在研究蛋白質的結構功能特點、作用方式過程中，有時還要通過突變、加抑制劑等手段破壞蛋白質間的相互作用。針對實際工作中的這種需要，Vidal等人發展了所謂的逆雙雜交系統（reverse two-hybrid system）。
這項技術的關鍵是報道基因URA3的引入。URA3基因在這里起到了反選擇的作用，它編碼的酶是尿嘧啶合成的關鍵酶。該酶能把5-氟乳清酸（5-FOA）轉化成對細胞有毒的物質。Vidal等人通過改造在URA3基因的啟動子內引入Gal4的結合位點。這個改造的酵母菌株在缺乏尿嘧啶的選擇性培養基上只有當“誘餌”和“獵物”相互作用激活URA3基因的表達才能生長。
在含有5-FOA的完全培養基上“誘餌”和“獵物”的相互作用則抑制細胞的生長。然而如果目的蛋白，即與DB或AD融合的蛋白質發生了突變或者由于外加藥物的干擾不再相互作用，URA3基因不表達，則細胞能在含有5-FOA的完全培養基上生長。通過這種方法，Vidal等人篩選到了轉錄因子E2F1的突變物，這些突變物仍然能結合視網膜母細胞瘤蛋白RB，但是喪失了同另外一種稱為DP1蛋白的結合能力。
結果得到了體外結合實驗的驗證。通過對這些突變蛋白基因的測序，他們發現了新的E2F1同DP1結合的位點。