多聚螯合物酶組化實驗——PowerVision法

PowerVision 系統的原理是連接抗體上緊密地連接上許許多多的酶分子，呈串珠狀排列，由于利用了一種小的呈線性或很小枝狀多功能試劑作為骨架分子，與酶和免疫球蛋白交聯，排列緊密，形成串珠狀多聚物，因此相對分子質量較小。其特點是簡便、敏感。其操作流程同 EnVision 法，但一抗的稀釋度可在 EnVision 法基礎上作進一步稀釋。

石蠟切片

蛋白酶PBSH2O2樹膠二甲苯乙醇特異性一抗PowerVision 復合物DAB蘇木精鹽酸乙醇

滴管玻片

1. 4 μm 常規石蠟切片脫蠟至水，PBS 洗 3 min×3 次。

2. 預處理組織切片（可用酶消化或 AR 或不作任何處理，依一抗質量而定）。

3. PBS 洗 3 min×3 次。

4. 0.3％ H₂O₂ 阻斷內源性過氧化物酶 15 min，PBS 洗 3 min×3 次。

5. 適當稀釋特異性一抗，室溫孵育 1 h，PBS 洗 3 min×3 次。

6. 滴加山羊抗小鼠（或兔）IgG-HRP 多聚物（PowerVision），室溫孵育 30 min，PBS 洗 3 min×3 次。

7. 0.04％ DAB- 0.03％ H₂O₂ 顯色 8～12 min。

8. 水洗后，蘇木精襯染 1～3 min，水洗藍化 5～10 min，鹽酸乙醇分化 5 s，水洗 5 min，系列乙醇脫水，常規樹膠封片。

9. 觀察結果。