1. 將反應混合物加入一在冰上放置的微量離心管中。能量重建系統成分如下：
5 mmol/L 磷酸肌酸
20 單位/ml 肌酸磷酸激酶
0.5 mmol/L ATP
0.5 mmol/L GTP
2. 滴一滴孵育混合物到一片位于帶蓋子的濕盒中的封口膜上。將帶有通透細胞的蓋玻片上多余緩沖液吸去。倒置于孵育液滴上。對所有樣品， 重復該步驟。對于懸浮培養細胞，可在一微量離心管中反應，細胞可以通過離心和用新鮮的轉運緩沖液重懸浮來清洗。
3. 所有樣品都放好以后，蓋上盒子，在 30℃ 水浴中孵育 30 分鐘。
4. 在孵育的最后，用轉運緩沖液漂洗細胞。于室溫用 2% 甲醛/轉運緩沖液固定 10 分鐘。
5. 在含有 0.1% 苯二胺的轉運緩沖液中，將蓋玻片放到載玻片上。用指甲油封邊，在熒光顯微鏡下觀察。 展開 | 