果膠酶活力檢測方法

掌握可靠的酶分析定量方法是開展果膠酶研究工作的重要前提。果膠酶的測定方法很多，各具特點，且酶活單位的定義不同，要根據不同情況加以選擇對比。常用的酶活力測定方法有：

1　滴定法

滴定法主要用于測定果膠酯酶的活力，根據該酶作用機制，采用滴定羧基來評價酶活。果膠酯酶的活力還有一種測定方法，即，通過氣相色譜或液相色譜儀定量分析甲醇，根據甲醇的生成量來評價酶活，此方法比較精確但要求較高。

2　黏度下降法

黏度下降法基于果膠物質在酶的作用下大分子降解伴隨底物溶液黏度下降這一事實，以底物黏度下降的百分比來評價酶活。該方法所測定的酶活性，主要是反映內切酶酶活。

3　脫膠作用時間法

該方法根據果膠物質在未被酶解之前以及在酶解反應的不同時期能在異丙醇溶劑中形成大小不等的膠團而判斷酶的活性。該方法最能反映內切水解酶和內切裂解酶兩種酶在實驗條件下的綜合能力。

4　還原糖測定法

無論是內切還是外切果膠酶的作用，長鏈果膠分子的糖苷鍵斷裂結果都產生還原端基。這些還原端基的生成量。可用來表示酶活性。最為常用的為DNS(3，5－二硝基水楊酸)法。

5　235nm處紫外吸收測定法

這是專門測定裂解酶活力的一種方法。裂解酶作用于底物經歷一個β－消除反應，使底物生成非還原末端C4、C5 之間帶有雙鍵的產物，該產物在235nm處產生最大紫外吸收，酶活性測定正是根據該反應產物而設計的。