1、吸附柱色譜
吸附色譜的原理:在一定條件下,硅膠與被分離物質之間產生作用,這種作用主要是物理和化學作用兩種.物理作用來自于硅膠表表面與溶質分子之間的范德華力.化學作用主要是硅膠表面的硅羥基與待分離物質之間的氫鍵作用。
色譜管為內徑均勻、下端縮口的硬質玻璃管,下端用棉花或玻璃纖維塞住,管內裝入吸附劑。吸附劑的顆粒應盡可能保持大小均勻,以保證良好的分離效果。除另有規定外,通常多采用直徑為0.07~0.15mm的顆粒。色譜柱的大小,吸附劑的品種和用量,以及洗脫時的流速,均按各品種項下的規定。
2、分配柱色譜
方法和吸附柱色譜基本一致。裝柱前,先將載體和固定液混合,然后分次移入色譜柱中并用帶有平面的玻棒壓緊;供試品可溶于固定液,混以少量載體,加在預制好的色譜柱上端。洗脫劑需先加固定液混合使之飽和,以避免洗脫過程中兩相分配的改變。
由于部分新手剛接觸過柱,需要系統地了解過柱的方法技巧,我把一個從事多年化學工作,有豐富實驗經驗的先生的過柱經驗轉載過來,希望對大家有用。(看了請及時回帖,謝謝~~)常說的過柱應該叫柱層析分離,也叫柱色......
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摘要:采用直接柱色譜的方法,用石油醚單一溶劑作為洗脫液,從霉煙或碎煙末浸膏中提取了β2胡蘿卜素純品。通過1H2NMR和13C2NMR譜圖鑒定了β2胡蘿卜素的結構。用高效液相色譜法(HPLC)測得β2胡......
摘要:采用硅膠柱色譜分離純化生物發酵液中的葉酸,實驗研究了色譜方法,確定了適的譜條件。......
1.吸附劑的選擇及處理吸附劑分為無機吸附劑如硅膠、氧化鋁、活性炭、氧化鎂、碳酸鈣、磷酸鈣,有機吸附劑如纖維素、淀粉、蔗糖、聚酰胺等。一般來說,所選擇吸附劑應有較大的比表面積和足夠的吸附能力:對欲分離的......