碘_淀粉比色法測定淀粉酶的原理

碘-淀粉比色法測定唾液淀粉酶一 實驗目的1、 掌握比色法測定a-淀粉酶的原理；2、 掌握分光光度計的正確使用方法；二 實驗原理1、比色法作為一種定量分析的方法，是以生成有色化合物的顯色反應為基礎，通過比較或測量有色物質溶液顏色深度來確定待測組分含量的方法。常用的比色法有兩種：目視比色法和光電比色法，兩種方法都是以朗伯-比爾定律 (A＝εbc)為基礎。2、血清中α-淀粉酶催化淀粉分子中α-1，4糖苷鍵水解，產生葡萄糖、麥芽糖及含有α-1，6糖苷鍵支鏈的糊精。a-淀粉葡萄糖+麥芽糖+糊精+碘液藍色復合物在底物過量的條件下，反應后加入碘液與未被水解的淀粉結合成藍色復合物，其藍色的深淺與未經酶促反應的空白管比較，從而推算出淀粉酶的含量。3、酶活力的大小、即酶量的多少用酶活力單位（U）（active unit）表示。1961年國際生物化學學會酶學委員會提出采用統一的“國際單位”（IU）來表示酶的活力，規定為：在最適條件（25℃）下，每分鐘內催化1微摩爾（μmol）底物轉化為產物所需的酶量定為一個活力單位，即1IU = 1μmol /min。這樣酶的含量就可用每克酶制劑或每毫升酶制劑含有多少酶活力單位來表示（U/g或U/ml）。