冰凍切片免疫熒光
實驗概要冰凍切片免疫熒光實驗原理抗原抗體結合主要試劑固定液、梯度蔗糖、磷酸鹽緩沖液、封閉液、一抗、熒光標記的二抗、DAPI、熒光抗淬滅封片劑主要設備冰凍切片機、熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡實驗材料組織切片實驗步驟切片1.提取新鮮組織置于4%多聚甲醛中固定；2.梯度蔗糖脫水：10%-20%-30%；3.冰凍包埋劑包埋并切片，切片厚度4~10μm;4.-20℃保存切片并盡快染色以防止蛋白降解； 染色1.冰凍切片取出復溫至室溫，或用烤片機烤干切片表面水分；2.丙酮或多聚甲醛固定5-10min;3.PBST洗5 minx3次; 4.（可選）抗原修復可選；5.（可選）0.1% Triton-100X透膜；4.加山羊血清封閉液或3%BSA封閉30min;5.棄去封閉液，滴加相應抗體（1%BSA稀釋），保濕盒中4℃過夜；6.PBST洗 5 minx3次; 7.滴加二抗，避光，37℃，1-2 h；8.PBS洗 5 minx3......閱讀全文
冰凍切片免疫熒光
實驗概要冰凍切片免疫熒光實驗原理抗原抗體結合主要試劑固定液、梯度蔗糖、磷酸鹽緩沖液、封閉液、一抗、熒光標記的二抗、DAPI、熒光抗淬滅封片劑主要設備冰凍切片機、熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡實驗材料組織切片實驗步驟切片1.提取新鮮組織置于4%多聚甲醛中固定；2.梯度蔗糖脫水：10%-20%-30%；3
冰凍切片免疫熒光
實驗原理抗原抗體結合主要試劑固定液、梯度蔗糖、磷酸鹽緩沖液、封閉液、一抗、熒光標記的二抗、DAPI、熒光抗淬滅封片劑主要設備冰凍切片機、熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡實驗材料組織切片實驗步驟切片提取新鮮組織置于4%多聚甲醛中固定；2.梯度蔗糖脫水：10%-20%-30%；3.冰凍包埋劑包埋并切片，切片
組織免疫熒光是用石蠟切片還是冰凍切片
二者應該都是可以的，具體要看自身的實驗條件哪個操作更方便以及抗體的性質。看你的實驗要求，冰凍片要求較高（低溫環境，液氮，冰凍切片機，OCT包埋劑等等），石蠟片的制作就比較簡單，試劑也較便宜。另外看你購買的抗體適用于哪種片子免疫組化的話，一般大都使用石蠟切片。免疫熒光染色的話，都可以的，冰凍切片比較容
組織切片的免疫金標記
實驗方法原理利用膠體金在堿性條件下帶負電荷的性質，與蛋白質分子的正電荷基團籍靜電吸引而形成牢固結合。除抗體外，膠體金還可與其它多種生物大分子，如SPA、PHA、ConA等結合。實驗材料組織樣品試劑、試劑盒免疫金標記物儀器、耗材培養箱顯微鏡實驗步驟1. ?將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒，由冰凍切片
組織切片的免疫金標記
實驗方法原理 利用膠體金在堿性條件下帶負電荷的性質，與蛋白質分子的正電荷基團籍靜電吸引而形成牢固結合。除抗體外，膠體金還可與其它多種生物大分子，如SPA、PHA、ConA等結合。實驗材料 組織樣品試劑、試劑盒 免疫金標記物儀器、耗材 培養箱顯微鏡實驗步驟 1. ?將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒，
石蠟切片免疫組化染色
實驗概要掌握石蠟切片免疫組化染色實驗中載玻片的處理，常用酶消化，抗原熱修復及基本實驗步驟。實驗步驟1. 載玻片的處理 ??? 1) APES：現用現配。將洗凈的玻片放入以1:50比例丙酮稀釋的APES中，停留20~30秒鐘，取出稍停片刻，再入純丙酮溶液或蒸餾水中涮去未結合的APES，置通風櫥
石蠟切片免疫組化實驗
實驗方法原理 根據聚合酶技術把辣根過氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子結合在多聚酶上形成多聚物分子,其與待檢的抗原特異性的結合后，加入底物顯色。實驗材料 石蠟切試劑、試劑盒 PBS檸檬酸鹽緩沖液蒸餾水增強劑酶標抗鼠 兔聚合物蘇木素酒精二甲苯樹膠鹽酸二氨基聯苯胺儀器、耗材 烘箱微波盒塑料切片架顯微鏡膠頭
石蠟切片免疫組化實驗
即用型(Envision)快速酶免疫組化二步法免疫組化可應用于：（1）確定組織細胞內抗原 (多肽和蛋白質)，對其進行定位、定性及定量的研究；（2）診斷異常細胞，指導治療。實驗方法原理根據聚合酶技術把辣根過氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子結合在多聚酶上形成多聚物分子,其與待檢的抗原特異性的結合后，加入
