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  • 發布時間:2019-11-19 22:27 原文鏈接: 細胞死亡的生化分析實驗

    實驗材料

    細胞

    試劑、試劑盒

    PBS Eppendorf DMSO

    儀器、耗材

    微量滴定板

    實驗步驟1. 250 g 離心 5 分鐘收集 2X106~5X106 細胞,用 pH 7.2 的冷 PBS 洗 1 次,用 200 μl 溶解緩沖液重懸。

    2. 在冰上孵育細胞 30 分鐘。

    3. 用 Eppendorf 將樣品在 13000 r/min 離心 5 分鐘,取上樣進行 Caspase 活性測定:每種樣品留一等份作蛋白質定量。

    4. 在水或 DMSO 中溶解底物,配置成 20 mmol/L 的儲存液,可在 -20℃ 避光保存。

    5. 將反應混合液置微量滴定板中,用帶動力學裝置的 SpectraMax 微量滴定板分析儀在 405 nm 濾光片下讀取反應數據。每 2~20 秒檢測樣品,確定底物的初始水解率;保證所得底物水解率為線性。


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