實驗方法原理
L-天冬氨酸酰胺水解酶。
L-天冬酰胺＋H2O → L-天冬氨酸＋NH3
酶的測定是通過確定 Nessler's 試劑釋放的氨氣來實現的。一個單位的定義：在 37℃、pH 8.6 時，釋放每分鐘 1 umol NH3 的酶量。
實驗材料 L-天冬氨酸酰胺水解酶
試劑、試劑盒 Tris-HClL-天冬酰胺溶液三氯乙酸Nessler's 試劑
實驗步驟
實驗所需「試劑」具體見「其他」
1. 樣品和對照組的溶液：
2. 離心 5 min
0.5 ml 上清
7.0 ml H2O
1.0 ml Nessler’s 試劑
室溫放置 10 min，記錄 480 nm 吸收值
3. 通過硫酸銨標準曲線定量 NH3 濃度。
4. 計算
注意事項
其他
試劑：
0.05 mol/L Tris-HCl，pH8.6
0.01 mol/L L-天冬酰胺溶液（天冬酰胺，含 1 分子水，Mr＝150.1；150 mg 溶于 100 ml 0.05 mol/L Tris-HCl，pH 8.6）
1.5 mol/L 三氯乙酸（TCA，Mr＝163.4；24.5 g 溶于 100 ml 水中）
Nessler's 試劑