弧菌屬
常規鑒定
雖然弧菌屬內包含的菌種較多，但臨床實驗室常見到12個菌種，其中具有明確致病作用的有霍亂弧菌、副溶血弧菌、河弧菌、擬態弧菌等。各種弧菌的鑒別特征見表5—3—36。
弧菌的鑒定分兩步，首先應與相近的菌屬區別，定屬后再做種的鑒定。
1. 與相似的菌屬區別：弧菌屬歸弧菌科。同科中還有氣單胞菌屬和鄰單胞菌屬，均為氧化酶陽性，發酵型。弧菌屬與其兩者的區別可依嗜鹽性、甘露醇、氨基酸及Ο/129(2,4-二氨基-6,7-二異丙基碟啶)敏感性等加以區別，參見表5—3—36。Ο/129試驗用紙片濃度10μg、150μg二種，與紙片法藥敏試驗相同，出現抑菌環即判陽性(S)。
表5-3-36 弧菌科3個菌屬特性的鑒別
特 性 氣單胞菌屬 鄰單胞菌屬 弧菌屬
甘露醇
鳥氨酸
精氨酸
嗜鹽性
Ο/129敏感
2．霍亂弧菌的鑒定：目前我國臨床細菌室對霍亂弧菌的鑒定一般只作初步鑒定，具體方法如下：
(1)直接涂片
懸滴檢查：取患者糞便制成懸滴標本(亦可用壓滴法)，檢查細菌的動力。霍亂弧菌無論是古典生物型或El-tor生物型均呈現極活潑的穿梭狀運動。Ο1群霍亂多價血清制動試驗陽性，可作早期推測性報告。
表S-3-37 致病弧菌的生化特性(陽性百分率)
試 驗 霍亂弧菌 擬態弧菌 麥氏弧菌 霍利斯弧菌 海魚弧菌 河弧菌 弗尼斯弧菌 溶藻弧菌 副溶血弧菌 致傷弧菌 辛辛那提弧菌 沙魚弧菌
精氨酸
(1％NaCl) 0 0 60 0 95 93 100 0 0 0 0 0
賴氨酸
(1％NaCl) 99 100 35 0 50 0 0 99 100 99 57 100
鳥氨酸
(1％NaCl) 99 99 0 0 0 0 0 50 95 55 0 0
葡萄糖產氣 0 0 0 0 10 0 100 0 0 0 0 0
麥芽糖 99 99 100 0 100 100 100 100 99 100 100 100
甘露醇 99 99 96 0 0 97 100 100 100 45 100 50
水楊苷 1 0 9 0 0 0 0 4 1 95 100 0
蔗 糖 100 0 100 0 5 100 100 99 1 15 100 50
氧化酶 100 100 0 100 95 100 100 100 100 100 100 100
ONPG 94 90 50 0 0 40 35 0 5 75 86 0
硝酸鹽 99 100 0 100 100 100 100 100 100 100 100 100
0%NaCl 100 100 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
8％NaCl 1 0 44 0 0 71 78 94 80 0 62 0
Ο/129 99 95 90 40 90 31 0 19 20 98 25 100
枸櫞酸鹽 97 99 75 0 0 93 100 1 3 75 21 0
染色檢查：取米泔樣糞便的絮狀物、粘液部分涂片2張，干燥后用乙醇固定，分別用革蘭染色及1:10稀釋的石炭酸復紅染色，干燥后用油鏡檢查，觀察有無革蘭陰性、呈魚群樣排列的弧菌。涂片檢查，只能對可疑患者作初步診斷參考，不能作確診依據。
(2)玻片凝集試驗：自分離平板上挑取可疑菌與霍亂多價診斷血清(即Ο1群霍亂多價血清)做玻片凝集試驗，所用血清的效價應在1：80～l：160之間，如過濃，則稀釋后再作凝集。將稀釋血清滴加在潔凈的載玻片上，挑取可疑菌落混于血清內，即刻(一般不超過 10s)出現肉眼可見的明顯凝集者為陽性。菌落應以生理鹽水作對照，對照應不發生凝集。為了提高陽性檢出率，應多挑可疑菌落進行玻片凝集試驗。作初步鑒定試驗后，將此高度疑似菌送衛生防疫站作最后鑒定。
霍亂弧菌是重要病原菌。由于病原學及流行病學方面的需要，對Ο1群霍亂弧菌進一步分型是必要的。國際上公認通用的區分方法有兩種：①生物分型；②抗原分型。
生物分型：根據霍亂弧菌在生物學上的差異，分為兩個生物型，命名為古典生物型和 El-tor生物型。古典生物型的毒力往往大于 El-tor生物型。古典生物型菌株的染色體上帶有兩個毒素基因，而絕大多數El-tor生物型菌株僅有一個毒素基因。在霍亂病的防治中，對菌株進行生物分型是必要的。
兩種生物型的區分方法見表5-3-38。
表5-3-38 霍亂弧菌的生物分型
生物學特性 生物型
古典型 El-tor型
V-P試驗 - +
溶血性 - +
50U多粘菌素B紙片 S R
雞血球凝集 - +
抗原分型：霍亂弧菌的血清學分型是依據菌體抗原。古典生物型和El-tor生物型的抗原同屬Ο1群霍亂弧菌。
Ο1群的霍亂弧菌還可以進一步分血清型。依菌株是否具備A、B因子，分為小川、稻葉、彥島3個型別，血清分型見表5—3—39。
表5-3-39 霍亂弧菌生物分型和血清型
種 生物分型 血清型(Ο抗原因子)
霍亂弧菌 古典型霍亂弧菌
El-tor型霍亂弧菌 小川型（A、C）
稻葉型（A、B）
彥島型（A、B、C）