一.概述
(一)血細胞形態學基本概念
(二)血細胞形態學檢查方法
(三)血液學及血細胞形態學臨床應用
(四)臨床/形態學診斷與血液學檢驗及專業人員素質問題
二.血細胞染色法
(一)細胞染色機理
(二)瑞氏染色
(三)姬姆薩染色
(四)瑞氏-姬姆薩染色液鑒定
(五)瑞氏-姬姆薩混合染色
三.形態學與血液檢查與自身特性
(一)血常規
(二)白細胞分類
(三)骨髓外周血細胞形態學及分類
(四)血細胞涂片特性
四.血細胞形態學采樣、制片與檢查程序
(一)采樣、制片、染色工序至關重要
(二)染色
五.外周血細胞形態學檢驗技巧
(一)WBC形態學
(二)紅細胞形態學
(三)出現有核(內/巨幼)紅/幼粒細胞意義
(四)血小板巨核細胞
六.外周血細胞形態學檢查步驟、注意事項及檢查報告書寫內容
(一)注意事項
(二)外周血涂片檢查步驟
(三)外周血涂片報告內容
一. 概述
血細胞形態學是血液病 基礎診斷與血液學檢驗的重要項目
●正常人的血液及造血器官中,各種血細胞的數量有一定的正常范圍,不同血細胞及細胞發育的不同階段有一定形態結構特點。
●觀察血細胞形態和數量及其比例的變化來研究造血器官的結構和功能是血液學的重要組成部分,是診斷造血系統疾病最基本、被臨床普遍應用的最簡便實用的檢查方法。
●在造血系統疾病發生造血功能紊亂,引起血細胞形態學的量和質的改變。在臨床各科某些原發性疾病患者出現繼發性血液學形態學的病理改變,籍以了解患者機體狀況如感染(細菌、病毒、寄生蟲、藥物)等反應。
●血細胞形態學檢查是為臨產提供診斷依據,應備有患者的臨床表現基礎檢查初步診斷的病歷摘要,才能進行形態學檢查。必要時還要做骨髓活檢(切片、活檢材料滾片、活檢穿刺針殘液圖片)細胞化學染色,免疫學表型等檢查的必備程序。
●血細胞形態學檢查應包括外周血和骨髓兩部分組成,必須平行進行檢查。外周血細胞改變往往反映骨髓病變的重要信息,有利于診斷。
●疑似血液病和血液學檢查異常情況不能只依賴使用分析儀做血常規檢查而廢棄鏡下血涂片細胞形態學檢查的錯誤傾向。
二)細胞形態學檢查方法
1.光鏡細胞形態學;細胞形態學的基本內容和常用的檢查方法,廣泛用于臨床方法。
2.細胞化學染色:是細胞和化學兩者相結合的形態學方法,保持細胞完整組織結構顯示化學結構成分-定性/半定量,主要用于白血病分型鑒別診斷。
3.相差鏡檢查:用于觀察活細胞的內部結構及活動,細胞生長成熟衰亡過程及對各種刺激的反應
4.熒光顯微鏡檢查用熒光染色血細胞,常用于DNA、RNA的檢查。近年來由于流式細胞儀的應用而逐漸被替代。
5.電鏡(透射/掃描)觀察細胞超微結構改變了不少光鏡細胞結構概念,在形態學上是對光鏡的一個重要擴展和補充。
6.骨髓組織病理學檢查是對骨髓涂片檢查的一個重要補充,相互補遺提高診斷水平。
(三)血液學及血細胞形態學臨床應用:
●是臨床血液病診斷與治療及臨床醫學檢驗學的基礎工作。
●血細胞形態學適用于臨床血液病診斷的基礎診斷快速簡捷的要求。
●近年來由于血細胞學及超微結構、細胞化學、造血干細胞及其細胞因子、骨髓造血微環境、基質細胞、樹突狀細胞、淋巴系細胞發生及其疾病表現,細胞增殖動力學與細胞凋亡以及骨髓組織病理學免疫學、細胞遺傳學、融合基因、分子生物學的血液分析儀、流式細胞儀的應用,推動了血液病與血液學的新知識迅猛發展。
●當前血液病不能單憑臨床與形態學作出診斷,必須以臨床和血細胞形態學為基礎,將免疫學、細胞遺傳學及分子生物學新知識、新技術應用到血液學中,構成現代臨床血液學與分子生物學診斷技術,彌補形態學的經驗性與主觀性帶來負面缺陷,才能提高血液病的診斷與治療水平達到WHO新分類的分子生物學水平。
進入90年代以來,國內外采用多學科聯合技術綜合診斷技術與方案:
○FAB-AL(1976)、NCL(美國國家癌癥研究所1990)對FAB-AL分型的補充建議、AL-MIC分(類)型及MICM分型(1985-1990);
○FAB-CL分型 (1989)、中國CL分型 (1997);
○FAB-MDS分型(1982)、MIC 協作組對FAB-MDS分型提出補充建議(1987);
○WHO對造血系統及髓系惡性疾病和淋巴系惡性腫瘤WHO分類 (2000)
血細胞形態學診斷技術正在進入顯微圖象軟件時期:
○創造出許多多功能軟件,如血細胞形態學、細胞化學染色、血液病診斷與鑒別診斷、CL診斷與治療及教學系統多媒體軟件等。
○將顯微鏡與微機相連,應用儲存、分類、檢索軟件,編輯、打印診斷報告,并可附多幅細胞圖象。
(四)臨床-形態學診斷與血液學檢驗及專業人員素質
●普遍存在臨床與實驗室知識面分離現象:
○臨床醫師缺乏實驗室知識和技能,甚至不掌握基本形態學能力,診斷依賴實驗室報告
○實驗室人員往往缺乏血液病基本知識與診斷及鑒別診斷的能力“就形態論形態”,常有報告不確實
●具備臨床與細胞形態學等實驗室技術、知識的雙重本領及其相互融合十分重要。缺其一都是血液專業上的缺陷。
●隨著血液分析儀普及和檔次升高而忽視廢棄形態學檢查的錯誤傾向。即是最好的五分類血液分析儀也不能替代鏡下形態學觀察,否則導致延誤或漏診嚴重錯誤的發生
●形態學診斷是十分費時、細致、艱苦的工作,來不得半點虛假,
因此形態學專業人員要具有高素質的基本條件:
○要充分發揮人的主觀能動性;
○要具有較高的形態學水平、全面的臨床與血液學及有關邊緣學科知識,才能算得上德材兼備的優秀專業人才。
○因此只有認真觀察與思維才能發現問題,解決問題。應牢記著名微生物學家-巴士德銘言“在觀察的領域中,機遇總是偏愛那些有準備的頭腦”。
●樹立起臨床疾病的正確思維程序,遵循循證醫學起到“綱舉目張”的功效。是指導在臨床和檢驗實踐中確立診療時應以個人知識與技術和當前獲得最佳的臨床資料與參數有機的結合起來,充分運用診斷與檢驗技巧在工作中取得更多的客觀依據,才能把血液病診斷與血液學檢驗提高到新的高度。所謂技巧就是解決實際問題的訣竅。