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  • 免疫熒光染色(間接法)

    1、切片固定后用毛細滴管吸取經適當稀釋的免疫血清滴加在其上,置于染色盒中保持一定的濕度,37℃作用30min。然后用0.01mol/l pH7.2PBS洗兩次,10min,用吸水吸去或吹干余留的液體。 2、再滴加間接熒光抗體(如兔抗人 -球蛋白熒光抗體等),同上步驟,染色30min,37℃,緩沖鹽水洗兩次10min,攪拌,緩沖甘油封固,鏡檢。 對照染色:①抗體對照:用正常兔血清或人血清代替免疫血清,再用上法進行染色,結果應為陰性。②抗原對照:即類屬抗原染色,亦應為陰性。③陽性對照。間接法中上述方法稱雙層法(Double Layer Method)。另一種稱夾心法,即用未標記的特異性抗原加在切片上先與組織中之相應抗體結合,再用該抗原之熒光抗體重疊結合其上,而間接地顯示出組織和細胞中抗體的存在,方法步驟如下: ①切片或涂片固定后,置于染色濕盒內。 ②滴加未標記的特異性抗原作用切片于37℃,30......閱讀全文

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    間接法檢測抗人球蛋白實驗

    實驗方法原理間接試驗的目的是檢查血清中存在游離的不完全抗體。先用Rh(D)陽性O型(或與被檢查ABO同型)的正常人紅細胞吸附血清中存在的游離不完全抗體(即稱致敏)致敏紅細胞經鹽水洗滌后加入抗人球蛋白血清,如出現凝集即為抗人球蛋白間接試驗陽性.試劑、試劑盒生理鹽水實驗步驟方法一:1. 取受檢血青0.5

    間接法測抗體所需試劑與儀器

    磷酸鹽緩沖鹽水(PBS):0.01mol/L,pH7.4熒光標記的抗人球蛋白抗體:以0.01mol/L,pH7.4的PBS進行稀釋。搪瓷桶三只(內有0.01mol/L,pH7.4的PBS 1500ml)有蓋搪瓷盒一只(內鋪一層浸濕的紗布墊)熒光顯微鏡玻片架濾紙37℃溫箱等。

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    簡介交流接觸器的使用接法

      一:一般三相接觸器一共有8個點,三路輸入,三路輸出,還有是控制點兩個。輸出和輸入是對應的,很容易能看出來。如果要加自鎖的話,則還需要從輸出點的一個端子將線接到控制點上面。  二: 首先應該知道交流接觸器的原理。他是用外界電源來加在線圈上,產生電磁場。加電吸合,斷電后接觸點就斷開。知道原理后,你應

    間接法測抗體基本原理

    間接法測抗體基本原理:將抗原連接到固相載體上,樣品中待測抗體與之結合成固相抗原-受檢抗體復合物,再用酶標二抗(針對案檢抗體的抗體,如羊抗人ICG抗體)與固相免疫復合物中的抗體結合,形成固相杭原-受檢抗體-酶栝二抗復合物,測定加底物后的顯色程度,測定待測抗體含量。

    直接法測抗原的注意事項

    1)對熒光標記的抗體的稀釋,要保證抗體的蛋白有一定的濃度,一般稀釋度不應超過1:20,抗體濃度過低,會導致產生的熒光過弱,影響結果的觀察。2)染色的溫度和時間需要根據各種不同的標本及抗原而變化,染色時間可以從10 min到數小時,一般30 min已足夠。染色溫度多采用室溫(25℃左右),高于37℃可

    間接法測抗體基本原理

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    直接法測抗原的基本原理

    將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。其優點是方法簡便、特異性高,非特異性熒光染色少。缺點是敏感性偏低;而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。

    免疫熒光組織化學直接法

      1.檢查抗原法:這是最早的方法,用已知特異性抗體與熒光素結合,制成熒光特異性抗體,直接與細胞或組織中相應抗原結合,在熒光顯微鏡下即可見抗原存在部位呈現特異性熒光。此法很特異和簡便,但一種熒光抗體只能檢查一種抗原,敏感性較差。  2.檢查抗體法將抗原標記上熒光素,即為熒光抗原,用此熒光抗原與細胞或

    直接法血清鉀鈉火焰光度分析實驗

    實驗方法原理 火焰光度分析法,是一種發射光譜分析法,被測溶液經壓縮空氣霧化后于可燃氣體混合后燃燒成火焰,由火焰激發后,各元素可發射出特有的光譜,由于火焰的激發能量較低,故被激發的元素只現于堿金屬與堿土金屬。鉀的光譜是暗紅色,其波長為765nm,Na的光譜是黃色,其波長為589nm。溶液中的金屬元素濃

    間接法測抗體的基本原理

    染色程序分為兩步,第一步,用未知未標記的抗體(待檢標本)加到已知抗原標本上,在濕盒中37℃保溫30min,使抗原抗體充分結合,然后洗滌,除去未結合的抗體。第二步,加上熒光標記的抗球蛋白抗體或抗IgG、IgM抗體。如果第一步發生了抗原抗體反應,標記的抗球蛋白抗體就會和已結合抗原的抗體進一步結合,從而可

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    直接法測抗原的所需儀器和試劑

    磷酸鹽緩沖鹽水(PBS):0.01mol/L,pH7.4熒光標記的抗體溶液:以0.01mol/L,pH7.4的PBS進行稀釋緩沖甘油:分析純無熒光的甘油9份+ pH9.2 0.2M碳酸鹽緩沖液1份配制搪瓷桶三只(內有0.01mol/L,pH7.4的PBS 1500ml)有蓋搪瓷盒一只(內鋪一層浸濕的

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    免疫熒光技術直接法測抗原實驗步驟

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    將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。其優點是方法簡便、特異性高,非特異性熒光染色少。缺點是敏感性偏低;而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。

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