實時熒光定量pcr中的絕對定量怎么做

在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析。隨著PCR反應的進行，PCR反應產物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。我們實驗室用BIOG-PCR技術測得的擴增曲線起跳值一般在30左右，每經過一個循環，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監測產物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。