什么是HPLC?
我們所有關于配件的討論.看起來似乎只適用于HPLC系統一使用我們所討論的配件進行的主要液體傳輸應用。
HPLC是高性能液體色譜系統(High Performance LiquidChromatography)的首字母縮寫。(很多人以為“P”是表示“壓力”,因為很多HPLC應用中的壓力確實很高。但是“p”其實是表示“性能”。
HPLC在1960年開始使用。這項技術使得分析師可以把由已知和未知成分組成的樣品分解為組成部分的級別,然后定量分析樣品中的每個組成部分。并且由干這項技術沒有破壞性,HPLC成為實驗室應用中用途極為廣泛的儀器之一。科學家們在使用HPLC系統分析過樣品后,還可以繼續對樣品進行其它測試。
通過將樣品放入作為流動相的液體化學蒸汽中實現分離。這液體化學蒸汽將樣品帶入特制的管道中,這個特制管道(管柱)填充有作為固定相的微型化學活性顆粒。在管柱內部,樣品與流動相和固定相均發生相互作用,并開始化學分離為它的組成部分。系統中的其它設備生成并記錄那些分離的樣品組成部分的分析數據。然后那些數據被記錄在一個被稱為色譜的圖表上。
HPLC系統由何組成?
在我們進一步展開討論之前必須首先了解標準HPLC系統的組成部分。
一個HPLC系統包括七個基本組成部分,每部分都具有重要的功能:
溶劑容器--溶劑容器用來裝流向系統的化學溶液。因為這種溶液流經整個分析過程我們稱之為流動相。
泵--泵將流動相從儲存池中抽出,并推動其流向系統其他部分。目前最常用的泵是雙活塞泵--可以在高壓狀態下保持穩定的流速。
噴射閥--噴射閥將樣品引入流動相。最常用的噴射閥是一種六端口、雙位置閥。這種類型的閥可以控制一定數量的樣品重復性地引入流動相通道,卻基本上不影響系統的其它部分。

典型噴射閥管件
管柱--通常被稱為日PLC系統的“心臟”,將管柱看成一種化學“過濾器”。如上文提到的那樣,管柱是具有特定長度和內徑并且通常充滿小顆粒的管道。這些顆粒通常有一層化學物質涂層,這種化學物質是設計用來與樣品成分發生相互作用。并提高分離的。通常情況下,這些顆粒(前面提到的固定相因為創門無法在系統中移動)一是直徑很小的硅土顆粒。并且通常是用硅十八烷(C18)化學性地粘結在這些顆粒的表面。有時不用硅土而是采用其它聚合材料如其它更專門的填充材料。同樣,除采用C18粘結在顆粒的表面之外,還可以使用更專門的分子粘結在基料上,進一步提高管柱中的分離程度。
檢測器--檢測器是用來在樣品成分隨流動相移動時,“觀察”在管柱中分離的樣品成分。最常用的檢測器透過一塊特殊的窗口(稱為流通池)發射一束紫外光。在樣品成分通過流通池時,穿過流通池的光線數量發生變化。檢測器的電子裝置就把這種透射光強度變化轉變成一個信號。
隨著技術費用的不斷下降,其它種類的檢測器更為常用。諸如質量分光計(MS)和核磁共振(NMR)檢測器之類的檢測器在很多實驗室越來越頻繁的使用起來。隨著更高級的檢測器可以應用在色譜上,HPLC--很多實驗室的核心設備--作為一種分析技術的使用正日益頻繁。
記錄儀--記錄儀將檢測器生成的信號翻譯成圖表,產生色譜圖。〔參看下面的信號一時間圖)

色譜樣圖
早期,這個裝置僅僅是一個帶狀記錄紙的記錄儀,帶有一個隨檢測器產生的信號而移動的筆。在以特定速度移動的紙上進行記錄。然后應該小心地切掉峰值,并就一定規模進行紙面加權,進而獲得半定量數據。現在,記錄儀裝置通常是一臺計算機,其上裝有設計軟件,不但可以翻譯檢測器信號,還可以對數據進行數字化處理。這就可以生成更多的再生性信息,使越來越小的樣品使用起來也很方便。