特殊細胞培養實驗_加支持物培養法
實驗方法原理加支持物培養法是預先向培養容器中加入各種可使細胞貼附的支持物，進行培養的方法。待細胞貼附于支持物生長增殖后，可進行各種實驗和觀察。觀察時可把支持物從瓶中抽出，能做各種技術處理，是研究工作中常用的方法之一。各種對細胞無毒性的如玻璃、塑料、雞卵殼膜、膠原、硅橡膠、袋泡茶包裝紙等，均可做支持物用。試劑、試劑盒水酒精儀器、耗材蓋玻片培養瓶玻璃薄膜實驗步驟1. 支持物制備（1）特制有機玻璃、特氟隆薄膜、玻璃等其中以玻璃片和特氟隆薄膜最為多用。前者便于做各種固定、染色處理和觀察；后者最適做電鏡技術，允許做包埋和切片。（2）加支持物培養法程序與一般培養法相同，只是在培養前需在培養瓶中加入已經消毒的支持物。特氟隆薄膜為定型菌包裝產品，用時無菌條件下啟封，用剪刀按需要剪成各種不同大小的塊，于培養接種細胞前，先置入培養容器中即可。（3）通常多用蓋玻片做支持物，用前先要把蓋片用玻璃刀切成一定形態，以便裝入培養瓶中，然后按如下順......閱讀全文
特殊細胞培養實驗_加支持物培養法
實驗方法原理加支持物培養法是預先向培養容器中加入各種可使細胞貼附的支持物，進行培養的方法。待細胞貼附于支持物生長增殖后，可進行各種實驗和觀察。觀察時可把支持物從瓶中抽出，能做各種技術處理，是研究工作中常用的方法之一。各種對細胞無毒性的如玻璃、塑料、雞卵殼膜、膠原、硅橡膠、袋泡茶包裝紙等，均可做支持物
特殊細胞培養實驗_懸浮培養法
實驗方法原理懸浮培養是使貼附性細胞呈懸浮狀態生長。如所培養的細胞本身屬懸浮生長類型，則無須做任何處理，在傳代時先做離心處理去除舊培養液，添加新培養液即可。但在培養貼附型細胞時，因其有貼附性，必須進行干擾使細胞不能貼附，才能形成懸浮狀態生長的細胞。實驗材料細胞儀器、耗材培養瓶攪拌器實驗步驟1. ?用大
特殊細胞培養實驗_微載體細胞培養法
實驗方法原理微載體細胞培養開始于60年代末期，最早使用離子交換凝膠作為載體，輕微攪動即可懸液在培養基中，因而可增加細胞附著的面積，達到大量培養細胞的目的。后來，根據細胞附著生長的特點，對微載體進行了改良，使其帶有電荷或其它介質，更利于細胞附著和生長。這一方法亦可用于常規量的培養，也可用于大規模的培養
特殊細胞培養實驗_單細胞分離培養法
實驗方法原理從理論上說各種培養細胞都可用以進行克隆培養。但實際上，初代培養細胞和有限細胞系（二倍體細胞）比較困難。無限細胞系、轉化細胞系和腫瘤細胞等則比較容易。其原因是，當體內任何細胞被置于體外培養后，對培養環境都有一個適應過程。期間細胞對營養液具有同化作用，即從培養液中攝取營養的同時，也向培養液排
特殊細胞培養實驗
一、二倍體細胞培養法 加支持物培養法 單細胞分離培養法 多孔塑料培養板單細胞克隆法 球體細胞培養實驗 微載體細胞培養法 懸浮培養法 ? ? ? ? ? ?
