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  • 發布時間:2020-07-27 10:47 原文鏈接: TSS法快速轉化大腸桿菌

    A.過夜培養物轉種后27拚2度快搖約205hrs至O.D 值為0.3 左右。

    B.取1ml菌液離心收菌,加入0.1ml 冰浴的1 ′TSS 液輕輕吸打懸起細胞。(可以放-70 攝氏度凍存半年)B 、可以取0.1ml 菌液加入0.1ml 冰浴的2 ′TSS 混勻,該方法只適于做質粒轉化,如做連接產物轉化請按2A做。

    C.加100pg-10ngDNA 混勻。冰浴10min ,室溫放置10分鐘再次冰浴10mins.

    D.加1ml LB,37攝氏度1 小時。

    E.涂板。轉化效率106-108 對于DH52,C600 ,等轉化效率在107-108 以上)。 快速鑒定插入外源片段的克隆


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