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  • 發布時間:2020-08-31 21:56 原文鏈接: 微生物營養及環境條件實驗(二)

    3、溫度對微生物生長的影響

    ⑴接種:取牛肉膏蛋白胨瓊脂斜面培養基8支,用接種環按無菌操作法分別在斜面上劃線接種大腸桿菌與枯草桿菌,勿劃破培養基。

    ⑵培養:將已接種的斜面培養基,分別放在4℃、28℃、37℃和45℃四種溫度下培養。

    ⑶觀察:培養48h、72h后觀察生長狀況,根據菌苔的大小確定其生長*適溫度。

    4、氫離子濃度對微生物生長的影響

    ⑴培養基制備:分組按下列配方配制不同pH值的培養基,并用pH計校證pH值,然后分裝入試管中,每管裝量5~6 mL,0.1Mpa滅菌30min備用,見表。

    ⑵接種培養:取供試pH培養基三組用接種環按無菌操作法于試管中分別接入大腸桿菌、吸水鏈霉菌、黑曲霉。在37℃下培養48h。

    ⑶檢查結果:出取培養物,觀察并記錄實驗結果。

    5、紫外線殺菌試驗

    ⑴制平板:取無菌平皿6套,將已熔化并冷卻至50℃左右的牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基

    不同pH值培養基配制表

    試管

    序號

    K2HPO4

    0.2mol/L(mL)

    檸檬酸

    0.1mol/L(mL)

    NaOH

    0.2mol/L(mL)

    硼酸

    0.2mol/L(mL)

    牛肉膏蛋白胨

    培養液(mL)

    總量

    (mL)

    pH值

    (近似值)

    1

    2

    3

    4

    5

    6

    7

    8

    9

    0.3

    0.9

    1.1

    1.3

    1.5

    1.9

    -

    -

    -

    1.7

    1.1

    0.9

    0.7

    0.5

    0.1

    -

    -

    -

    -

    -

    -

    -

    -

    -

    0.3

    0.7

    1.0

    -

    -

    -

    -

    -

    -

    1.7

    1.3

    1.0

    8

    8

    8

    8

    8

    8

    8

    8

    8

    10

    10

    10

    10

    10

    10

    10

    10

    10

    2.8

    4.4

    5.2

    6.0

    6.8

    7.6

    8.4

    9.2

    10.0

    按無菌操作法倒入平皿中,使冷凝成平板。

    ⑵菌懸液制備:取試管無菌水2支,以無菌操作法分別取金黃色葡萄球菌和黏質沙雷氏菌各2環,接入無菌水中充分搖勻,制成菌懸液。

    ⑶接種:將已倒入培養基的平皿分成2組,每組3個,一組接金黃色葡萄球菌,一組接沙雷氏菌,用無菌吸管吸取已制好的菌懸液各0.1 mL,分別在接種于二組平板上,用無菌玻璃刮鏟布均涂勻,隨即用無菌鑷子夾取無菌圖案紙一張,小心放在接種好的平皿中央。

    ⑷分組:將接種的六個平皿分為三組,每組一個金黃色葡萄球菌,一個黏質沙雷氏菌。

    ⑸紫外線處理:將紫外燈先開燈預熱2~3min。再將上述平皿置于紫外燈下,打開皿蓋,在30cm距離處照射。一組照1min,1組照5min,1組照10min,小心地取下圖案紙,蓋上皿蓋。用黑布或厚紙遮蓋,送入培養室內。★此時能否不進行遮蓋處理,直接拿出來培養?

    ⑹培養:將平皿于28~30℃溫度下培養48h。

    ⑺觀察:兩菌在不同的處理條件下的生長狀況,即有無生長、生長數量多少、生長的位置等。

    6、化學藥劑對微生物的作用

    ⑴制平板:取無菌平皿3套,將已熔化并冷卻至50℃左右的牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基按無菌操作法倒入平皿中,使冷凝成平板。

    ⑵制備菌懸液:取無菌水3支,用接種環分別取大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和枯草桿菌各1~2環接入無菌水中,充分混勻,制成菌懸液。

    ⑶接種:用無菌吸管分別吸取已制好的菌懸液0.1mL接種于平板上,用無菌玻璃刮鏟涂勻。注意做好標記。

    ⑷浸藥:將滅菌濾紙片浸入供試藥劑中。

    ⑸加藥劑:用無菌鑷子夾取浸藥濾紙片,注意把藥液瀝干,分別平鋪于同一含菌平

    板上,注意藥劑之間勿互相沾染并在平皿背面做好標記。

    ⑹培養:將平皿置于28℃下培養48~72h后觀察結果。


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