最好使用HPLC級的優質溶劑,使用前必須過濾和脫氣。注意以下幾點:
1)過濾目的:
溶劑進泵前和樣品注射前應該過濾除去溶劑中的微小顆粒、微生物,保證泵和色譜柱不會堵塞或損壞,保證分析數據可靠。
2)對過濾器的要求和最 jia孔徑選擇方法:
對過濾器總的要求:速度快、溶出度小、死體積小、精 que的孔徑、體積適當、化學兼容性好等。
最佳孔徑選擇方法:如果色譜柱填料直徑小于3μm或除菌過濾,一般選擇0.2μm孔徑;如果色譜柱填料直徑大于5μm,則選0.45μm;如果是預過濾或過濾難過濾的樣品,一般選1μm孔徑。特別是對使用無機鹽配制的緩沖液,更要注意選擇合適的過濾器!否則,不可能得到可靠的分析測試數據!
3)脫氣:
主要目的是:除去流動相中溶解或因混合而產生的氣泡。液相色譜流動相脫氣使用較多的是離線超聲波振蕩脫氣、在線惰性氣體鼓泡吹掃脫氣和在線真空脫氣。流動相的氣泡進入液相泵會引起壓力的上下波動,危害很大,必須除之,可以打開排空閥,大流速沖洗。