誘導干細胞的分化的方法有哪些

自1981年英國的Evans等從小鼠囊胚的內細胞團（Inner
cell
mass，ICM）分離建立胚胎干細胞（Embryonic
stem
cells，ES細胞）以來，ES細胞的研究就一直是各國研究的熱點。近兩年，ES細胞分化誘導以及調控方面的研究取得了很多重要的進展，已從ES細胞誘導出神經細胞、心肌細胞、血管和內皮細胞等。利用ES細胞的定向分化可望在基因研究、細胞治療和組織器官替代治療等的研究中發揮重要作用。
1.常用的體外誘導方法是在體外培養的成體干細胞中加人入誘導因子。誘導因子包括各種能影響細胞分化的物質，如血清、糖分、維生素、以及各種蛋白因子等。
2.日本學者Oh等首先報道，高濃度肝細胞生長因子(HGF)體外誘導大鼠骨髓細胞分化為肝細胞，并表達CK8,
CK18,
ALB等。
3.2002年，Schwartz等將大鼠、小鼠和人的多能成體前體細胞(MAPC)接種到鋪有基質明膠或纖維連結素的培養瓶中，用60％DMEM(低糖型)+
2%
FCS培養體系培養，并加入HGF和/或成纖維細胞生長因子-4(FGF-4)，在培養的第7天，MAPC分化為表達肝細胞核因子-3BETA,GATA-4
,CK-19和AFP的上皮樣細胞，在第14-28天，這些上皮樣細胞表達CK-18,
HNF-4和HNF-1
alfa。大約在第21天，CK-18和ALB染色陽性。這些上皮樣細胞也具有肝細胞功能特征:分泌尿素和白蛋白，能攝取低密度脂蛋白并貯存糖原。
4.結果表明，用HGF和FGF-4在體外能將MAPC誘導分化成具有形態、表型和功能特征的肝細胞。實驗表明，FGF-4單用可誘導肝細胞分化，用HGF處理的細胞分化程度更高。