GFP抗體|GFP抗體檢測GFP、EGFP、YFP、EYFP、CFP抗體
檢測GFP、EGFP、YFP、EYFP、CFP的GFP抗體GFP是綠色螢光蛋白（Green Fluorescent Protein）的簡稱，由238個氨基酸殘基組成。GFP蛋白質最早是由下村脩等人在1962年在一種學名Aequorea victoria的水母中發現。其基因所產生的蛋白質，在藍色波長范圍的光線激發下，會發出綠色螢光。GFP或其突變體EGFP標簽系統等被廣泛用于基因表達效率的檢測，以及和目的蛋白融合表達用于檢測目的蛋白的表達和分布。我們都知道GFP抗體能應用于GFP的表達檢測、純化以及定位分析。那么該如何檢測GFP其他的一些突變體，如EGFP、YFP、EYFP、CFP的表達和定位呢？我們來看一下GFP標簽與其它突變體標簽的關系。YFP（Yellow Fluorescent Protein）是黃色熒光蛋白，其序列與GFP基本相同。YFP就是把Thr203以Tyr取代，這樣的GFP不發出綠色熒光，而發出較長波長的黃色熒光......閱讀全文
T克隆綠色熒光蛋白（GFP）基因實驗
【原理】經TaqDNA聚合酶擴增后的PCR產物末端都帶有單個A。正是基于這一原理，pGEM-T質粒經EcoRV切成平端后，在開口端加上一個T制成T載體，一方面避免了自身環化，另一方面由于T-A互補，從而提高了T載體與PCR產物之間的連接效率。由于T-A克隆只需純化PCR產物，因而操作較為簡便。pGE
亞細胞定位的GFP融合蛋白表達法
GFP是綠色熒光蛋白，在掃描共聚焦顯微鏡的激光照射下會發出綠色熒光，從而可以精確地定位蛋白質的位置。綠色螢光蛋白（GFP）是一個由約238個氨基酸組成的蛋白質，從藍光到紫外線都能使其激發，發出綠色熒光。通過基因工程技術，綠色螢光蛋白(GFP)基因能轉進不同物種的基因組，在后代中持續表達，并且能根
綠色熒光蛋白(GFP)標記亞細胞定位
一、原理利用綠色熒光蛋白(GFP)來示蹤胞內蛋白的技術。利用GFP融合蛋白技術來進行活細胞定位研究是目前較為通行的一種方法，在光鏡水平進行研究，不需要制樣，沒有非特異性標記的影響。并且GFP的分子量為27kD，經激光掃描共聚集顯微鏡激光照射后，可產生一種綠色熒光，從而對蛋白質進行精確定位。激光掃描共
GFPTrap如何設計成功的IP實驗？
借助Chromotek公司GFP-Trap如何設計成功的IP實驗？How to plan an immunoprecipitation of your GFP-fusion protein when using the ChromoTek GFP-Trap?PreambleThis document
生物大分子相互作用檢測技術新進展
熒光共振能量轉移 (fluorescence resonance energy transfer，FRET)，是指能量從一種受激發的熒光基團 (fluorophore)以非輻射的方式轉移到另一種熒光基團的物理現象。FRET的能量轉移效率是兩個熒光基團間距離的函數，并對此距離十分敏感，它的有效
基因槍轟擊洋蔥表皮觀察GFP瞬時表達
實驗試劑高滲培養液(MS無機鹽、40g/L甘露醇)，高滲固體培養基(MS無機鹽、40g/L甘露醇、0.7% agar)，無水乙醇，無菌去離子水，12.5 M CaCl2 ，0.1 M亞精胺，等滲培養基(MS培養基)實驗設備高速離心機，1.5 ml Ep管，渦旋器，超凈臺，基因槍，氣瓶，激光共聚焦顯微
真核表達載體pcDNA3.1GFP的構建
【原理】引物中設計入限制酶位點：由于PCR引物的5'末端可以增加一些非互補堿基，因此可以在兩引物的5'末端設計單限制酶或雙限制酶切位點。這樣得到的PCR產物用限制酶消化產生粘性末端，即可與有互補粘端的載體DNA重組。這種克隆方法效率較高，且當兩引物中設計不同酶切位點時，可有效地定向克
激光共聚焦顯微鏡觀察GFP定位
實驗概要本實驗介紹了用激光共聚焦顯微鏡觀察GFP在轉基因植物中定位的技術。實驗步驟1. 將構建好的目的基因與GFP(綠色熒光蛋白)的植物融合表達載體，通過農桿菌介導法轉化野生型擬南芥，獲得轉基因株系；2. 獲得的轉基因株系制作切片:轉基因株系植株的根尖用手術刀片切下，放入事先滴有磷酸緩沖液的載玻片上
基因槍轟擊洋蔥表皮觀察GFP瞬時表達
