據16日《細胞報告方法》雜志上發表的一項研究,研究人員開發出一種CRISPR-Cas9基因編輯方法來實現對蟑螂的基因編輯。這項被稱為“直接親本CRISPR(DIPA-CRISPR)”的技術,可將材料注射到卵子正在發育的雌性成蟲體內,而不是注入胚胎本身。
“從某種意義上說,昆蟲研究人員已經從將材料注射到卵子的煩惱中解脫出來了。”資深研究作者、日本京都大學大門高明稱,“我們現在可更自由、更隨意地編輯昆蟲基因組。原則上,這種方法適用于90%以上的昆蟲物種。”
目前的昆蟲基因編輯方法通常需要將材料顯微注射到早期胚胎中,這嚴重限制了它在許多物種中的應用。例如,由于蟑螂獨特的生殖系統,過去的研究就無法實現對它們的基因操作。此外,昆蟲基因編輯通常需要昂貴的設備、針對每個物種的特定實驗裝置以及技術精湛的實驗室人員。
為了克服這些限制,研究人員將Cas9核糖核蛋白(RNP)注射到成年雌性蟑螂的主體腔中,以在發育的卵細胞中引入可遺傳的突變。結果表明,DIPA-CRISPR基因編輯效率(被編輯個體占孵化個體總數的比例)可高達22%。在紅色面粉甲蟲體內,效率達到50%以上。
DIPA-CRISPR在兩個進化距離較遠的物種中的成功應用表明了其廣泛應用的潛力。但這種方法并不直接適用于所有昆蟲物種,包括果蠅。此外,實驗表明,最關鍵的參數是對成年雌性蟑螂注射的階段。因此,使用DIPA-CRISPR技術需要掌握良好的卵巢發育知識。考慮到昆蟲的不同生活史和繁殖策略,該技術在一些物種中的應用可能具有挑戰性。
盡管有局限性,但由于DIPA-CRISPR技術易于實現,它可將基因編輯的應用擴展到廣泛的昆蟲物種。該技術只需最少的注射設備,而且僅需兩種成分——Cas9核糖核蛋白和單引導RNA,大大簡化基因編輯程序。此外,商用的標準Cas9可用于成年昆蟲注射,無需耗時的蛋白質定制工程。
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