(1)取抗體(2~5mg/mL)1mL,加入AP 5mg溶解。
(2)裝入透析袋,用0.01mol/L、Ph7.2PBS4℃透析18h,換液3次。
(3)加入2.5%戊二醛20uL,室溫(20℃±)放置2h。4℃0.01mol/L、pH7.2PBS透析過夜,換液3次。
(4)移入0.05mol/L、pH8.0Tris-HCl緩沖液中,4℃透析過夜,換液3次。
(5)取出標記抗體,用含%BSA和0.02%NaN3的Tris-HCl緩沖液稀釋至4mL,即為酶標記物原液。
(6)加入1/3量純甘油,測定工作效價后,小量(0.1mL)分裝,4℃保存(使用前以pH7.4PBS-吐溫溶液將結合物適當稀釋)。