生物安全柜的分類與使用指南

生物安全柜是為操作原代培養物、菌毒株以及診斷性標本等具有感染性的實驗材料時，用來保護操作者本人、實驗室環境以及實驗材料，使其避免暴露于上述操作過程中可能產生的感染性氣溶膠和濺出物而設計的。

今天我們將從使用原理、類別、功能等多個角度聊一聊生物安全柜的那些事兒。

作用

防止操作者和環境暴露于實驗過程中產生的生物氣溶膠的負壓過濾排風柜，是防止實驗室獲得性感染的主要設備。

工作原理

將柜內空氣向外抽吸，使柜內保持負壓狀態，通過垂直氣流來保護工作人員；外界空氣經高效空氣過濾器過濾后進入安全柜內，以避免樣品被污染；柜內的空氣也經過過濾器的過濾后再排到大氣中，以保護環境。

生物安全柜的分類

1一級生物安全柜

可保護工作人員和環境而不保護樣品，其氣流原理和實驗室通風櫥基本相同，不同之處在于排氣口安裝有HEPA 過濾器，將外排氣流過濾進而防止微生物氣溶膠擴散造成污染。一級生物安全柜本身無風機，依賴外接通風管中的風機帶動氣流，由于不能保護柜內產品，目前已較少使用。

2二級生物安全柜

目前應用最為廣泛的柜型，按照《中華人民共和國醫藥行業標準YY0569-2005生物安全柜》中的規定，二級生物安全柜依照入口氣流風速、排氣方式和循環方式可分為4個級別：

A1型，A2型，B1型和B2型，所有的二級生物安全柜都可提供工作人員、環境和產品的保護，A1型安全柜前窗氣流速度最小量或測量平均值應至少為0.38m/s。無內部循環氣流，100%的氣體通過排氣口過濾排出。

A2型安全柜前窗氣流速度最小量或測量平均值應至少為0.5m/s。70%氣體通過HEPA過濾器再循環至工作區，30%的氣體通過排氣口過濾排出。

二級B型生物安全柜均為連接排氣系統的安全柜：連接安全柜排氣導管的風機連接緊急供應電源，目的在斷電下仍可保持安全柜負壓，以免危險氣體泄漏如實驗室。其前窗氣流速度最小量或測量平均值應至少為0.5m/s(100fpm)。

B1型70%氣體通過排氣口HEPA過濾器排除，30%的氣體通過供氣口HEPA過濾器再循環至工作區。

B2型為100%全排型安全柜，無內部循環氣流，可同時提供生物性和化學性的安全控制，可以操作揮發性化學品和揮發性核放射物作為添加劑的微生物實驗。3三級生物安全柜

為生物安全防護等級為4級實驗室而設計的，柜體完全氣密，工作人員通過連接在柜體的手套進行操作，俗稱手套箱（Golve box），試驗品通過雙門的傳遞箱進出安全柜以確保不受污染，適用于高風險的生物試驗，如，進行SARS、埃博拉病毒相關實驗等；

根據生物安全柜的強制性行業標準規定，只有獲得國家食品藥品監督管理局頒發的三類醫療器械注冊證的產品才能真正保護操作人員、實驗室環境和操作樣本；生物安全柜提供對人/樣品及環境的三重保護。

生物安全柜的使用

1.安裝：確保安全柜與外部排風系統壓力平衡，保證安全柜處于正常工作狀態

2.維護：定期維護和檢測，確保安全性

3、制定計劃：工作前認真理解操作步驟和所需設，盡量減少擾動，準備好消毒劑

4、開始：關紫外燈，前窗開至適當高度，打開安全柜的燈和風扇；檢查出風口是否有障礙物，等待5min；用消毒液徹底洗凈手和手臂；穿長袖工作服和手套；帶防護眼鏡

5、清潔：用70%的乙醇或適當的消毒劑擦拭工作區域內壁

6、上樣：只放入所需物品，不能超載；出風口不要有障礙物，大物體間要保持一定距離；前窗降至適當高度，2-3min以吹掃污染物

7、最后的吹掃：工作結束，繼續開機10-15min 

8、下樣：與污染物接觸的物品，取出之前必須經表面去污處理，所有托盤或容器取出前必須加蓋

9、清潔：用消毒劑清潔內壁，待其干燥；定期抬起工作面清潔下面的區域。

10、技巧：

?所有物品離前窗至少2英寸，所有污染性的操作盡量遠離工作區域的后部

?干凈的與污染的物品分開放置；污染物品盡量放置在工作區域后部

?操作時物品和手臂不要穿過前窗

?避免使用明火，用適當的滅菌措施?避免使用干擾安全柜內層流的實驗手段

?安全柜處于操作狀態時，徹底消毒內壁

生物安全柜的操作注意事項

操作者：生物安全柜如果使用不當，其防護作用就可能大大受到影響。

紫外燈：生物安全柜中不需要紫外燈。如果使用紫外燈的話，應該每周進行清潔，以除去可能影響其殺菌效果的灰塵和污垢。

明火：在生物安全柜內所形成的幾乎沒有微生物的環境中，應避免使用明火。

溢出：實驗室中要張貼如何處理溢出物的實驗室操作規則，每一位使用實驗室的成員都要閱讀并理解這些規程。

清潔和消毒：由于剩余的培養基可能會使微生物生長繁殖，因此在實驗結束時，包括儀器設備在內的生物安全柜里的所有物品都應清除表面污染，并移出安全柜。

除污染：生物安全柜在移動以及更換過濾器之前，必須清除污染。