分析測試百科網訊 2017年5月8日,由國際純粹與應用化學聯合會(IUPAC)和中國化學會(CCS)主辦的2017 年國際分析科學大會(ICAS 2017)光譜分析分會場的報告繼續進行。今天,5位學者向與會者分享了研究成果。
湖南大學化學化工學院博士 應站明
湖南大學化學化工學院博士應站明的報告是“基因編碼熒光RNA傳感器用于生物體細胞中微RNA的成像”。研究團隊開發了一種新型的基因編碼RNA傳感器,用于使用結合硫代羅丹明并將其與共軛接觸猝滅劑分離的點燃RNA適體進行活體腫瘤細胞中MiRs的熒光成像。基于分子信標的結構轉換機制,表明RNA傳感器當其莖環響應基序與靶標MiR雜交時,激活了由磺酰羅丹明猝滅劑綴合物的高對比度熒光。RNA傳感器可以在腫瘤細胞中設計的tRNA支架內穩定表達,并向目標MiR提供發光反應。團隊還通過RNA傳感器與GFP共表達實現了雙重發射,比例成像的RNA傳感器,可以對活細胞中的MiR靶進行定量研究。該設計可能為開發用于RNA成像應用的強大、靈敏的點亮RNA傳感器提供了一個新的范例。
光譜分析分會場主持人,法國里昂大學化學實驗室教授 Jens Hasserodt
法國里昂大學化學實驗室教授Jens Hasserodt的報告是“標記活細胞能夠表達催化活性酶”。研究團隊提出一系列可溶性熒光探針釋放出強烈熒光的沉淀物(“ELF97醇”),從而在細胞內保留信號,并避免在FACS分析之前的潛伏期間其他細胞的交叉污染,以獲得最大的選擇保真度。在過去一年中產生的結果包括(a)通過FACS分析證實有針對性的酶活性的細胞的定量標記,(b)原核生物和真核生物同樣具有良好的標記,(c)探針的特異性及其穿透細胞的能力并在細胞中產生強烈的熒光信號,(d)擴增從肽酶到糖苷酶的監測效率。
西南大學副教授 甄淑君
西南大學副教授甄淑君的報告是“石墨烯氧化物擴增熒光各向異性敏感生化分析”。熒光各向異性(FA)是一種有吸引力,均勻和可重現的方法。然而,傳統的FA測定顯示出相對較低的分子檢測靈敏度,因為廣泛的分子量太小而不能產生FA值的可檢測的變化。為了解決這個限制,其團隊使用石墨烯氧化物(GO)作為FA放大器來檢測各種目標。通過在GO表面間接固定熒光團標記的探針來檢測DNA、腺苷和凝血酶,進一步開發了一種提高準確度的新方法。為了進一步提高靈敏度,團隊開發了一種外切核酸酶III(Exo III)輔助GO擴增FA策略,用于檢測蓖麻毒素B鏈。團隊未來的工作將著重于構建無酶信號放大系統進行敏感生化分析。
清華大學化學系教授童愛軍的報告由是“基于聚集誘導發射的熒光發光和比例傳感器水楊醛腙的性質”,由其學生代讀。2009年,該團隊報道了一種可旋轉的N-N單鍵結構的水楊醛腙(SAH)衍生物,其顯示出具有不同取代的多種熒光顏料。由于烯醇和酮互變異構,熒光源于分子內旋轉的限制以及激發態分子內質子轉移(ESIPT)。這兩個羥基對于AIE和ESIPT方法是必不可少的。基于這樣的SAH分子,開發了設計傳感器和功能材料的通用方法。例如,具有AIE和ESIPT特征的紅色熒光團通過將電子給體二乙胺和電子受體的馬來腈基團連接到水楊醛基上來合理地設計和便利地合成。用酯酶反應性乙酰氧基進一步取代羥基,開發了熒光發光探針,用于感染和成像活細胞線粒體中酯酶。開發了基于羥基黃酮和羥基苯甲醛腙一步反應的比例熒光化學傳感器,用于檢測水溶液中的Al3+和活細胞中Al3+的成像。
山東師范大學副教授 王栩
山東師范大學副教授 王栩的報告是“雙光子熒光探針通過映射過氧亞硝酸鹽的波動顯示藥物誘導的肝毒性”。近年來,熒光成像在直觀可視化和時間和空間分辨率方面具有突出的性能。報告人利用反應性過氧亞硝酸鹽(ONOO-)作為生物標志物,提出了一種雙光子熒光探針TP-KA,對ONOO-具有快速反應,高特異性和靈敏度,研究藥物(對乙酰氨基酚和托卡朋)相關肝臟損傷和N-乙酰半胱氨酸(NAC)的補救作用。在TP-KA的支持下,研究團隊獲得了在活細胞和小鼠藥物攻擊期間ONOO-上調的直接和可視證據,伴隨著肝組織損傷和酪氨酸硝化。這些研究結果表明,ONOO-是一種良好和適當的肝毒性生物標志物,對乙酰氨基酚和托卡朋可能需要亞硝化應激來發揮其毒性作用。此外,TP-KA可用作預先檢測藥物誘導的生物體損傷并研究解毒劑的作用的有力工具。
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