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  • 發布時間:2020-08-24 16:59 原文鏈接: 轉基因作物田間試驗的設計與管理實驗(一)

    實驗材料 轉基因株系

    實驗步驟

    3.1 釋放試驗的地理位置要求

    釋放地點應是宜于種植該作物的一個隔離區,其動植物區系與周圍農田沒有差別,而且沒有稀有或受保護的植物或動物物種,也必須確保釋放地點較遠的區域沒有政府機構認定的群落生境或保護區。試驗區要求地勢平坦,既要能減少基因逃逸的危險,又要便于耕作,使試驗盡可能地精確,盡量減小試驗誤差。

    3.2 試驗管理的說明

    3.2.1 試驗田的準備

    試驗區根據所栽培作物的常規操作準備試驗田,精心挑選能夠及時收獲并無前茬殘留物的田塊,以確保苗床優質,因為殘留在土表的秸稈和根須很容易纏繞在小區播種機的犁刀上,使小區試驗難以實現精確。小面積的轉基因試驗不應該在以前做常規試驗的小區試驗田上進行。

    3.2.2 施肥

    肥料應按常規耕種和生產要求施用。化肥用量多少需考慮轉基因植株的株高,由于高稈的轉基因植株容易倒伏,氮肥的施用量應比正常的用量略少。小面積田間試驗不應施用有機肥,以免造成土壤養分的不均勻。

    3.2.3 土壤消毒

    這項措施僅限于可能有病蟲草害危害時,并且只有當這種處理不會對試驗目的有影響時才能使用。

    3.2.4 試驗的設計與準備

    開展試驗的第一步是制訂試驗方案,確定待測試的基因型及其在試驗設計中的布局,設定試驗區的大小、重復的次數和試驗方案等。按播種清單準備試驗種子,清單包括詳細的試驗代碼、每個區的編碼和種子的來源(哪個試驗的哪一個試驗區)。此外,品種名稱和基因型的譜系,或其他標識性數據通常也要包括在內。對于某些類型的試驗,播種清單還要標注每個小區播種的行數和播種的種子數量。

    3.2.5 種子準備

    如何準備試驗種子,取決于轉基因的世代高低;也取決于測試的基因型是直接轉化獲得的,還是用轉基因材料培育的;以及所能提供的種子數量多少等因素。上一世代入選的穗子,用單穗脫粒機脫粒,也可以人工脫粒,要將脫粒的種子存放于專門的容器。所有的種子按播種清單依次排序。如果有必要,還要對種子進行清選,清選時應選用可避免不同基因型混雜的實驗用種子清選機。如果有需要也可以對種子進行包衣,并按每個小區的播種數量分裝入小袋子。播種前,準備好的種子應與其他試驗材料分開單獨保存。當脫粒、清選、包衣和計數完成后,實驗設施和房間需要徹底地清洗,任何多余的種子和其他的植物組織要收集好并銷毀。

    3.2.6 播種

    如果只有少量的種子,T1 代 和 F1 代,可用手工寬距播種,也可用單粒種子播種機播種。對高世代的種子,如 T2、Tn 或回交轉育的分離群體,單穗脫粒的種子在下一代單獨播種成穗行。單粒傳(SSD) 方法很少用于田間試驗的加代。轉基因純合的群體,常用一種特制的試驗用小區播種機或穗行播種機播種成小小區。這些機器設計獨特,能把手動或自動裝入的所有種子在設定的距離內全部播種完。播種的密度可以通過改變種子的數量或播種距離來調整。這樣,田間連續播種的種子不會混雜,播種后機器也不需要清洗。播種機在播種后會進行覆土和壓土等,這樣播種后不必再一次耕作。

    3.2.7 轉基因田間試驗的隔離

    轉基因植株四周至少應該種植 2 m 寬的常規小麥品種,且有至少 20 m 寬的空閑農田或非禾谷類作物區。待試驗中最遲的材料開花后,轉基因小麥與常規小麥再也沒有相互雜交的風險時,這 2 m 寬的保護行小麥植株可以銷毀。

    3.2.8 傳病的邊行

    如果田間試驗目的是為了鑒定轉基因系對真菌的抗病性,為了便于人工接種的誘發,邊行必須種植由感病基因型組成的材料。在鑒定小種專化型病害或蟲害的試驗中,邊行要混合種植多種基因型的材料。用實驗室培養的菌種直接接種轉基因植株是鑒定抗性的另一種方法 [ 3 ],這一方法需對轉基因的部分植株或每一小區的一行進行接種。

    3.2.9 雜草控制與病蟲害的防治

    當作物出苗后,要對小區兩端邊界的苗進行修整,以形成最終小區的大小。這項操作可以用手工完成,也可以用旋耕機修整,或者噴施廣譜除草劑。每個小區用塑料標簽標示,標簽用熱敏打印機打印并固定在標牌桿上。標簽上需包含本小區的識別信息或其他相關信息,標簽內容既要肉眼可辨,又能被條碼機識別。當同時收獲許多小區時,小區的標簽可取下粘貼在包裝種子的紙袋或布袋上,確保在整個試驗過程中小區的編號不會搞錯。如果試驗地氣候適宜的話,建議播種后立即噴施苗前除草劑,對其極易發生草害的稀播小區尤為重要。對于禾本科雜草和闊葉雜草,采用常用的控草措施,并充分關注當地雜草群落中的優勢草種。如果試驗沒有特別要求,允許使用殺菌劑和殺蟲劑進行病蟲害的防治。在成熟前,用網遮蓋小區,以防鳥類傳播種子。


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