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  • 發布時間:2021-05-12 14:09 原文鏈接: 核酸擴增—鏈置換擴增技術(SDA)

      SDA是一種基于酶促反應的DNA體外等溫擴增技術,采用標記的兩種不同熒光基團的探針。在SDA過程中,該探針被摻入到雙鏈擴增產物中,由限制內切酶的酶切使淬滅基團與熒光基團分開,從而釋放熒光,用熒光偏振檢測法定量檢測。SDA較之PCR有更高的擴增效率,耗時僅30min。其基本系統包括一種限制性核酸內切酶、一種具有鏈置換活性的DNA聚合酶、兩對引物、dNTPs以及鈣、鎂離子和緩沖系統。基本過程包括準備單鏈DNA模板、生成兩端帶酶切位點的目的DNA片段、SDA循環三個階段。 SDA技術同樣具有較高的敏感性和特異性,但由于擴增時間和模板DNA濃度的影響可能會出現非特異性擴增產物的累積,因此需要利用熱穩定機制優化其擴增條件。

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