹胚的定義
桑椹胚（Morula）是指一個受精卵經過多次分裂，形成由32個左右細胞組成的細胞團? 。其屬于動物胚胎發育的早期階段，里面的細胞還是全能細胞。桑椹胚是多細胞動物全裂卵的卵裂期，卵裂球形成團塊狀時期的胚胎，卵裂腔幾乎沒有或者很小
胚狀體的來源
胚狀體大多起源于一個胚性細胞，通過首次分裂形成二細胞原胚，以后經過細胞分裂形成多細胞原胚，在單子葉植物中，胚性細胞的第一次分裂一般為不均等分裂，在雙子葉植物中，胚性細胞的第一次分裂為不均等分裂或者均等分裂，在大多數情況下，胚性細胞的第一次分裂為平周分裂，形成兩個子細胞，處于上部的頂細胞繼續發育為多細