冰凍切片免疫熒光實驗步驟
1.組織用4%多聚甲醛固定6-8小時，轉至20%蔗糖溶液至組織沉底。2.冰凍切片8-10μm，推薦瑞沃德冷凍切片機，溫度穩定，切片質量高。室溫放置30分鐘以上防脫片，-20℃保存。從冰箱拿出的冰凍切片在室溫放置30分鐘以上再進行免疫熒光。3.1xPBS洗3次，每次3-5分鐘。4.用2%BSA室溫或3
石蠟切片免疫組化染色
實驗概要掌握石蠟切片免疫組化染色實驗中載玻片的處理，常用酶消化，抗原熱修復及基本實驗步驟。實驗步驟1. 載玻片的處理 ??? 1) APES：現用現配。將洗凈的玻片放入以1:50比例丙酮稀釋的APES中，停留20~30秒鐘，取出稍停片刻，再入純丙酮溶液或蒸餾水中涮去未結合的APES，置通風櫥
石蠟切片免疫組化步驟
實驗概要石蠟切片免疫組織化學染色主要試劑染色缸；染色架；保濕盒；晾片盤；微量移液器；0.2MPBS，乙醇，二甲苯，BSA，中性樹膠等實驗步驟1.?????石蠟切片放置在60℃恒溫箱中烘烤120分鐘；2.?????脫蠟和水化：二甲苯(10min)→二甲苯(10min)→無水乙醇(5min×2次)→95
冰凍切片免疫熒光實驗步驟
1.組織用4%多聚甲醛固定6-8小時，轉至20%蔗糖溶液至組織沉底。2.冰凍切片8-10μm，推薦瑞沃德冷凍切片機，溫度穩定，切片質量高。室溫放置30分鐘以上防脫片，-20℃保存。從冰箱拿出的冰凍切片在室溫放置30分鐘以上再進行免疫熒光。3.1xPBS洗3次，每次3-5分鐘。4.用2%BSA室溫或3
石蠟切片免疫組化實驗
即用型(Envision)快速酶免疫組化二步法 鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結SP法 卵白素-生物素-過氧化物酶復合物（ABC）法 鏈霉親和素—生物素—過氧化物酶復合物（SABC）法 ? ? ? ? ? ?
石蠟切片免疫組化染色步驟
1、載玻片的處理：抗原修復過程中，由于高溫、高壓、輻射等諸多因素的影響，極易造成脫片。為保證試驗的正常進行，可選用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI-9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等幾種試劑，對已清洗的載玻片進行處理。具體方法如下：1.1
石蠟切片免疫組化染色方法
1、載玻片的處理：抗原修復過程中，由于高溫、高壓、輻射等諸多因素的影響，極易造成脫片。為保證試驗的正常進行，可選用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI- 9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等幾種試劑，對已清洗的載玻片進行處理。具體方法如下：1.1
石蠟切片免疫組化實驗3
卵白素-生物素-過氧化物酶復合物（ABC）法實驗材料蠟塊切片試劑、試劑盒多聚甲醛蒸餾水蔗糖過氧化氫甲醇PBS酒精KPBS牛血清白蛋白疊氮納一抗二抗儀器、耗材冰箱顯微鏡燒杯實驗步驟1. ?4%多聚甲醛常規灌注固定，取材并置20%蔗糖溶液（4℃）中過夜。蠟塊制作。切片，貼片。0.01 M KPBS清洗5
石蠟切片免疫組化實驗步驟
脫蠟和水化1. 將切片依次浸入二甲苯Ⅰ10 min，二甲苯Ⅱ（10 min）。2. 再次浸入無水乙醇Ⅰ（5 min）-無水乙醇Ⅱ（5 min）-95%酒精（5 min）-80%酒精（5 min）-70%酒精（5 min），然后去離子水沖洗2次，每次2 min。 抗原修復?(可選)3. 將組織切片放入
石蠟切片免疫組化實驗2
鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結SP法實驗方法原理SP（streptavidin-perosidase）法，即鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結法。SP法是最常使用的方法。試劑、試劑盒二甲苯酒精PBS雙氧水枸櫞酸緩沖液羊血清工作液辣根過氧化物酶鏈霉素卵白素蘇木素DAB儀器、耗材冰箱顯微鏡燒杯玻璃缸
石蠟切片免疫組化實驗4
實驗方法原理SABC(Strept Avidin-Biotin Complex)法是一種顯示組織和細胞中抗原分布的簡便而敏感的免疫組化染色方法，是眾多免疫組織化學方法的一種。SABC法：一抗+ 生物素標記二抗+ 滴加試劑SABC（鏈霉卵白素+ 辣根酶標記生物素）+ 辣根酶底物顯色。目前常用的親和素從
