分析測試百科網訊 2019年3月19日,北京市2019激光共聚焦超高分辨率顯微學學術研討會在北京天文館隆重舉行。本次研討會由北京市電鏡學會主辦,北京理化分析測試技術學會承辦,會議有200余人參與。分析測試百科網作為支持媒體為您帶來全程報道。

研討會簽到處

研討會現場
北京理化分析測試技術學會電鏡專業委員會榮譽理事長 張德添
本次研討會開幕式由北京理化分析測試技術學會電鏡專業委員會榮譽理事長張德添主持并致辭。張德添表示,自第一屆激光共聚焦超高分辨率顯微學學術研討會舉辦以來,激光共聚焦顯微鏡技術已經發生翻天覆地的變化。早在三十年前的第一次接觸單光子激光共聚焦顯微鏡為在場所有中國學者留下了深刻印象。時間過去三十年,現在的激光共聚焦顯微鏡技術已經單光子發展為多光子、高通量、高分辨技術,并且這項技術仍然處于快速發展之中。
為了學習國內外先進激光共聚焦顯微技術,北京理化分析測試技術學會電鏡專業委員會開始舉辦激光共聚焦顯微學學術研討會。希望研究超微結構、顯微結構的科技工作者能夠串聯起電鏡與光鏡間的聯系。最后,張德添希望在座學者能夠通過本次研討會打開新的思路,為中國科學研究做出貢獻。

中國科學院生物物理研究所 李棟研究員
首先由中國科學院生物物理研究所李棟研究員帶來研討會報告,題目是“Visualizing intracellular organelle and cytoskeletal interactions with GL”。李棟表示,光學顯微鏡因發生阿貝繞射極限,導致其光學分辨極限只有200 nm,因此課題組采用結構光成像進行細胞結構研究,其分辨率高達100nm。然而,課題組并不滿足100 nm的分辨率,因此課題組在結構光成像技術基礎上采用光控熒光蛋白成像技術,從而將分辨率提升至60 nm。同時,課題組通過對這項技術改進,最終達到1 μm成像深度,并且信號量提高10倍。隨后李棟介紹了使用這項技術的實際分析案例,例如ER tubule生成過程、Mito fusion過程、ER-Lyso運輸過程等。最后,李棟介紹了課題組正在進行的3D超分辨成像技術。

徠卡顯微系統(上海)貿易有限公司 王怡凈
由徠卡顯微系統(上海)貿易有限公司王怡凈帶來研討會報告,題目是“高分辨率成像的新突破”。王怡凈介紹到,徠卡的寬場細胞成像技術THUNDER imager,相比于傳統寬場成像技術,擁有高分辨率,高采樣速度優勢。隨后,王怡凈介紹了大量實際細胞、生物組織、模式生物拍照實例。這套成像技術除了對薄樣品有非常好的成像效果,對比較厚或活樣品同樣有很好的實時成像效果。除了單張照片外,王怡凈表示,實驗員也可以使用徠卡的navigator軟件進行多幅照片的螺旋式拼接,獲得更全面的分析結果。

北京大學 陳建國教授
由北京大學陳建國教授帶來研討會報告,題目是“中心體與微管網絡結構的組裝” 陳建國介紹到,中心體的復制控制細胞的分裂,一個母中心體只產生一個子中心體。對于其中原因,陳建國利用激光共聚焦顯微鏡發現中心體所合成的CCDC84蛋白控制中心體復制過程及數量,同時,HsSAS-6等蛋白與CCDC84共同調控中心體。隨后,陳建國介紹了大量檢測實例證明CCDC84蛋白在中心體的復制等方面起重要作用。與此同時,陳建國也對中心體亞遠端蛋白進行分析,發現一種新型不對稱定位CCDC120中心體蛋白。這種蛋白同時與CEP164、CEP170、hNienin等存在在緊密關系。陳建國表示,CCDC120、CCDC68蛋白也是中心體亞遠端附屬結構的組分。最后,陳建國介紹到,細菌纖毛與人類部分疾病存在的聯系以及MMP9調控蛋白與纖毛負成長的關系。

上海宇北醫療器械有限公司 朱鳳勝
由上海宇北醫療器械有限公司 朱鳳勝帶來研討會報告,題目是“前瞻性超分辨活細胞納米熒光成像技術與系統”。朱鳳勝介紹到,Abberior 公司由Stefan W. Hell 建立,他所研發的STED 技術已將分辨率提升至10 nm。同時,Stefan W. Hell 也在 2014 獲得諾貝爾化學獎。Abberior公司所研制的超分辨活細胞納米熒光成像技術采用全脈沖激光,可提高時間分辨率,減少激光傷害和熒光漂白,同時三維成像效果相比傳統激光共聚焦成像有顯著提升,并且成像速度快,二維分辨率可達20 nm,三維分辨率可達70 nm。隨后,朱鳳勝介紹了大量觀察實例表明STED 技術相對于傳統激光共聚焦顯微技術擁有更好的拍照效果。

