1. 標本采集
1.1 穿刺液包括胸水、腹水、心包液、關節液及鞘膜液等。
1.2 一般由臨床醫師以無菌操作穿刺術抽取。胸腹水抽取5～10毫升，心包液、關節液等可抽取2～5m1，將所取得之樣本注入含有抗凝劑的無菌管內充分混勻后送檢。
1.3 標本采集最好能在停藥2天后進行，如不能停藥，則應在下次用藥前采集，如疑為淋病性關節炎患者，其標本應在采集后立即送檢或床邊直接接種，切不可放冰箱保存。
2. 檢驗步驟
2.1 涂片檢查 標本3000r/min 離心l5分鐘后，取沉淀物制片。
2.2 涂片鏡檢的細菌常為一般致病菌、革蘭氏陰性雙球菌和抗酸桿菌等，涂片檢查應根據項目要求進行相應的染色鏡檢。
2.3 培養：作一般細菌培養可把采集的標本接種于血平板、麥康凱、巧克力平板，同時也可將標本注入血培養瓶放入血培養儀培養。
2.4 作厭氧培養可采用直接床邊接種標本或采集樣本后，將培養物直接注入厭氧增菌培養基。
3. 操作流程
穿刺液
厭氧 涂片革蘭氏染色
需氧 注入血培養瓶 厭氧平板
血平板 放入血培養儀 厭氧肉湯 初步報告
麥康凱 陽性報警
巧克力 分離培養
菌落觀察
涂片染色 Vitek-32鑒定、藥敏/BD鳳凰鑒定、藥敏
確定報告
4. 報告結果
4.1 涂片報告發現形似某某細菌，淋球菌應報是否在細胞內外發現革蘭氏陰性雙球菌；抗酸染色應報是否發現抗酸桿菌。
4.2用于培養的穿刺液正常情況下應無菌，如培養出細菌應報細菌種名及藥敏試驗結果，血培養儀培養6天仍未發現細菌則報無菌生長。