庫勒照明(Kohler)系統的正確調整?OLYMPUS BX53M顯微鏡的正確調試,主要工作之一是照明光路系統的調整,而其中的關鍵是庫勒照明系統的調整。對于每一位使用顯微鏡的人員,特別是作顯微照像的人員來說,應該對庫勒照明系統的原理及其調整步驟有一定的了解和掌握,才能充分發揮顯微鏡應有的功能,拍出來的照片才能在效果上比較一致而又完善。庫勒照明系統的原理簡單來說就是:光源發光體上任意一點發出的光,可以照明顯微鏡的視域范圍,而光源發光體上每一點所發出的光匯集起來,在顯微鏡的視域中就實現了非常充分而又均勻的照明。調整庫勒照明系統的目的,是為了使所觀察的視域能獲得均勻而又充分的照明,防止雜散光對照像系統造成影響或干擾,以免照像時在底片形成灰霧。高調整庫勒照明系統的必要部件:視場光闌、可進行合軸調整的聚光鏡系統。
??① 選用10×物鏡和10×目鏡;
??② 把聚光鏡前端透鏡擺進光路中,孔徑光闌調至適中的位置上(不大不小),再把聚光鏡升到zui頂的位置上,聚光鏡轉盤調至明視野“J”位置;
??③ 把視場光闌調至zui小(0.1);
??④ 載物臺上放上已封片的生物樣品,開亮光源,調焦清晰;
??⑤ 視域中會出現一個局部照明的區域或亮斑,這是視場光闌的模糊像,在其中可以清晰地看到樣品的細節;在它之外是較暗的視域,不一定能把樣品的細節看得清楚;
??⑥ 把聚光鏡微微地向下調,使視野中的亮斑逐漸收小,慢慢變成一個清晰的多邊形象,這便是視場光闌的清晰像;
??⑦ 一般情況下,多邊形象并不在視域中央,需要調整聚光鏡的一對調中螺絲,把視場光闌多邊形的像調至中央位置;
??⑧ 逐漸開大視場光闌,使多邊形象成為視域的內接多邊形,進一步核對調中的狀況,如對中不夠理想,繼續微調對中螺絲;
??⑨ 將視場光闌稍為再微微開大一些,使它的多邊形象恰好消失在視域的邊緣上,至此,庫勒照明系統調整完畢。庫勒照明系統調整好以后,整個視域照明均勻,拍攝的顯微照片明亮清晰,反差正常。在日后使用過程中應特別注意: a. 視場光闌不可任意開大,但可隨物鏡倍數的增大而將視場光闌收小,隨物鏡倍數的減小而開大; b. 聚光鏡的高低位置不準亂調,否則會破壞已調整好的庫勒照明系統; c. 使用10×以下物鏡時要將聚光鏡前端透鏡擺出光路外,使用10×或10×以上物鏡時要將前端透鏡擺入光路中; d. 關于物鏡倍數與視場光闌大小配合問題,在實際使用過程中,作為一般觀察不一定要收小或開大視場光闌,但作顯微照相時,為了避免雜散光線對照相系統的干擾,以便能拍攝到較完善的照片,則應在使用每一個倍數的物鏡時,把視場光闌調節到正好消失于所觀察的視域邊上,這是比較繁復的工作,但又非做不可。較為簡便的方法是把與各個倍數物鏡相對應的視場光闌事先調整好,并作好記號,以后使用時根據記號直接調至相應的位置。
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