Science|為腺病毒載體疫苗設計提供新策略

　　Science | 為腺病毒載體疫苗設計提供新策略——黏膜相關恒定T（MAIT）細胞激活顯著增強腺病毒載體誘導的T細胞反應

　　黏膜相關恒定T（MAIT）細胞是一類非常規的T細胞，可以識別微生物衍生的維生素B2生物合成代謝產物，如5-(2-氧代氧亞丙基氨基)-6-(d-核糖胺基) 尿嘧啶（5-OP-RU）【1】。除此之外，MAIT細胞也可以被細胞因子激活從而對不合成維生素B2的病毒作出反應。已有研究表明體內的MAIT細胞能夠對流感病毒作出反應以放大早期的局部免疫應答，并能夠有效防止致命感染【2】。因此，MAIT細胞增強早期免疫反應的能力可能在病毒載體疫苗免疫原性方面發揮關鍵作用。

　　為了驗證這一猜想，近日，牛津大學Paul Klenerman團隊在Science上在線發表了題為MAIT cell activation augments adenovirus vector vaccine immunogenicity

　　的研究論文，發現腺病毒載體可以通過激活MAIT細胞，進而增強T細胞反應，該發現表明MAIT細胞激活可以增強腺病毒載體的免疫原性，并對腺病毒載體疫苗的設計提供了一定的策略。

　　研究人員首先確定MAIT細胞是否對腺病毒有反應，在體外分別用Ad5和ChAdOx1載體刺激人外周血單核細胞（PBMCs），發現ChAdOx1載體能以劑量依賴的方式誘導MAIT細胞的CD69、GzmB和IFN-γ上調，但C類腺病毒載體如Ad5等載體則對MAIT細胞的激活很差；將ChAdOx1載體或基于ChAdOx1載體的腦膜炎候選疫苗肌肉注射至小鼠體內，均能誘導淋巴結和肝臟中的MAIT細胞CD69和GzmB明顯上調，Ad5載體對MAIT細胞的激活仍然很弱。

　　繼續探究體內MAIT激活相關的信號通路，研究人員對MAIT細胞進行轉錄組測序，發現多個I型干擾素、IL-1家族和IL-12家族通路相關基因顯著上調，接種了ChAdOx1載體的志愿者、小鼠、或是體外刺激PBMC，MAIT細胞上調的通路相似，同時，體外抑制I型干擾素通路、或封阻IL-18以及IL-12均能減少MAIT細胞的激活程度。進一步探究這些信號的來源，研究人員檢測了ChAdOx1載體主要感染的細胞，CD123+ 漿細胞樣樹突狀細胞（pDC）和CD14+

　　單核細胞，刪除CD123+ pDC能夠減少幾乎全部的IFN-α，刪除CD14+ 單核細胞則主要減少IL-18的分泌，兩者均能顯著減弱MAIT細胞的激活。

　　進一步，研究人員發現IFN-α/β和IL-18能在PBMC培養的條件下誘導MAIT細胞分泌IFN-γ，在CD8+

　　T細胞單獨培養的條件下卻不行（約75%的MAIT細胞表達CD8），但加入CD14+

　　單核細胞或IFN-α刺激后CD14+ 單核細胞上清，則可以挽救MAIT細胞的IFN-γ分泌，同時也能通過增加CD14+ 單核細胞分泌的TNF，進而促進對MAIT細胞的激活作用，并用TNF封阻抗體進行了確認。這些數據共同表明pDC分泌的IFN-α直接激活MAIT細胞或，通過間接激活單核細胞進而通過單核細胞分泌的TNF和IL-18激活MAIT細胞。研究人員隨后用ChAdOx1免疫多個小鼠模型（Il18rap-/-、Ifnar-/-和Tnfrsf1a-/-Tnfrsf1b-/-），對MAIT細胞進行轉錄組分析，發現Cd69、Cxcl10、Cxcl11、Ccl5和Gzmb等重要的激活基因表達明顯受到影響，表明TNF、IL-18和I型干擾素通路在腺病毒誘導的MAIT細胞激活方案至關重要。

　　最后，研究人員發現志愿者接種第二針后，T細胞分泌IFN-γ顯著增加，MAIT細胞激活程度也明顯上調。為了證明這之間的因果關系，研究人員用表達HCV抗原的ChAdOx1載體疫苗以及表達SARS-CoV-2抗原的ChAdOx1載體疫苗（ChAdOx1-nCoV-19）免疫MAIT細胞缺陷（Mr1-/-）的小鼠，結果顯示MAIT細胞缺陷能夠顯著抑制CD8+

　　T（而不是CD4+

　　T）細胞反應，在表達OVA抗原的ChAd63載體免疫的MAIT細胞缺陷的小鼠中也得到了相似的結果。

　　總的來說，本研究發現

　　ChAdOx1載體能夠明顯激活MAIT細胞，該過程需要pDC分泌的IFN-α和單核細胞分泌的IL-18的誘導。此外，IFN-α誘導的單核細胞分泌的TNF也是一個關鍵的信號通路。重要的是，MAIT細胞的激活與志愿者的腺病毒載體疫苗誘導的T細胞反應呈正相關，MAIT細胞缺失的小鼠對多種疫苗編碼的抗原表現出CD8+

　　T細胞反應受損。因此，MAIT細胞可以增強腺病毒載體的免疫原性，為疫苗的設計提供了一定的策略。