石蠟切片免疫熒光如何消除自發熒光
可以用遠紅外波長的熒光范圍內的二抗，在此范圍內基本看不到自發熒光的信號；也可以用丙酮固定不用醛類物質。都可以減少自發熒光的產生
小鼠組織切片免疫組化實驗步驟
材料二甲苯 酒精（100％，95％） EDTA抗原修復工作液（pH8.0，稀釋50倍使用） 0.5M Tris-NaCl (TBS) pH7.4（稀釋10倍使用） DAB顯色液（臨用前配制：試劑盒A、B、C各50ul，于1ml水中混勻）。方法1.? 石蠟切片置60℃烘箱中烘烤過夜 2.?
免疫熒光操作步驟（漂片，冰凍切片）
實驗概要免疫熒光技術（Immunofluorescence technique ）又稱熒光抗體技術，是標記免疫技術中發展最早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合，利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定
石蠟切片免疫組織化學染色
主要試劑染色缸；染色架；保濕盒；晾片盤；微量移液器；0.2MPBS，乙醇，二甲苯，BSA，中性樹膠等實驗步驟1.?????石蠟切片放置在60℃恒溫箱中烘烤120分鐘；2.?????脫蠟和水化：二甲苯(10min)→二甲苯(10min)→無水乙醇(5min×2次)→95%乙醇(5min×2)→90%(
小鼠組織切片免疫組化實驗步驟
實驗概要免疫組化，是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應，即抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內抗原（多肽和蛋白質），對其進行定位、定性及定量的研究，稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學
免疫熒光操作步驟（漂片，冰凍切片）
實驗概要免疫熒光技術（Immunofluorescence technique ）又稱熒光抗體技術，是標記免疫技術中發展最早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合，利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定
小鼠組織切片免疫組化實驗步驟
實驗概要免疫組化，是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應，即抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內抗原（多肽和蛋白質），對其進行定位、定性及定量的研究，稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學
石蠟切片、冰凍切片及振動切片的區別
一、石蠟切片??? 把修好的蠟塊裝在旋轉切片機上，即可進行切片(section)。切片必須保持切片刀銳利，切片厚度通常為5～7um，也可根據染色需要切成不同厚度，一般不旋轉式切片機超過10um。切好的蠟帶，放人40℃左右的溫水中將蠟片展平。良好的切片應無刀痕、裂痕，切片厚度均一平整。切片如有上述
石蠟切片與冰凍切片
一、組織和細胞標本類型：（一） 組織標本類：1、 石蠟切片：組織形態保存好2、 冰凍切片：抗原性保存好（二）細胞標本類：1、組織印片 2、細胞培養片（細胞爬片） 3、細胞涂片二、組織取材1、腦組織和神經組織應采用灌注固定后，再進行后固定。2、組織取材注意事項：（1）標本新鮮：組織要求離體后30min
LSCM冷凍組織切片的免疫熒光標記
冷凍組織切片的免疫熒光標記?將冷凍組織切片從?-80℃?冰箱中取出，室溫放置?10 min，待切片回溫并干燥，浸于?PBS?中?10 min洗去OCT，可以無需?Triton?處理，即可進行免疫熒光抗體標記，操作步驟與培養細胞反應方法相同。反應在避光濕盒中進行，反應結束時用無熒光封固劑封片，4℃保存
組織切片的免疫熒光標記實驗
實驗材料 組織樣品試劑、試劑盒 PBS抗體儀器、耗材 玻片加濕盒實驗步驟 1. ?將濕紙巾鋪于載玻片盒底部做成加濕盒，由冰凍切片儀中取出載有切片的載玻片，放入玻片盒中（每邊放6片），或故濕盒中（載玻片勿相互接觸）。?2. ?待載玻片達室濕且未干時，鋪加PBS于切片上（勿溢出玻片）。?3. ?稀釋的第