實驗概要本實驗在構建了OsAGAP瞬時表達載體的基礎上，采用基因槍轟擊洋蔥表皮觀察了GFP的瞬時表達。主要試劑高滲培養液(MS無機鹽、40g/L甘露醇)，高滲固體培養基(MS無機鹽、40g/L甘露醇、0.7% agar)，無水乙醇，無菌去離子水，12.5 M CaCl2，0.1 M亞精胺，等滲培養基
腺病毒介導EGFP基因轉染神經干細胞
摘要： 本實驗從新生SD大鼠海馬組織中分離神經干細胞，并通過觀察攜帶EGFP基因的腺病毒（Ad/ EGFP）轉染NSCS后EGFP表達規律及轉染對NSCS的活力、增殖、分化等的影響，探討EGFP作為NSCS的示蹤標志物的可行性，為進一步的NSCS移植研究提供體外研究
GFP(綠色熒光蛋白基因)的免疫印跡1
[實驗原理]免疫印跡（Western blotting 或 Immunoblotting）一般由凝膠電泳、樣品的印跡和免疫學檢測三個部分組成。第一步是做SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳，使待測樣品中的蛋白質按分子量大小在凝膠中分成帶。第二步把凝膠中已分成條帶的蛋白質轉移到一種固相支持物上，用得最多的材料
GFP(綠色熒光蛋白基因)的免疫印跡2
第二部分：免疫印跡染色[儀器、材料與試劑](一)儀器與器具1．電泳儀(要求為大電流低電壓)2．電泳轉移槽及轉移夾3．水平搖床4．小塑料盒5．鑷子6．搪瓷盤(二)材料1．醋酸纖維膜2．濾紙3．一次性塑料手套(三)試劑1．轉移電泳緩沖液25mmo1／L Tris，192mmo1／L 甘氨酸，20％甲醇，
阿霉素的熒光能直接用于活體成像嗎
阿霉素的熒光能直接用于活體成像活體熒光成像一般有三種標記方法：熒光蛋白標記、熒光染料標記以及量子點標記。熒光蛋白適用于標記腫瘤細胞、病毒、基因等。通常使用GFP/EGFP/RFP等。熒光染料常用Cy3,Cy5以及Cy7。可以標記抗體、多肽、小分子藥物。量子點標記是一種新的標記方法，
何為熒光共振能量轉移技術
一、FRET技術基本原理熒光共振能量轉移是指兩個熒光發色基團在足夠靠近時，當供體分子吸收一定頻率的光子后被激發到更高的電子能態，在該電子回到基態前，通過偶極子相互作用，實現了能量向鄰近的受體分子轉移（即發生能量共振轉移）。FRET是一種非輻射能量躍遷，通過分子間的電偶極相互作用，將供體激發態能量轉移
活體動物體內生物發光和熒光成像技術基礎原理與應用四
二、活體動物熒光成像技術?（一）技術原理1．標記原理活體熒光成像技術主要有三種標記方法。（1）熒光蛋白標記：熒光蛋白適用于標記細胞、病毒、基因等，通常使用的是GFP、EGFP、RFP（DsRed）等；（2）熒光染料標記：熒光染料標記和體外標記方法相同，常用的有Cy3、Cy5、Cy5.5及Cy7，可以
通過SpectraMax－Paradigm微孔板檢測平臺和Tune技術可自動掃...
通過SpectraMax Paradigm微孔板檢測平臺和Tune技術可自動掃描熒光蛋白分子來確定其最佳波長Molecular ?Devices公司基于SpectraMax ?Paradigm? ?多功能微孔板檢測平臺的基礎上推出了一款使用濾光片作為其單色器，但又可隨意調節其檢測波長的Tune卡盒，
方案8－用－FRET－法分析體內蛋白質的相互作用實驗
實驗材料a-GFP 抗體編碼 CFP 和 YFP 的 DNA酵母細胞株系試劑、試劑盒分子生物學試劑合成的完全液體培養基酵母操作試劑編碼目標內源蛋白的 DNA 片段儀器、耗材濾光鏡裝置圖像分析軟件顯微鏡設備分子生物學和酵母操作用的標準設備實驗步驟一、實驗設計因為體內 FRET 實驗的復雜性，要獲得有效
新型“化骨綿掌”——納米級細胞蛋白質水平調控平臺
萊斯大學的化學和生物分子工程師Laura Segatori師從雙功能識別系統“NanoDeg”創始人Lara Pferdehirt博士（本科）和Wenting Zhao博士（研究生）。該系統允許操作者靶向細胞特定蛋白質，通過加速蛋白水解，控制靶蛋白翻譯后的水平，嚴格調節它們的降解。 這種“即插
高校實驗室如何去觀察綠色熒光蛋白GFP？
綠色熒光蛋白是一類存在于包括水母、水螅和珊瑚等腔腸動物體內的生物發光蛋白，當受到紫外或藍光激發時，發射綠色熒光。其特點在于：它產生熒光無需底物或輔因子，發色團是其蛋白質一級序列固有的來源于水母的氨基酸殘基組成。水母的綠色熒光蛋白很穩定，無種屬限制，已在多種動植物細胞中表達成功并產生熒光。GFP 的熒
綠色熒光蛋白（GFP）在科學研究上的應用