特殊細胞培養實驗
實驗方法原理 二倍體細胞來源體內二倍體細胞，也即正常細胞的初代培養。初代培養細胞成功后能始終保持二倍體細胞性狀，便成為二倍體細胞培養。二倍體細胞雖不難培養，但欲求長期呈旺盛地增殖生長、并保持二倍體細胞性狀，亦非易事。為此必須采取一些有效的措施，一是低溫凍存，二是妥善的培養方法。用反復傳代的方法以求獲
特殊細胞培養實驗_球體細胞培養實驗
實驗方法原理大多數培養細胞都具有貼附在底物上生長成單層細胞的性質，如細胞長成片之后，讓細胞片與底物脫離，更換到使細胞不易貼附的底物上繼續生長時，則細胞片能卷聚成球體形，成為球體培養。實驗材料細胞試劑、試劑盒Hanks培養液胰蛋白酶儀器、耗材吸管實驗步驟1. ?瓊脂鋪底的培養瓶30 ml無菌培養瓶，每
特殊細胞培養實驗_一、二倍體細胞培養法
實驗方法原理二倍體細胞來源體內二倍體細胞，也即正常細胞的初代培養。初代培養細胞成功后能始終保持二倍體細胞性狀，便成為二倍體細胞培養。二倍體細胞雖不難培養，但欲求長期呈旺盛地增殖生長、并保持二倍體細胞性狀，亦非易事。為此必須采取一些有效的措施，一是低溫凍存，二是妥善的培養方法。用反復傳代的方法以求獲得
特殊細胞培養實驗_多孔塑料培養板單細胞克隆法
實驗方法原理多孔塑料培養板克隆細胞的主要過程是1. ?制備出1~2 細胞/毫升低密度的細胞懸懸液；2. ?向多孔塑料培養板各孔中分別接種細胞懸液0.5~1 ml，則每孔平均含1 個細胞。3. ?鏡下檢測每孔所含細胞數，標記下含單細胞的孔，置溫箱培養，數日后凡在已標記的孔中有生長增殖的細胞群即為克隆細
支持物培養法介紹
加支持物培養法與一般培養法相同，只是在培養前需在培養瓶中加入已經消毒的支持物。 （1）支持物制備：如用特氟隆薄膜，無菌條件下啟封，用剪刀按需要剪成各種不同大小的塊，于培養接種細胞前，先置入培養容器中即可；通常多用蓋玻片做支持物，用前先要把蓋片用玻璃刀切成一定形態，以便裝入培養瓶中，然后按如
細胞培養實驗室的特殊設備簡介
細胞培養實驗室除了應配備上述的常用基本設備以外，如有條件，可添置一些特殊或先進的設備儀器，以便更有效、更精確、更深入地進行實驗室工作。例如： （1）酶聯免疫檢測儀——可用于進行免疫學測定及細胞毒性、藥物敏感性檢測等。 （2） 超低溫冰箱（-80℃）——便于儲存某些試劑及標本。 （3）旋轉培
初代細胞培養實驗——消化培養法
初代培養或原代培養，可以用于：（1）從供體獲取組織后的首次培養；（2）組織和細胞剛剛離體，生物性狀尚未發生很大的變化，具有二倍體遺傳性狀，在供體來源充分、生物條件穩定的情況下（年齡、性別），在一定程度上能反映體內狀態。實驗方法原理合成培養基胰蛋白酶消化培養法，能把組織塊分散成細胞團或單個細胞，便于細
病毒的培養方法實驗——傳代細胞培養法
實驗方法原理從人及動物某些組織，特別是腫瘤組織，經多次傳代可建立傳代細胞系，這種細胞能無限地傳代，某些傳代細胞對病毒敏感范圍較廣，可用作病毒的分離鑒定，如HeLa 細胞，Hep-2 細胞及KB 細胞。三種細胞均來自人腫瘤組織細胞，HeLa 細胞來自子宮頸癌，Hep-2 細胞來自喉癌而KB 細胞來自上
初代細胞培養實驗——組織塊培養法
實驗材料組織試劑、試劑盒Hanks培養液胰蛋白酶NaHCO3儀器、耗材吸管培養瓶燒杯眼科剪眼科鑷實驗步驟1. ?剪切把組織小塊（1cm3）置入小燒杯或青霉素小瓶中，用Hanks液漂液二三次以去掉表面血污，吸凈Hanks液，用眼科剪反復剪切成1mm3塊為止；2. ?擺布用彎頭吸管吸取若干小塊，置入培養
細胞培養實驗——懸浮細胞培養
實驗材料凍存 HeLa S3 細胞試劑、試劑盒70% 乙醇完全 MEM-10胰酶／EDTA儀器、耗材旋轉瓶完全培養基-525 cm2 組織培養瓶C02 培養箱Sorvall H-6000A 轉子100 ml 或 200 ml 通氣旋轉瓶和帶濾膜的瓶蓋實驗步驟1. 將含有凍存 HeLa S3 細胞的安
家兔椎間盤細胞培養實驗——貼塊法
家兔椎間盤細胞培養可以：（1）獲得家兔椎間盤細胞；（2）用于椎間盤相關課題研究；（3）用于家兔模型研究。實驗方法原理首先建立家兔椎間盤細胞的體外培養系統，其中，第一組給予純氧，另外3組給予不同濃度的臭氧：30 ug/ml，60 ug/ml和80 ug/ml，然后于15 min及30 min后，采用臺
神經膠質細胞培養實驗_酶消化法
神經膠質細胞培養可以：（1）獲得神經膠質細胞；（2）用于神經膠質細胞電生理特性，如膜電位、去極化等；（3）用于免疫應答研究。實驗方法原理膠質細胞具有復雜多樣的結構和表達豐富的分泌產物，它含有大部分神經遞質、神經肽、激素及神經營養因子受體、離子通道、神經活性氨基酸親和載體、細胞識別分子，并能分泌多種神
