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  • 發布時間:2023-09-27 16:01 原文鏈接: T7RNA聚合酶的兩種類型和適用范圍

    T7 RNA 聚合酶是一種依賴 DNA 的 RNA 聚合酶,其對噬菌體 T7 啟動子序列有高特異性。該酶從 T7 啟動子插入到轉錄載體下游的 DNA 上合成大量 RNA。可獲取 T7 RNA 聚合酶技術公告。

     

    應用:標記和未標記的 RNA 轉錄本的合成。

     

    來源:從在質粒上表達 T7 RNA 聚合酶基因的大腸桿菌純化獲得。

     

    性能和質量檢驗:3′ 和 5′ 脫氧核糖核酸外切酶、核糖核酸酶和 DNA 缺口檢測;

    轉錄反應中的性能。

     

    T7 RNA聚合酶類型:

    常規型和耐熱型。常規型T7 RNA聚合酶可在37℃對模板進行高效體外轉錄,而耐熱型T7 RNA聚合酶可在更高的溫度下進行體外轉錄。基于此耐熱的體外轉錄反應特性具有以下優勢:

    1.提升了GC含量較高RNA的轉錄效率;

    2.提升了長片段RNA的合成能力;

    3.在使用帽類似物時,提高了共轉錄的加帽效率;

    4.減少了dsRNA 副產物的形成,降低了合成RNA的免疫原性。

     

    艾美捷T7 RNA聚合酶:

    英文名字:T7 RNA Polymerase

    貨號:C-BSM0124

    規格:5000 U / 25000 U

    組成:T7 RNA Polymerase (50 U/μl)/10×T7 RNA Polymerase Buffer

    純度:SDS-PAGE檢測結果大于95%。

    核內殘留物:將20 U T7 RNA聚合酶與超螺旋質粒DNA在37°C下孵育4小時,DNA電泳未檢測到質粒的變化

    殘留DNA酶:將T7 RNA聚合酶與雙鏈DNA在37°C下孵育16小時,DNA電泳未檢測到DNA變化。

    RNase殘基:將T7 RNA聚合酶與RNA在37°C下孵育1小時,電泳中未檢測到RNA降解

     

    T7 RNA聚合酶適用范圍:

    1. 合成單鏈 RNA,包括 mRNA,siRNA,gRNA 等各類 RNA 的前體。

    2. 合成標記或未標記的高特異性 RNA 探針。

    3. 利用帽子類似物合成加帽的 mRNA。

     

    推薦的反應條件:

    在37°C下培養1小時。如果轉錄物長度小于300nt,反應時間可以延長至2-16小時。反應結束后,在上述20μl反應混合物中加入1μl雙脫氧核糖核酸酶,并在37°C下孵育15分鐘以移動DNA模板

     

    https://www.amyjet.com/products/C-BSM0124-5000U.shtml

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