采用ISQ測定食品中的鄰苯二甲酸酯

1.前言

如今有一些不法商家在食品添加劑（起云劑，又名混濁劑、乳濁劑、增濁劑）中非法添加有毒有害成分鄰苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）的事件，造成極其惡劣的影響，導致一些使用了該商家生產的起云劑的一些食品間接受到污染，該事件引起了世界衛生組織以及我國政府的高度重視，目前國家質檢總局已經采取行動阻止這些有毒食品繼續流通，并且對一些食品進行召回銷毀，同時也會開展對食品添加劑和食品中鄰苯二甲酸酯（尤其是DEHP成分）的檢測。鄰苯二甲酸酯（phthalate acid esters, PAEs）是世界上生產量大，應用面廣的人工合成的有機化合物之一，是一類全球性的環境污染物，廣泛存在于空氣、水體、土壤及生物體內，該類化合物與我們的日常生活密切相關，可通過飲水、進食、皮膚接觸（化妝品）和呼吸進入人體，對人群健康產生不同程度的危害作用[1]。DEHP屬于鄰苯二甲酸酯的一種，是一種普遍用于塑膠材料的塑化劑和軟化劑，因其與塑料基質間未形成化學共價鍵，呈游離態，當接觸到所包裝食品中水、油脂等時，極易溶出，更遑論直接在食品添加劑中添加。吸入和食入DEHP后會引起呼吸急促和心率的加快,如大量被吸收后可能引起中央神經系統的紊亂和腸胃不適，如長期接觸，有生殖發育毒性，可能致癌、致畸[2]。在臺灣被確認為第四類毒性化學物質，為非食用物質，不得用于食品生產加工。本文在采用GB/T 21911-2008中樣品前處理的方法，介紹了用賽默飛世爾（Thermofisher）氣質聯用儀ISQ分析食品中的鄰苯二甲酸酯，旨在為該類物質的氣質檢測提供一套高效合理的解決方案。

2．實驗方法

2.1 試劑和儀器方法

賽默飛世爾氣質聯用儀(ISQ)，配置有Triplus三位一體的自動進樣器（液體進樣），色譜柱為TR-5MS(30m, 0.25mm, 0.25μm)。Trace GC Ultra氣相

進樣口溫度：250℃；

進樣模式：不分流進樣；0.8min開始分流，流速50ml/min

程序升溫：60℃(1min)-15℃/min-230℃ (1min)- 5℃/min-280℃ (4mins)

色譜柱：TR-5MS (30m, 0.25mm, 0.25μm)

柱流速：1mL/min 恒流模式；

ISQ質譜儀

具體條件如圖1：

2.2 樣品制備[3]

2.2.1 不含油脂的液體試樣

分別量取混合均勻的果汁液體試樣5.0ml（含有二氧化碳氣的試樣需先除去二氧化碳），加入正己烷2.0ml，振蕩1min，靜置分層（如有必要時鹽析或于4000r/min離心5min），取上清液進行GC-MS分析。

2.2.2含油脂試樣

分別稱取混合均勻含油脂試樣奶油0.5g（精確至0.1mg）于兩個具塞三角瓶中，加入20ml石油醚渦旋混合2min，靜置后提取石油醚層，再用石油醚重復洗滌三角瓶中的殘渣三次，每次10ml，合并提取液經無水硫酸鈉（10g）過濾，將濾液減壓濃縮至干，用乙酸乙酯：環己烷（體積比1:1）定容至10.0ml，渦旋混合2min，0.45μm濾膜過濾，濾液經凝膠滲透色譜裝置凈化，收集流出液，濃縮至2.0ml，進行GC-MS分析。

2.2.3空白試驗

本實驗中取正己烷作為空白，進行GC-MS分析

3．實驗結果與討論

3.1 色譜分離

由于鄰苯二甲酸酯類物質廣泛存在于溶劑及試劑瓶中，所以每次做樣一定要做溶劑對照，以便排除溶劑中的干擾效應。此外，由于16種鄰苯二甲酸酯的中很多組分的碎片離子相同，所以盡可能讓16種鄰苯二甲酸酯色譜分離，從而使定性定量更加準確。本實驗中選用的色譜條件可使16種化合物的有效分離，詳見圖2。

3.2 標準曲線及精密度

配制6個梯度濃度的的混標溶液，圖3為16種鄰苯二甲酸酯各個濃度點的線性方程，濃度設置分別為1ng/ml、5ng/ ml、10ng/ ml、 25ng/ ml、 50ng/ ml、100ng/ ml；各組分1ng/ml均能檢出，取5ng/ml的點作為各組分的最低定量限，R2均大于0.995，表明線性良好（圖3）。取5ng/ml的樣品重復進樣5次檢測精密度，最終各化合物的精密度在3.69-5.26%之間（表1），方法學驗證表明此方法穩定可靠。

3.3 樣品結果

本次實驗使用的不含油脂樣品為果汁，按照2.2.1的處理方法處理后，進樣，由于前處理過程中只用到正己烷，所以需要進正己烷做溶劑對照，以扣除溶劑中的鄰苯二甲酸酯類干擾物質。實中驗使用的含油脂樣品為奶油粉末香精，按照2.2.2的處理方法，得到基質樣品進行檢測。同時，將溶劑正己烷也按照2.2.2的處理方法得到溶劑對照，以扣除溶劑中的鄰苯二甲酸酯干擾。具體見圖4。從圖中可以看出，雖然果汁中能檢出DMP、DEP、DIBP、DBP、DEHP；奶油粉末香精中檢出DEP、DIBP、DBP、DEHP；但各峰峰面積均低于對應的標準曲線中5ng/ml的點，故產品合格。

4.結論

Thermo Fisher新款的ISQ單四級桿氣質聯用儀，擁有超高的抗污染能力和超高的靈敏度，本文即采用ISQ單四級桿氣質聯用儀檢測16種PAEs，方法簡便、高效、快速、準確、靈敏度高、實用性強。由于鄰苯二甲酸酯樣品的特殊性，其在塑料制品中的存在不可避免，所以在樣品采集以及處理過程中盡使用玻璃容器。并且盡可能的選擇干擾小的溶劑，從而使檢測結果更加準確。

5.參考文獻

[1]劉慧杰 舒為群. 鄰苯二甲酸酯類化合物的毒理學

效應及對人群健康的危害. 第三軍醫大學學報. 2004,

26(19):1778-1781

[2]上海煙草協會http://xh.sh-tobacco.com.cn/main/

ActionKnowledgeOut/getDetail?id=5436

[3]GB-T 21911-2001