神經膠質細胞培養實驗_酶消化法
神經膠質細胞培養可以：（1）獲得神經膠質細胞；（2）用于神經膠質細胞電生理特性，如膜電位、去極化等；（3）用于免疫應答研究。實驗方法原理膠質細胞具有復雜多樣的結構和表達豐富的分泌產物，它含有大部分神經遞質、神經肽、激素及神經營養因子受體、離子通道、神經活性氨基酸親和載體、細胞識別分子，并能分泌多種神
細胞培養實驗——貼壁細胞培養
實驗材料凍存細胞試劑、試劑盒70% 乙醇PBS胰酶／EDTA儀器、耗材25 cm2 和 150 cm2 組織培養瓶CO2 培養箱實驗步驟1. 將含有凍存細胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解凍。2. 用 70% 乙醇對安瓿的頂端進行消毒，打開安瓿，用吸管將細胞轉移到含有 5 ml 起始培養基的 25 cm
細胞培養實驗
貼壁細胞培養 懸浮細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 凍存細胞
細胞培養實驗
貼壁細胞培養 懸浮細胞培養 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 凍存細胞
細胞培養實驗
實驗方法原理 實驗材料 凍存細胞試劑、試劑盒 70% 乙醇PBS胰酶／EDTA儀器、耗材 25 cm2 和 150 cm2 組織培養瓶CO2 培養箱實驗步驟 1. 將含有凍存細胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解凍。2. 用 70% 乙醇對安瓿的頂端進行消毒，打開安瓿，用吸管將細胞轉移到含有 5 ml 起
小鼠肝細胞培養實驗——細胞培養技術
實驗方法原理直接從生物體內獲取組織細胞進行的首次培養稱為原代細胞培養。原代培養是建立各種細胞系的第一步，是從事培養工作的人員應熟悉和掌握的最基本的技術。根據培養方法不同分為組織塊培養法和單層細胞培養法。實驗材料小鼠試劑、試劑盒DMEMDMEM胰酶PBS儀器、耗材飯盒紗布小剪子小鑷子大鑷子大燒杯平皿研
結締組織類細胞培養實驗——巨噬細胞培養實驗
實驗方法原理巨噬細胞屬免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞容易獲得，便于培養，并可進行純化。但屬不繁殖型細胞群，難以長期生存，好的條件下僅能生活2~3 周，因之多用作初代培養。巨噬細胞也能建成無限細胞系；大多來自小鼠，如P388D-1、J774A.1、RAW
大鼠星型膠質細胞培養實驗——酶消化法
大鼠星型膠質細胞培養可以：（1）用于神經系統發育、分化及再生等基礎研究；（2）腦缺血預處理上調神經保護蛋白的機制研究；（3）腦損傷和腦疼痛的研究；（4）新蛋白的功能研究。實驗方法原理大鼠星形膠質細胞原代培養后，作膠質纖維酸性蛋白(GFAP)免疫細胞化學染色鑒定，應用缺氧D-Hanks'液及缺
小鼠胚胎干細胞培養實驗——體外分化法
小鼠胚胎干細胞培養可以：（1）細胞保種；（2）用于干細胞研究；（3）用于細胞生理學、形態學等研究；（4）動物克隆。實驗方法原理胚胎干細胞在體內外可以分化為各種類型的細胞。我們的體外分化方法有利于神經前體細胞通過在最少量的培養基內選擇（第3步），在有bFGF存在的情況下擴增（第4步）并最終分化在第5步
腫瘤細胞培養實驗
腫瘤細胞培養實驗可用于：（1）研究腫瘤的發生機理；（2）研究生物學行為；（3）研究抗腫瘤藥物。實驗方法原理腫瘤組織及細胞在模擬體內生長環境的條件下、與一般組織細胞一樣、也能夠生長發育乃至繁殖、為研究癌變機理、抗癌藥檢測、腫瘤分子生物學提供大量的實驗材料。實驗材料腫瘤組織試劑、試劑盒培養液Hanks胰
傳代細胞培養實驗
實驗方法原理 當初代培養成功，細胞生長增殖形成單層細胞后，進而擴展匯合，占滿一切空間，此時需要進行分離培養。這一操作稱傳代或再培養。如拖延傳代，細胞會因增殖過度，培養基營養枯竭和代謝產物積累而發生中毒。80%匯合或剛匯合細胞是理想傳代階段。實驗材料 細胞試劑、試劑盒 Hanks胰蛋白酶EDTA培養液
腫瘤細胞培養實驗
腫瘤細胞培養實驗 提高腫瘤細胞培養存活率和生長率的實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 腫瘤組織及細胞在模擬體內生長環境的條件下、與一般組織細胞一樣、也能夠生長發育乃
羊水細胞培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 羊水中含有胎兒脫落的上皮細胞，可在體外培養用以檢驗胎兒核型。 試劑、試劑盒 碘酒 酒精 營養液