中國科學院生物物理研究所 紀偉高級工程師
由中國科學院生物物理研究所紀偉高級工程師帶來研討會報告,題目是“通過冷凍和干涉成像提高單分子定位顯微鏡的分辨率”。 紀偉表示,冷凍熒光成像可以獲得更穩定的構想信息,同時也可保持分子的近天然狀體以及提成分辨率。利用課題組研制的冷凍熒光成像系統,紀偉開展了熒光蛋白的光物理性質分析、超分辨熒光成像分析等研究。除了使用單一分析方法,紀偉也實現了冷凍超分辨光電聯用,成功生成了光電融合圖像。為了解決傳統樣品臺不穩定問題,課題組研發了全新的超穩冷凍樣品臺,保證了系統的工作穩定性。
除了冷凍熒光成像技術,課題組也研發了全新單分子干涉成像技術。相比于傳統方法,新方法將分辨率提高2倍,在DNA origami陣列分析中,其分辨率優于5 nm。未來,課題組希望通過采用1.7倍油鏡和571 nm光源實現1 nm分辨率。

奧林巴斯(北京)銷售服務有限公司 孟麗麗
由奧林巴斯(北京)銷售服務有限公司 孟麗麗帶來研討會報告,題目是“‘大海撈針’—海量活細胞篩選下的超分辨成像技術”。孟麗麗介紹到,奧林巴斯的SCAN軟件可以對獲取圖像進行處理,同時對檢測對象偵測、對特征進行提取和歸類以及對分析質量進行控制。利用這款軟件,檢測人員也可以實現細胞周期的精細分析、活細胞動態分析、高分辨率圖像采集等。除了SCAN軟件外,孟麗麗也介紹了奧林巴斯轉盤共聚焦超分辨率顯微鏡、硅油物鏡等實際成像實例。

北京師范大學 張毅教授
由北京師范大學 張毅教授帶來研討會報告,題目是“花粉微絲骨架動態的調節機制”。張毅介紹到,花粉中存在大量微絲骨架結構,并且骨架的建立為囊泡運輸提供重要通道。經研究發現,Formin家族蛋白對花粉微絲聚合其重要作用,其中AtFH5定位于囊泡中,決定微絲形成位置。

GE醫療集團首席應用科學家 Jaron Liu
由GE醫療集團首席應用科學家 Jaron Liu帶來研討會報告,題目是“Deltavision OMX Technology - One System, All the Answers”。Jaron Liu介紹了通用醫療集團最新DeltaVision OMX Ring TIRF的技術介紹以及實際分析案例。

北京大學 席鵬教授
由北京大學席鵬教授帶來研討會報告,題目是“為結構光超分辨賦予極性”。席鵬表示,超分辨由點擴展函數組成,課題組通過熒光偏振特性結合SIM技術最終形成了pSIM超分辨技術。通過這種技術,課題組研究了lambda DNA、微管結構等。通過引入新的維度,使用這項技術的研究人員可以通過全新的視角解決先前未能解決的問題。

尼康儀器(上海)有限公司 周建春
由尼康儀器(上海)有限公司周建春帶來研討會報告,題目是“尼康新型共聚焦及超分辨率系統介紹”。周建春介紹到,自上世紀80年代共聚焦顯微鏡發明以來,其已經發生顯著改變。截至目前,尼康研制的全新共聚焦顯微鏡-N SIM S采用固態激光器,擁有更長壽命。N SIM S顯微鏡采用25度觀察視野,可觀察更多變化信息,獲取更大圖像。其配備的新型共振掃描頭可獲得1K分辨率,幀率為15,若采用512分辨率,可獲得720幀掃描速度,同時掃描頭具有低光毒性。除了上述新設計,這款產品還可進行模塊化拓展、軟件定制、升級分辨率等。

卡爾蔡司(上海)管理有限公司 張然
由卡爾蔡司(上海)管理有限公司 張然帶來研討會報告,題目是“關于新一代蔡司超高分辨技術的應用”。張然表示,蔡司公司新發布的Elyra7 在120nm分辨率是最快采集率可達255幀。采用新型晶格結構光照明技術的Elyra7可降低光毒性,提高光利用率,同時解析多通道信號以便獲得更多細節信息。通過這款新產品,蔡司公司成功觀察到亞細胞等細微結構,捕獲更多活細胞動態變化信息,獲得完整細胞三維信息等。除了單獨使用外,這款系統也可以與SMLM、LSM、X-Ray、EM等系統進行聯用,實現多種分辨率成像。

蒂姆溫特遠東有限公司 齊冬
最后,由蒂姆溫特遠東有限公司齊冬帶來研討會報告,題目是“光片顯微鏡技術回顧”。齊冬介紹到,光片顯微鏡最早采用單側照明、單側成像,因此其視野小,兩側照明不均勻,導致其實際使用率極低、發展緩慢。為此,公司采用倒置樣品放置方式,對傳統儀器進行改進。相比于共聚焦顯微鏡,使用改進的光片顯微鏡可獲得更快的拍攝速度,光毒性更低。利用這款系統,研究人員獲得了斑馬魚心臟細胞質活動圖像,受精卵第一次分裂情況等圖像。同時,蒂姆溫特也采用了對側照明、對側成像方式。采用這種方式可獲得更大的視野,同時可對更厚的樣品進行成像。這款產品除了對動物進行觀察外,也可以對植物生長、生物光毒性進行觀察。
部分參展廠商:

卡爾蔡司(上海)管理有限公司

濱松光子學商貿(中國)有限公司

徠卡顯微系統(上海)貿易有限公司

奧林巴斯(北京)銷售服務有限公司

上海宇北醫療器械有限公司

尼康儀器(上海)有限公司

蒂姆溫特遠東有限公司

北京世紀桑尼科技有限公司

法國西諾光學

寧波永新光學股份有限公司

廣東中科奧輝科技有限公司

森西科技有限公司
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