血清與重氮試劑混合后，在規定時間所測定的膽紅素，相當于結合膽紅素含量，總膽紅素減去結合膽紅素的值即為非結合膽紅素。
該方法反應時間不同，結果相差很大。
【參考值】
結合膽紅素：0～6.8μmol/L（0～0.4mg/dl）
非結合膽紅素：1.7～13.2μmol/L（0.1～0.8mg/dl）
