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  • 發布時間:2020-08-17 08:59 原文鏈接: AzurebiosystemsWesternBlot歸一化實驗注意事項

      上樣量質控

      精確對比不同泳道的條帶強度。注意事項

      當進行定量western blot時,需要對比不同泳道內條帶的強度值,前提要對上樣量質控,校正偏差,確保每個泳道上樣量一致。

      通常研究人員通過檢測在任何情況下表達量一致的看家/結構蛋白量進行校正。

      對于化學發光檢測,檢測兩種蛋白時,需要對印跡膜進行剝離和二次孵育。

      熒光western blot檢測的一大優勢就是可以同時檢測兩種蛋白,無需剝離和二次孵育操作,即可實現上樣量質控。

      熒光檢測可同時進行上樣量質控,一張印跡膜檢測兩種顏色。

      進行此實驗,一抗必須來源于兩個不同物種,同時二抗分別對應其物種,并標記不同的熒光標記基團。


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