動物麻醉后將頭部固定于動物實驗用立體定向架上，切開右額頂頭皮，用微型鉆磨去顱骨形成5mm直徑大小圓形骨窗，在手術顯微鏡下剪開硬腦膜，用微量注射器將10％BDA溶液(美國MolecularProbes公司產品)緩慢注入右側的感覺運動區皮質(sensorimotor cortex)內。注射時將微量注射器固定在立體定向支架上，選擇無血管區作為注射點，每個注射點分別在距皮層表面0.5、1.0和2.0mm處各注藥一次，每次劑量70μl。每次注射后針頭滯留1min，然后緩慢進退針。每個動物接受10個皮層注射點，BDA注射總量為2100μl。注射完畢后用薄層明膠海綿覆蓋腦表面，縫合頭皮。2周后再次麻醉動物，打開胸腔，用4℃生理鹽水和4%多聚甲醛液行心臟灌注后，取出大腦和脊髓組織，置于4%多聚甲醛液中4℃保存，待處理。
BDA染色顯影：分別取大腦和各段脊髓組織，脊髓分別取上頸段(C3-6)，胸段(T5-8)，腰段(L1-4)，用冰凍切片機連續切片，組織切片厚度為40μm。采用自由漂乳法將組織切片先后在以下溶液中孵化：含0.1％H202的甲醇溶液10min、含0.5％Triton X-IOOPBS溶液(PBS-T)30min，抗生物素蛋白-生物素-過氧化物酶復合液(avidin-biotin-peroxidase,美國Vector Laboratories公司產品)1h；用PBS-T液沖洗組織切片兩次，每次各10min，最后在二氨基聯苯胺(Vector laboratories公司產品)中顯影5min。最后上玻片、風干、脫水及蓋玻片覆蓋。