一、原理
大腸桿菌可以利用噬菌體為媒介，將供體細胞DNA轉移給受體細胞，從而使受體細胞的基因型和表現型發生改變，這一過程稱為轉導。由類似噬菌體P1和P2介導的轉導，能夠轉移供體染色體上任何一個基因，稱為普遍性轉導；由λ噬菌體等為媒介的轉導，只能轉導半乳糖發酵基因等少數基因，稱為局限性轉導。
P1噬菌體的DNA分子量為5.8×107D，大約相當于大腸桿菌染色體的2％。在轉導過程中，它的外殼中幾乎只包裝著寄主菌的染色體片斷。假如大腸桿菌染色體的全長是100分鐘，則P噬菌體外殼中包裝的DNA片段最多可以帶有相隔兩分鐘范圍內的寄主基因。可以想象，包裝時寄主染色體的斷裂是隨機的，兩個基因相隔愈近，共轉導的機率愈高。如果兩個基因密切連鎖，共轉導的頻率將接近1；相距很遠，其共轉導頻率就接近或等于0。共轉導頻率（X）＝(1-d/L)3,d為以分鐘計算的轉導DNA的長度。利用這種關系可以進行兩個距離很近的基因的定位，也可用來進行基因精細結構分析。位置非常接近的一系列擬等位突變位點也可以通過其轉導測得它們的排列順序。
由于轉導的頻率一般很低，大約每個感染細胞只有10-4－10-5。因此常用的方法是選取某一選擇性標記的轉導子，然后測定另一基因的出現頻率，根據公式計算，確定它們之間的連鎖關系。
二、目的
了解大腸桿菌普遍性轉導的現象、原理和普遍性轉導在細菌基因精確定位中的作用，掌握普遍性轉導和基因定位的基本方法。
三、材料
1、受體菌：CSH1F- trp lacZ thi strA
2、供體菌：FD1009Hfr sup tsx。
3、噬菌體P1 cml, clr1000裂解液(109ml)
4、噬菌體T6裂解液
5、生理鹽水稀釋管(4.5ml／支)
6、0.1mol/L CaCl2
7、LB液體(5ml/支)、半固體(3ml/支)和固體培養基
8、氯仿
9、乳糖色氨酸基本培養基、葡萄糖基本培養基、葡萄糖色氨酸基本培養基
10、培養皿、三角瓶、試管、離心機、滅菌牙簽、吸管、接種環、酒精燈。
四、實驗步驟
（一）Pl cml, clr100裂解液的制備
1、第一天，接種供體菌株于LB液體培養基中，30℃培養過夜。
2、第二天，將供體菌液用LB培養液按1：5稀釋，30℃繼續培養2小時。然后吸取0.2ml供體菌和0.1ml、10-2的噬菌體原液（滴定度為109/ml左右，細菌和噬菌體數目比大約為20：1）與3ml半固體LB培養基混勻后，倒在LB固體培養基上，凝固后37℃培養過夜。每組做3－4皿。其中有一皿不加噬菌體作為對照。