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  • 發布時間:2020-08-24 14:47 原文鏈接: 腫瘤動物模型建立實驗(一)

    實驗方法原理

    誘發性腫瘤動物模型是指研究者用化學致癌劑、放射線、致癌病毒誘發動物的腫瘤等。

    實驗材料 腫瘤細胞小鼠

    試劑、試劑盒 無血清培養基質3%中性甲醇石臘

    儀器、耗材 低溫離心機血球計數器游標卡尺

    實驗步驟

    一、肝癌 


    1.二乙基亞硝胺(DEN)誘發大白鼠肝癌


    (1)取體重250 g左右的封閉群大白鼠,雌雄不拘;


    (2)按性別分籠飼養。除給普通食物外,飼以致癌物,即用 0.25%DEN水溶液灌胃,劑量為10 mg/kg,每周一次,其余5天用0.025%DEN水溶液放入水瓶中,任其自由飲用;


    (3)共約4個月可誘發成肝癌;


    (4)也可以單用0.005%摻入飲水中口吸服8個月誘發肝癌。


    2.4-2甲基氨基氮苯(DBA)誘發大鼠肝癌


    (1)用含0.06%DBA的飼料喂養大鼠,飼料中維生素B2 不應超過1.5~2 mg/kg;


    (2)4~6月就有大量的肝癌誘發成功。


    3.2-乙酰氨基酸(2AAF)誘發小鼠、狗、貓、雞、兔肝癌


    (1)給成年大鼠含0.03% 2AAF標準飼料;


    (2)每日每平均2~3 mg 2AAF(也可將2AAF混于油中灌喂),3~4月后有80~90%動物產生肝腫瘤。


    4.二乙基亞硝胺誘發大鼠肝癌:


    (1)用劑量為每日0.3~14 mg/kg體重,混于飼料或飲水中給予;


    (2)6~9個月后255/300大鼠發生了肝癌。


    5.亞胺基偶氮甲苯(OAAT)誘發小鼠肝癌


    (1)用1%OAAF苯溶液(約0.1 ml含1 mg)涂在動物的兩肩胛間皮膚上,隔日一次,每次2~3滴,一般涂100次。


    (2)實驗后7~8周即而出現第一個肝腫瘤,7個月以上可誘發小鼠肝腫瘤約55%。


    (3)或用2.5 mg OAAT溶于葵瓜子油中,給C3H小鼠皮下注射4次,每日間隔10天,也可誘發成肝癌。


    6.黃曲霉素誘發大鼠肝癌


    (1)每日飼料中含0.001~0.015 ppm,混入飼料中喂6個月后,肝癌誘發率達80%。

     

    二、胃癌 


    1.甲基膽蒽誘發小鼠胃癌


    (1)取20 g左右的小鼠,無菌手術下,在腺胃粘膜面穿掛含甲基膽蒽(MC)線結。


    (2)含MC的線結是用普通細線,在一端打結后,將線結置于盛有MC小玻璃試管內,在酒精燈上微微加溫,使MC液化滲入線結。MC濃度為0.05~0.1 g 20-甲基膽蒽內浸入10~20根線。


    (3)手術埋線后4~8個月可誘發成功胃癌。


    2.不對稱亞硝胺誘發小鼠胃癌


    劑量為0.25 ml/kg體重,3個月后全部動物發生前胃乳頭狀癌,7~8個月后有85~100%發生前胃癌。昆明種最敏感。A系次之,615系小鼠敏感性最差。


    3.甲基亞硝基醋酸尿素誘發小鼠胃癌


    給BD大鼠飲水中加甲基亞硝基醋酸尿素,劑量為2 mg/kg體重,每周飲用5次,520天后全部大鼠均發生了腺胃癌。

     

    三、食管癌 


    1.甲基芐基亞硝胺(MBNA)誘發大鼠食管癌


    (1)取體重100 g以上的Wistar大鼠;


    (2)任其食用含甲基芐基亞硝胺的飲水,并將MBNA摻入飼料中使每日攝入量達0.75~1.5 mg/kg體重;


    (3)80~100天可誘發成食管癌。




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