綠色熒光蛋白(greenfluorescentprotein，簡稱GFP)bs-2194P是一種能在藍色波長光線激發下發出熒光的特殊蛋白質，正是這種神奇的性質，讓它成為當今生物化學領域最有力的工具之一，被稱為“生物北斗”。GFP在科學研究上有著驚人的用途，因為它能夠使我們直接看到細胞內部的運動、分布
正置熒光顯微鏡的技術指標
1全電動正置熒光顯微鏡。具有明場,暗場,熒光,DIC觀察附件2鹵素燈透射光照明,長效熒光光源3物鏡5個,熒光物鏡5X,平場復消色差10X0.45，20X0.8，40X1.2水鏡，100X1.4油鏡,目鏡10X234濾光片8套dapi，CFP YFP GFP RFP cy3 cy5,cfp-yfp
FluorCam多光譜熒光成像技術介紹
FluorCam多光譜熒光成像系統作為FluorCam葉綠素熒光成像系統的最高級型號，是目前唯一有能力實現了一臺儀器上同時完成葉綠素熒光、UV-MCF多光譜熒光、NDVI歸一化植被指數以及GFP、YFP、BFP、RFP、CFP、DAPI等熒光蛋白與熒光染料的成像分析功能。同時也可以加裝RGB真彩成像
熒光探針研究獲進展－實現單一波長激發雙色熒光成像
近日，中國科學院深圳先進技術研究院副研究員儲軍主持研發的新型大斯托克斯位移熒光蛋白取得突破，實現了在小鼠腦內單一波長激發雙色熒光成像和高靈敏的生物發光成像。該工作以A bright cyan-excitable orange fluorescent protein facilitatesdual
綠色熒光蛋白融合技術在激素類興奮劑檢測中的應用
實驗方法原理重組人生長激素（rhGH）與胰島素生長因子-1（ICF-Ⅰ）是目前運動員濫用嚴而又難以檢測的內源性激素類興奮劑。以IGF-Ⅰ作為目標分析物，利用分子生物學方法構建綠色熒光蛋白（GFP）與IGF-Ⅰ的融合蛋白GFP-IGF。GFP是目前應用廣泛的一種生物報告分子，具有穩定、無毒害、無需底物
基因序列能被快速測定和配對生產高親和納米抗體
抗體是一種由免疫系統釋放的防御性蛋白質，用來識別和抵御入侵者，此外，它們也是生物學和醫學中最有用的工具，比如用于分子標記研究或破壞病變細胞等。 納米抗體也能完成相同的任務，其瘦小身軀更易到達大分子禁區，因而顯出更誘人的前景，但科學家們缺少有效方法去識別它們。這一難題被美國洛克菲勒大學的研究人員
亞細胞定位用熒光顯微鏡能看到嗎
目前進行亞細胞定位研究，提取擬南芥(Arabidopsis thaliana)(Arabidopsis thaliana)葉肉原生質體進行PEG轉化。研究目標采用GFP/YFP融合蛋白，但是在LSM710觀察時，葉綠體有很明顯的背景，盡管有些細胞是明顯看到了GFP熒光，遠遠強于葉綠體背景，但是拍的照
exFoxp3－Th17細胞對自身免疫關節炎的作用機制研究（一）
“我是誰?我從哪里來?我要到哪里去？” 是柏拉圖提出的經典哲學三大問，小編每天早上起床前都要用這個問題叫醒我沉睡的靈魂。在本期帶來的經典文獻回顧中，請跟隨本文作者一起聽一聽ex Foxp3 TH17細胞的深刻哲學獨白吧！一、故事背景自身免疫性疾病通常由調節性T細胞（Treg細胞）和產生干擾素17的輔
目的基因在真核系統的表達及細胞內的定位實驗—熒光法
實驗方法原理綠色熒光蛋白（Green fluorecent protein，GFP）最早是在海洋生物水母（Aequorea victoria）中發現的。GFP 蛋白的多肽鏈中含有特殊的生色團結構，可在紫外光源下發出穩定的綠色熒光，而且這種熒光發射無需外加輔助因子或進行任何特殊處理。GFP 標記分子最
GFP在大腸桿菌中的誘導表達及超聲破碎抽提
實驗概要本實驗介紹了GFP在大腸桿菌中的誘導表達和細菌蛋白的超聲破碎抽提原理及操作步驟等。實驗原理把含有外源基因的表達載體轉化的大腸桿菌在有相應抗菌素和誘導物的條件下培養，可以誘導外源蛋白在大腸桿菌中表達。利用溶菌酶、反復凍融或超聲波破碎的方法將誘導培養的細菌的細胞壁破碎后，可使那些可溶性的外源蛋白
轉錄因子Sp9參與神經紋狀體蒼白球發育過程
轉錄因子Sp9參與神經紋狀體蒼白球發育過程 研究人員發現鋅指轉錄因子——Sp9，在LGE祖細胞中廣泛表達，對維持有絲分裂期后的紋狀體蒼白球MSNs至關重要，為我們理解神經元發育過程提供了新的證據。 研究背景 紋狀體是基地神經節的重要組成部分，是一類中型多棘神經元（MSNs）。