1、標本準備：與血糖同時測定，空腹或糖負荷后靜脈血3-5ml，肝素或EDTA抗凝，或用綠帽、錢綠帽或紫帽真空管采血，1h分離血漿，-20°C可穩定6個月，-70°C可穩定一年。
2、運動訓練可提高胰島素的敏感性，是胰島素水平降低；妊娠中期可見有高胰島素血癥，哺乳期血糖和胰島素均有所減低；持續禁食胰島素分泌減低；溶血結果偏低。
3、晚餐后不再進食，可飲水、忌煙、酒、茶和咖啡，次日上午7:30空腹取血。
4、胰島素和胰島素原存在交叉免疫反應，測定值不代表生物活性的胰島素。
